CHƯƠNG 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4. Phương pháp nghiên cứu
2.4.6. Kỹ thuật giâm hom - gieo hạt
a. Giâm hom
- Địa điểm giâm hom: Tọa độ địa lý của địa điểm bố trí thí nghiệm là 22o18,554’vĩ độ Bắc, 103o46.743’ kinh độ Đông, có độ cao so với mực nước biển là 2.643 m, thuộc địa phận Vườn quốc gia Hoàng Liên (thị trấn Sa Pa, huyện Sa Pa, tỉnh Lào Cai).
- Vật liệu nghiên cứu
Để chuẩn bị hom: chọn những cây đường kính ngang ngực từ 18 cm đến 70 cm, chọn những cành bánh tẻ có kích thước khoảng 10-15 cm, có chồi sinh trưởng khỏe. Sau khi thu cành bỏ bớt 2/3 số lá tính từ gốc, sử dụng túi nilon màu đen bảo quản, bọc kín để chống thoát nước;
Sử dụng Indole Butyric Acid (IBA) làm chất kích thích sinh trưởng Thuốc diệt nấm: Viben - C 50BTN;
Thí nghiệm được thiết kế như sơ đồ trong hình 2.4.
Hình 2.3 Sơ đồ địa điểm bố trí thí nghiệm
Hình 2.4 Sơ đồ thiết kế thí nghiệm với IBA
Đối chứng 500 mg/L 1000 mg/L 1500 mg/L
Cát vàng
mịn
Đất mùn lẫn đất tầng A
Cát vàng
mịn
Đất mùn lẫn đất tầng A
Cát vàng
mịn
Đất mùn lẫn đất tầng A
Cát vàng
mịn
Đất mùn lẫn đất tầng A
ĐC1 ĐC2 CT1 CT2 CT3 CT4 CT5 CT6
Hom Vân sam fansipan
Xử lý hom với Vinben-C
Xử lý hom với IBA
Sử dụng dung dịch Viben - C 50BTN (nồng độ 2,5%) ngâm hom của phân loài Vân sam fansipan trong khoảng 30 phút để diệt nấm. Sau đó kích thích sinh trưởng bằng việc nhúng hom vào dung dịch có chứa chất IBA (sử dụng ba mức nồng độ: 500, 1.000 và 1.500 mg/L). Cuối cùng, trồng hom trên các luống đất với hai loại chất nền là đất mùn lẫn đất tầng A và cát vàng mịn. Sơ đồ trồng như trong hình 2.4. Thực hiện lặp lại 3 lần cho mỗi công thức thí nghiệm, số lượng mỗi lần lặp gồm 50 hom Vân sam fansipan.
Áp dụng chế độ chăm sóc như sau: Duy trì độ ẩm 75% bằng cách cứ 5 ngày tưới nước dạng phun sương một lần.
Sau 12 tháng thí nghiệm, tiến hành đánh giá ảnh hưởng của nồng độ IBA đã dùng để xử lý và các giá thể đã được sử dụng để giâm hom (đất mùn trộn lẫn đất tầng A và cát vàng mịn) đến hiệu quả nhân giống Vân sam fansipan thông qua ba chỉ tiêu là tỷ lệ hom ra rễ, số rễ trung bình trên một hom và tỷ lệ hom có lá non phát triển:
Tỷ lệ hom ra rễ (%) = (số hom ra rễ/tổng số hom được giâm) x 100%.
Số rễ trung bình trên một hom = Tổng số rễ của các hom /số hom ra rễ Tỷ lệ hom có lá non phát triển (%)=(số hom có lá non /số hom ra rễ) x 100%
Phân tích số liệu được thực hiện trong phần mềm Statgraphics, bao gồm cả việc kiểm tra sự tương quan giữa các yếu tố và kết quả thí nghiệm, kiểm tra độ chính xác của kết quả thống kê (mức độ tin cậy).
b. Gieo hạt
Để tiến hành nghiên cứu, công thức nghiệm (phương án) được thiết kế như sau:
Công thức 1 (CT 1): Đóng gói kín hạt Vân sam fansipan sau thu hoạch (30 hạt) và bảo quản ở nhiệt độ (4-50C) (trong ngăn mát tủ lạnh);
Công thức 2 (CT 2): Sau thu hoạch đóng gói kín và bảo quản hạt Vân sam fansipan (30 hạt) ở nhiệt độ phòng (~20-25oC);
Công thức 3 (CT 3): Đóng gói kín hạt Vân sam fansipan sau thu hoạch (30 hạt) và bảo quản ở nhiệt độ -100C (trong ngăn đá tủ lạnh);
Công thức 4 (Đối chứng: CT4): Phơi nắng và bảo quản hạt Vân sam fansipan (30 hạt) ở nhiệt độ phòng (~20-25oC).
Tất cả các công thức đều được tiến hành lặp lại 3 lần nhằm đảm bảo độ chính xác của kết quả nghiên cứu, cụ thể các bước tiến hành như sau:
Các bước tiến hành thí nghiệm
Bước 1: Thu hoạch hạt giống: Chọn thời điểm hạt giống chín nhưng chưa tách khỏi nón (thông thường vào tháng 5-6 ra nón và nón chín vào tháng 9-10).
Bước 2: Tách hạt giống, loại bỏ hạt lép, hạt bị sâu
Bước 3: Công thức 1 (CT1): Đóng gói kín và bảo quản ở nhiệt độ khoảng 4- 5oC; Công thức 2 (CT2): Đóng gói kín và bảo quản ở nhiệt độ phòng; Công thức 3 (CT3): đóng gói kín và bảo quản ở nhiệt độ -10oC;; Đối chứng (CT4): Phơi và bảo quản ở nhiệt độ phòng.
Bước 4: Tiến hành kiểm tra tỷ lệ nảy mầm theo các phương pháp bảo quản và đối chứng (phơi, bảo quản ở nhiệt độ trong nhà).
Bước 5: Mỗi tháng tiến hành kiểm tra tỷ lệ phát triển thành cây con trong 5 tháng sau khi nảy mầm.
Thực hiện khử trùng trước mỗi lần tiến hành kiểm tra tỷ lệ nảy mầm của hạt và tỷ lệ phát triển thành cây con, cụ thể như sau:
Ngâm hạt trong khoảng 30 phút trước khi gieo trong dung dịch thuốc tím (KMnO4) 0,05 %, sau đó rửa sạch lại bằng nước thường.
Đất gieo hạt là cát vàng pha ít đất. Khử trùng đất trước khi gieo hạt 1 ngày bằng Benlat 0,06 % (6 g Benlat hòa trong 10 lít nước phun đều cho 100 m2). Sau đó tưới nước ở dạng phun sương cho đất đủ ẩm trước khi gieo hạt.
c. Thử nghiệm trồng ra rừng tự nhiên từ cây con bằng phương pháp gieo hạt.
Ct1: Dưới tán rừng hỗn giao cây lá rộng, cây lá kim có độ dốc khoảng 17%;
độ tàn che khoảng 0,55; Nhiều thảm tươi cây bụi
Ct2: Khu vực có nhiều ánh sáng, độ dốc khoảng 20%;; độ tàn che khoảng 0,35; ít thảm tươi cây bụi
Ct3: Khu vực thảm thực vật ưu thế Vân sam fansipan; tầng thảm tươi dày đặc;; độ dốc khoảng 30%.
ĐC: Khu vực có độ cao tương đương (2.900 m);; không ghi nhận sự phân bố của Vân sam fansipan
Cây con trồng vào thời điểm 4/2017; Cây có chiều cao dao động từ 5 - 6 cm.
Tiến hành kiểm tra đo vào các thời điểm: 1/2018; 4/2019 và 4/2020
Tổng số cây con gồm 35 cây giống 1 năm tuổi được ươm từ hạt tại VQG Hoàng Liên, tiến hành trồng 30 cây/3 công thức thí nghiệm (1, 2, 3) tại khu Vân sam fansipan phân bố từ 2.600 - 2.900 m và 5 cây tại khu vực không ghi nhận sự phân bố của Vân sam fansipan ở độ cao tương đương 2.900 m.