CÁU TRÚC VI THẺ TINH HOÀN CHUỘT
3.3.1. Cấu trúc vi thể tinh hoàn chuột ở các nghiệm thức sau 4 tuần
Kết quả về mô tỉnh hoàn chuột ở các nghiệm thức qua 4 tuần khảo sát được thể
hiện ở Hình 3.16.
as
Hình 3.16. Cau trúc mô tinh hoàn chuột ở các nghiệm thức sau 4 tuần thí
nghiệm (scale bar 100 m)
S: ông sinh tinh; L: tế bào Leydig; hình sao: tinh trùng; hình tam giác: Vùng tế bào Sertoli
và tinh nguyên bao thưa thớt; vùng nét đứt: hoại từ; mãi tên một chiều: vị trí mang day bong tróc: hình chữ thập: phù né tuyên ké
Sau 4 tuần thử nghiệm, kết quả kiêm tra mô tỉnh hoàn của chuột cho thấy có sự khác biệt về cau trúc tinh hoàn giữa các nghiệm thức thử nghiệm như sau:
Ở nghiệm thức DC có thé thay cấu tạo của các ông sinh tinh không có dau hiệu bị biến đổi hay tôn thương: khoảng cách giữa các ông sinh tinh rất nhỏ hoặc không có; độ day biểu mô ông sinh tinh lớn; các tế bào Leydig trong mô kẻ giữa các ống sinh tinh có kích thước và hình dạng đồng nhất; thấy được cấu tạo vi thé Sertoli va tỉnh nguyên bào; hoạt động sinh tỉnh điển ra bình thường, có thể quan sát thấy tỉnh
trùng hình thành tinh trùng tương đối nhiều ở lòng ông sinh tinh.
Kết quả kiêm tra cho thay, mô tinh hoàn của chuột ở nghiệm thức Pb có những thay đôi nghiêm trọng. Có thé quan sát thay các ống sinh tinh hình dang không đều nhau, xuất hiện sự bong tróc ở màng đáy, phủ nề tuyến kẽ và hoại tử ở trong lòng ông sinh tinh, làm cho khoảng cách giữa các ông sinh tinh khá rõ, trong khi các nghiệm thức DC không có (nguyên nhân làm tăng kích thước vả khối lượng của tinh hoàn); có thé thay các tế bào Sertoli và tinh nguyên bào ở nghiệm thức Pb thưa hơn và giảm về số lượng, dan đến sự hình thành khoảng trồng ở lòng ống sinh tỉnh hiện ra rất lớn so
với nghiệm thức ĐC, chứng to quá trình sinh tinh ở nghiệm thức Pb bị giảm mạnh,
dong thời, có thé quan sát thấy ở một số lòng ống sinh tinh tập trung số lượng lớn
tinh trùng một cách bat thường. có thé là do tác động của chi đã làm thoái hoá các ống sinh tinh dan đến việc tích tụ tinh trùng trong lòng ống sinh tinh (đây có thẻ là nguyên nhân dẫn đến giảm số lượng vả chất lượng tỉnh trùng ở mảo tỉnh).
Ở nghiệm thức PbVC, có thé quan sát thay sự bong tróc ở màng đáy, tuy nhiên sự phù né tuyến kẽ và hoại tử ở trong lòng ống sinh tinh đã giảm hin so với nghiệm thức Pb, làm cho khoảng cách giữa các ông sinh tinh cũng giảm di rõ rệt; vẫn có thé thay các tế bào Sertoli và tinh nguyên bao bị thưa hơn và giảm về số lượng ở một số ống sinh tinh nhưng không nghiêm trọng như ở nghiệm thức Pb; quá trình sinh tinh
và số lượng tinh trùng được phục hôi đáng kẻ, gần như không quan sát thay tinh trùng
tập trung số lượng lớn bat thường ở lòng ông sinh tỉnh.
Ở nghiệm thức PbSR20, quan sát thấy có sự bong tróc ở màng đáy đã được cải thiện, tuy nhiên sự phù nề tuyến kẽ vẫn còn tương đối nhiều; số lượng tế bào Sertoli và tinh nguyên bào ở nhiều ông sinh tinh vẫn con thưa hơn. tuy nhiên khoảng trong ở lòng ống sinh tinh cho thay đấu hiện được cải thiện dẫn so với nghiệm thức Pb; quá
trình sinh tinh va hiện tượng tinh trùng tập trùng số lượng lớn một cách bất thường ở lòng ống sinh tinh cũng cho thay dấu hiệu cải thiện nhưng không nhiều.
Đối với nghiệm thức PbSR30 vả PbSR40, không quan sát thay sự bong tróc ở
màng đáy và hoại tử ở trong lòng ông sinh tinh ở nghiệm thức PbSR40 và ở PbSR30 là không đáng kẻ. Sự phù nề tuyến kẽ và khoảng cách giữa các ông sinh tinh đã được cải thiện đáng kể. Khoảng trồng ở lòng ống sinh tinh, quá trình sinh tinh và hiện tượng
61
tinh trùng tập trùng số lượng lớn một cách bat thường ở lòng ống sinh tinh cũng được cải thiện rõ rệt so với nghiệm thức Pb và PbSR20. Tuy nhiên, các tế bào Sertoli và tinh nguyên bao vẫn thưa hơn và giảm về số lượng so với nghiệm thức DC và PbVC.
Kết qua phân tích mô học cho thay chì làm tôn thương nghiêm trọng cấu trúc vi thê tinh hoàn của chuột. Trong khi đó, vitamin C và dịch ép quả Sơ ri đều thé hiện được vai trò kháng độc tính chì, giúp bảo vệ và duy trì cau trúc mô tinh hoàn trước tác động độc hại của chì. Trong đó địch ép quả Sơ ri với nồng độ 30 và 40 mg/kg thé trọng thê hiện hiệu quả vượt trội hon so với nồng độ 20 mg/kg thê trọng. Kết quả này
cũng tương ứng với kết quả đánh giá kích thước, khối lượng của tỉnh hoàn và số
lượng. chất lượng tinh trang chuột sau 4 tuần thử nghiệm.
3.3.2. Cau trúc vỉ thể tỉnh hoàn chuột ở các nghiệm thức sau 8 tuần
Kết quả về mô tinh hoàn chuột ở các nghiệm thức qua 8 tuần khảo sát được thé
hiện ở Hình 3.17.
Ze ol AA. — XẾN . ny Pgh Sa ry
Hình 3.17. Cau trúc mô tinh hoàn chuột ở các nghiệm thức sau 8 tuần thí
nghiệm (scale bar 100 um)
S: ống sinh tinh; L: té bào Leydig; hình sao: tinh trùng; hình tam giác: vừng tế bao Sertoli
và tinh nguyên bào thưa thot; vùng nét dirt: hoại tử; mũi tên một chiếu: vị trí mang đáy bong tróc: hình chữ thập: phù nề tuyên ké
Sau § tuân thứ nghiệm, kết quả kiêm tra mô tỉnh hoàn của chuột cho thay có sự
khác biệt về cầu trúc tỉnh hoản giữa các nghiệm thức thử nghiệm như sau:
Ở nghiệm thức DC vẫn không có dấu hiệu bị biến đôi hay tốn thương; khoảng cách giữa các ống sinh tinh rất nhỏ hoặc không có: các tế bao Leydig trong mô kẽ giữa các ống sinh tinh có kích thước và hình dạng đồng nhất; số lượng tế bào Sertoli và tinh nguyên bào nhiều hơn đáng ké so với thời điểm 4 tuần: hoạt động sinh tinh diễn ra bình thường, có thé quan sát thay tinh trùng hình thành tinh trùng tương đối nhiều ở lòng ống sinh tính.
Kết quả kiểm tra cho thấy, mô tỉnh hoàn của chuột ở nghiệm thức Pb có những thay đôi nghiêm trọng hơn so với thời điểm 4 tuần thử nghiệm. Có thé quan sát thay các tế bao Sertoli và tỉnh nguyên bao dan cạn kiệt, khoảng trong ở lòng ông sinh tinh
hiện ra rất lớn, vẫn xuất hiện sự bong tróc ở màng đáy và hoại tử ở trong lòng ống sinh tinh, đặc biệt sự phủ nề tuyến kẽ diễn ra ở hau hết các khoảng cách giữa các ông sinh tỉnh; quá trình sinh tỉnh ở nghiệm thức Pb bị giảm mạnh, làm ảnh hưởng rất lớn đến số lượng và chất lượng tỉnh trùng.
Đôi với nghiệm thức có bô sung vitamin C và dich ép quả Sơ ri cho thay sự cải thiện tương đồng với đối chứng, giúp duy trì được cầu trúc ông sinh tinh bình thường.
Trong đó, ở các nghiệm thức bô sung dich ép quả Sơ ri chỉ còn một số vị trí bị thứa
thớt các tế bào Sertoli và tỉnh nguyên bao nhưng không đáng kể ở nông độ 30 và 40 mg/kg thê trong. Tuy nhiên ở nồng độ 20 mg/kg thé trong cũng có sự cải thiện về cầu trúc tỉnh hoàn, nhưng vẫn còn nhiều vị trí tế bảo thưa thớt, số lượng tỉnh trùng tăng không nhiều.
Kết quả trên cho thay, sau 8 tuần thir nghiệm, chi vẫn tiếp tục gây tồn thương lên cấu trúc vi thé của tinh hoàn. Vitamin C và dich ép quả Sơ ri đều thé hiện được vai trò kháng độc tinh chì. giúp bảo vệ và duy trì cau trúc mô tinh hoàn trước tác động độc hai của chì. Trong đó địch ép qua Sơ ri với nồng độ 30 và 40 mg/kg thé trọng thể
hiện hiệu quả vượt trội hơn so với nông độ 20 mg/kg thé trong.
3.3.3. Ban luận về cau trúc vi thể tinh hoàn của chuột
Nghiên cứu của chúng tôi cho thấy, chì đã gây ra những tôn thương nghiệm trọng đến cau trúc vi thé tỉnh hoàn sau 4 tuần và 8 tuần khảo sát. Vitamin C và dịch
63
ép quả Sơ ri đã giúp giảm bớt các tôn thương, bảo vệ cau trúc vi thê tỉnh hoàn của chuột bị nhiễm chỉ.
Kết quả này tương đồng với nghiên cứu [31], ở nhóm chuột uống chi acetate 0,2% xuất hiện rat nhiều các ton thương về mô tinh hoàn; biểu mô ống sinh tinh trở nên mỏng; các tinh nguyên bao, tinh trùng vả quá trình sinh tỉnh giảm đáng ké so với nhóm đối chứng: số lượng tế bào Leydig và tế bao Sertoli giảm hoặc bị teo, các ton thương tăng lên và đạt mức tối đa sau 42 ngày thử nghiệm. Trong khi đó, các nhóm uống chi acetate nhưng có kết hợp với acid ascorbic (140. 420 mg/kg thé trong) và thiamine (10, 30 mg/kg thé trọng) đã cải thiện đáng kế các tốn thường trên. Nghiên cứu [32], chuột uống chi acetate (20 mg/kg thé trọng) trong 60 ngày, làm xuất hiện nhiều tôn thương về mô tinh hoàn, ống sinh tinh bị thu nhỏ, thành dng bị biến dang, phủ né tuyến kẽ, suy giảm nghiêm trọng các tỉnh nguyên bảo vả tinh tring, các tế bào Sertoli bị hoại tử. Các tế bào không lồ được nhân đôi và xuất hiện trong ống sinh tỉnh.
Trong khi đó, ở các nhóm có bỗ sung vitamin C liều 20 mg/kg thé trọng đã cho kết quả cải thiện và giảm thiêu các tác động bat lợi của nhiễm độc chi. Theo [34]. chuột uống chì liều 60 mg/kg thé trọng, trong 6 tuần thay sự thoái hoá của biểu mô ống sinh tinh kèm theo đó là sự giảm đáng ké số lượng tinh trùng trong lòng ống sinh tinh. Tuy
nhiên, vitamin C liều 60 mg/kg thé trọng đã làm giảm tác động độc hại của chì đối
với hệ sinh sản. giúp phục hỏi lại cau trúc mô tinh hoàn gan tương đồng với nhóm đối chứng. Theo [38], chuột uống chi acetate (30 mg/kg thê trong) trong 6 tuần cho thay sự thay đổi đáng ké trong cau trúc mô tinh hoản. Các ông sinh tinh bị teo va giảm đường kính. Sự thoái hoá ở tế bào Sertoli và suy giảm số lượng tính nguyên bào và tinh tùng, quá trình sinh tinh bị gián đoạn nghiêm trọng. Suy giảm tế bao Leydig, tắc nghẽn mạch máu và phù nề ở tuyến kẽ. Trong khi đó, ở nhóm chuột uống chi acetate kết hợp với vitamin C (100 mg/kg thẻ trọng) cho thay kết quả cai thiện đáng kê vẻ cau trúc vi thẻ tỉnh hoản, giảm bớt đáng kẻ các ảnh hưởng của chỉ lên cầu trúc mô tỉnh hoàn. Theo [39]. chuột uống chỉ acetate (500 ppm) sau 30 ngày cho thấy số lượng tế bao Leydig va tế bao Sertoli giảm đáng ké, độ dày đường kính ống sinh tỉnh giảm rõ rệt. trong khi tỉ lệ ống không bảo tăng đáng kể. Tuy nhiên, các thông số này
được cải thiện đáng ở nhóm có kết hợp điều trị bằng NVC (200 mg/kg thê trọng).
Theo [53], chuột uống chi acetate (30 mg/kg thé trọng) trong 7 ngảy cho thấy biểu mô ống sinh tinh bị mỏng di do thoái hoá nghiêm trọng và hoại tử, xuất hiện phù nề tuyến kẽ, tinh trùng hoạt động tập trung nhiều một cách bat thường trong lòng ông sinh tinh. Theo [44], chuột uéng chi acetate liêu 100 mg/kg thé trong cho thay cac dng sinh tinh bi teo và thoái hoá, kèm theo đó là mat kha năng sinh tinh, độ day biểu mô ông sinh tinh giảm, số lượng tinh nguyên bảo và tinh trùng giảm nghiêm trọng, tăng lòng ống và sự hiện diện của các không bào. Nghiên cứu [52]. chuột udng chi acetate (50 mg/L) trong 8 tuần biểu mô ống sinh tinh bị thoái hoá, dẫn đến tích tụ tinh trùng trong lòng ông sinh tinh, cùng với xuất huyết và phủ né ở kẽ.
Như vậy, có thé thay chi đã gây ra những biến đổi nghiêm trọng trong cấu tạo vi thé tinh hoản ở chuột bị nhiễm chi. Nguyên nhân chính gây ra những tôn thương đến cấu trúc vi thé tinh hoàn có thé do các tác động của stress oxi hoá sinh ra bởi độc tính chì. Tiếp xúc với chi lam tăng quá trình peroxide hoá lipid và giảm khả năng chống oxi hoá của tỉnh hoàn làm hỏng mang trong của tinh hoàn. Điều nảy gây ra sự thoái hoá của tính nguyên bào và tế bào Leydig, làm rối loạn quá trình sinh tỉnh và làm giảm số lượng tinh trùng [56]. Mặt khác, chì tích tụ trong mô tinh hoàn làm gia tăng các gốc tự do và thúc day quá trình AI ở tinh hoàn, đây cũng chính là nguyên nhân dẫn dén sư suy giảm số lượng các tỉnh nguyên bao, tinh trùng, tế bao Leydig va tế bao Sertoli. Bên cạnh đó, chì gây cản trở quá trình tong hợp và giải phóng FSH va LH, làm giảm số lượng và chức năng của tế bao Leydig, đồng thời cũng làm giám quá trình sinh tinh [39]. Chi còn gây thoái hoá ống sinh tinh dẫn đến tích tụ số lượng lớn tinh trùng một cách bất thường trong lòng ông, ở một số lòng ống sinh tinh tập
trung [52].
Việc bổ sung vitamin C từ dịch ép quả So ri được sử dụng như một chất chống oxi hoá dé chống nhiễm độc chì, giúp bảo vệ cấu trúc tỉnh hoàn do cơ chế chống lại
oxi hoá của vitamin C [56]. Bên cạnh đó, thông qua tác dụng chống oxi hoá của vitamin C, cho thay tác dụng cải thiện độc tính của chì đối với tinh trạng hoại tử tế bao sinh tinh, tế bao sinh tinh của ông, phủ né và xuất huyết kẽ. Ngoài ra. vitamin C
65
có thê làm tăng nồng độ LH, FSH và testosterone và cải thiện các thông số của tinh trùng và quá trình sinh tinh [39]. Do đó, việc bỗ sung dich ép qua Sơ ri đã giúp bảo
vệ cấu trúc vi thẻ tỉnh hoàn của chuột bị nhiễm chi trong 8 tuần.
KET LUẬN VÀ KIEN NGHỊ
1. KET LUẬN
Kết quả đề tải này thu được cho phép rút ra một số kết luận sau:
Dịch ép quả Sơ ri đã thê hiện được khả năng kháng độc tính chì, giúp duy trì
kích thước và khối lượng tinh hoan của chuột bị nhiễm chì ở cả 3 nông độ khảo sát
(20, 30 và 40 mg/kg thé trọng) sau 4 và 8 tuần thí nghiệm. Trong đó, nông độ 40 mg/kg thé trọng cho thấy hiệu qua cao nhất.
Dịch ép quả Sơ ri đã thê hiện được khả năng kháng độc tính chì, giúp duy trì số lượng và chất lượng (ti lệ sống, ti lệ di động bình thường và tỉ lệ dj dạng) của tinh trùng ở chuột bị nhiễm chì sau 4 và 8 tuần thí nghiệm. Trong đó. dịch ép quả Sơ ri ở nông độ 30 và 40 mg/kg thé trọng có hiệu quả tốt tương đương nhau và tương đồng với đôi chứng và vitamin C thương mại. Riêng nông độ 20 mg/kg thé trọng cũng thé
hiện tác dụng này nhưng hiệu quả chưa cao.
Dịch ép quá Sơ ri đã thê hiện vai trò làm giảm tác động của chi đối cấu trúc mô học của tỉnh hoàn sau 8 tuần thí nghiệm. Trong đó, dịch ép quả Sơ ri nồng độ 30 và 40 mg/kg thé trọng có hiệu quả tốt tương đương nhau.