3.2. Hiệu giá kháng thể sau tiêm phòng vắc xin H5N1 trên đàn gia cầm của tỉnh Quảng Ninh
3.2.3. Giám sát huyết thanh học của đàn gia cầm sau khi được tiêm phòng vắc
Trước khi theo dõi đáp ứng miễn dịch sau tiêm phòng chúng tôi tiến hành lấy mẫu huyết thanh để kiểm tra sự lưu hành của virus cúm trong cơ thể của gia cầm.
Các mẫu huyết thanh được lấy ngẫu nhiên trên các đàn gia cầm trên địa bàn của 05 huyện Đông Triều, Quảng Yên, Uông Bí, Hoành Bồ và Tiên Yên. Kết quả được thể hiện ở bảng 3.8.
Bảng 3.8: Kết quả giám sát đàn gia cầm trước khi tiêm vắc xin H5N1 năm 2015
STT Huyện, Thị Loài Số mẫu
Chỉ tiêu kiểm tra
Lâm sàng KT kháng H5 HI
1 Đông Triều Vịt 10 Khoẻ - -
Gà 10 Khoẻ - -
2 Uông Bí Vịt 10 Khoẻ - -
Gà 10 Khoẻ - -
3 Quảng Yên Gà 10 Khỏe - -
Vịt 10 Khỏe - -
4 Hoành Bồ Gà 10 Khỏe - -
Vịt 10 Khỏe - -
5 Tiên Yên Gà 10 Khỏe - -
Vịt 10 Khỏe - -
Bảng 3.8. cho thấy, về lâm sàng, những gia cầm này đều không có biểu hiện lâm sàng, xét nghiệm không có kháng thể, phản ứng ngăn trở ngưng kết hồng cầu âm tính. Như vậy đàn gia cầm hoàn toàn khỏe mạnh, không có kháng thể kháng H5 và cũng không có virus cúm gia cầm. Kết quả trên đảm bảo cho kết quả đánh giá sau khi tiêm vắc xin được chính xác.
Sau khi tiêm phòng vắc xin cúm H5N1 mũi 1 cho đàn gà của 14 huyện, thị xã, thành phố của tỉnh, chúng tôi tiến hành lấy mẫu huyết thanh, kiểm tra đáp ứng miễn dịch của gà tại 05 huyện, thị: Đông Triều,Quảng Yên, Uông Bí, Hoành Bồ và Tiên Yên ở các thời điểm 30 ngày, 60 ngày, 90 ngày, 120 ngày và 150 ngày.
3.2.3.1. Hiệu giá kháng thể của gà sau khi tiêm phòng vắc xin H5N1
Sau khi lấy mẫu huyết thanh, mẫu được chuyển ngay về Cơ Quan Thú y vùng II Hải phòng để xác định hiệu giá kháng thể.
Kết quả kiểm tra hiệu giá kháng thể của đàn gà được tiêm vắc xin H5N1 tại tỉnh Quảng Ninh được thể hiện qua bảng 3.9.
Bảng 3.9: Hiệu giá kháng thể trung bình của gà được tiêm vắc xin H5N1
Thời điểm lấy mẫu sau tiêm vắc xin mũi 1
(ngày)
Tổng số mẫu
Số mẫu (+ )
Tỷ lệ dương tính (+)
Số mẫu đạt bảo hộ
Tỷ lệ bảo hộ (% )
GMT (log2)
30 50 45 90,00 42 84,00 5,42
60 50 48 96,00 44 88,00 5,62
90 50 44 88,00 39 78,66 4,96
120 50 40 80,00 34 68,00 4,23
150 50 36 72,00 16 32,00 3,18
Qua bảng 3.9 cho thấy:
+ Ở thời điểm 30 ngày sau khi tiêm vắc xin mũi 1, làm phản ứng HI có 45/50 mẫu dương tính, chiếm tỷ lệ 90,00%. Trong các mẫu dương tính có 42 mẫu có hiệu giá kháng thể ≥ 4log2, tỷ lệ bảo hộ đạt 84,00%. Hiệu giá kháng thể trung bình là 5,42 log2 . Kết quả nghiên cứu hiệu giá kháng thể trung bình của đàn gà sau khi tiêm vắc xin 4 tuần tại Quảng Ninh thấp hơn kết quả nghiên cứu của Đào Yến Khanh (2005) [16] tại cùng thời điểm (5,42 log2 so với 5,47 log2).
+ Ở thời điểm 60 ngày sau khi tiêm vắc xin mũi 1, làm phản ứng HI có 48/50 mẫu dương tính, chiếm tỷ lệ 96,00%. Trong các mẫu dương tính có 44 mẫu có hiệu giá kháng thể ≥ 4log2, tỷ lệ bảo hộ đạt 88,00%. Hiệu giá kháng thể trung bình là 5,62 log2. Kết quả nghiên cứu hiệu giá kháng thể trung bình của
đàn gà sau khi tiêm vắc xin 8 tuần tại Quảng Ninh thấp hơn kết quả nghiên cứu của Đào Yến Khanh (2005) [16] tại cùng thời điểm (5,62 log2 so với 7,76 log2).
+ Ở thời điểm 90 ngày sau khi tiêm vắc xin mũi 1, làm phản ứng HI có 44/50 mẫu dương tính, chiếm tỷ lệ 88,00%. Trong các mẫu dương tính có 39 mẫu có hiệu giá kháng thể ≥ 4log2, tỷ lệ bảo hộ đạt 78,66%. Hiệu giá kháng thể trung bình là 4,96 log2.
+ Ở thời điểm 120 ngày sau khi tiêm vắc xin mũi 1, làm phản ứng HI có 40/50 mẫu dương tính, chiếm tỷ lệ 80,00%. Trong các mẫu dương tính có 34 mẫu có hiệu giá kháng thể ≥ 4log2, tỷ lệ bảo hộ đạt 68,00%. Hiệu giá kháng thể trung bình là 4,23 log2. Kết quả nghiên cứu hiệu giá kháng thể trung bình của đàn gà sau khi tiêm vắc xin 16 tuần tại Quảng Ninh thấp hơn kết quả nghiên cứu của Đào Yến Khanh (2005) [16] tại cùng thời điểm (4,23 log2 so với 4,94 log2).
+ Ở thời điểm 150 ngày sau khi tiêm vắc xin mũi 1, làm phản ứng HI có 36/50 mẫu dương tính, chiếm tỷ lệ 72,00%. Trong các mẫu dương tính có 16 mẫu có hiệu giá kháng thể ≥ 4log2, tỷ lệ bảo hộ đạt 32,00%. Hiệu giá kháng thể trung bình là 3,18 log2 .
Như vậy hiệu giá kháng thể trung bình của đàn gà đạt mức cao nhất tại thời điểm 60 ngày sau khi tiêm vắc xin mũi 1 (5,62 log2), sau đó giảm dần, đến thời điểm 150 ngày giảm xuống còn 3,18 log2.
Theo Tô Long Thành (2005) [26], khi sử dụng vắc xin H5N1 cho đàn gà thí nghiệm hiệu giá kháng thể đạt mức cao nhất là 9 log2 trong vòng tuần thứ 3 sau khi dùng vắc xin. Hiệu giá này được duy trì trong vòng 4 tuần. Mức độ bảo hộ của kháng thể vẫn có thể đảm bảo đến tuần thứ 25.
Thời điểm từ 30 ngày đến 60 ngày, hiệu giá kháng thể của đàn gà tại tỉnh Quảng Ninh được tiêm vắc xin H5N1 của NAVET-VIFLUVAC thấp hơn hiệu giá kháng thể của gà thí nghiệm khi khảo nghiệm vắc xin H5N1 rất nhiều (5,62 log2 so với 9 log2)
Theo chúng tôi, sở dĩ có sự khác nhau như vậy là do những nguyên nhân sau:
Đàn gà trong tỉnh do rất nhiều thú y viên cơ sở cùng tiêm, nên có thể có sai sót, không đảm bảo được yêu cầu kỹ thuật về vị trí tiêm, liều lượng thuốc, kỹ thuật tiêm, kỹ thuật bảo quản vắc xin… Môi trường sống của đàn gà ở ngoài thực địa cũng khác nhiều so với gà trong phòng thí nghiệm. Ví dụ, gà ở thực địa còn có sự tiếp xúc giữa đàn này với đàn khác, giữa gà với thủy cầm, với các động vật như lợn, chim bồ câu, nguồn thức ăn, nước uống trong thiên nhiên v.v...
Việc khảo nghiệm vắc xin trong phòng thí nghiệm chỉ với số lượng gia cầm ít, cán bộ kỹ thuật có trình độ chuyên môn cao trực tiếp tiêm và theo dõi.v.v...
Thời gian bảo hộ của đàn gà trong thí nghiệm khảo nghiệm vắc xin ở phòng thí nghiệm cũng dài hơn so với đàn gà của tỉnh Quảng Ninh (25 tuần so với 20 tuần) cũng có thể do những nguyên nhân trên.
Như vậy, khi sử dụng vắc xin H5N1 ngoài thực địa, cần tiêm nhắc lại trong thời gian ≤ 4 tháng mới đảm bảo được khả năng phòng bệnh (không phải là 25 tuần như khuyến cáo của nhà sản xuất)
Tỷ lệ bảo hộ trên đàn gà ở thực địa cũng đạt mức cao nhất lúc 60 ngày sau tiêm, sau đó giảm dần đến 150 ngày giảm xuống còn 32,00%.
Theo quy định 1361/KTY- DT ngày 02 tháng 12 năm 2005 của Bộ Nông nghiệp và phát triển Nông thôn, tiêu chí đánh giá đàn gia cầm được bảo hộ là tỷ lệ phải đạt ít nhất 70% số mẫu có hiệu giá kháng thể HI ≥ 4log2 .
Như vậy, tính đến thời điểm 120 ngày sau khi tiêm vắc xin đàn gà trong toàn tỉnh vẫn còn khả năng bảo hộ. Đến thời điểm 150 ngày sau khi tiêm vắc xin, đàn gà trong tỉnh không còn khả năng bảo hộ nữa.
Biến động hiệu giá kháng thể trung bình và độ dài miễn dịch của gà được tiêm vắc xin H5N1 tại tỉnh Quảng Ninh được thể hiện ở hình 3.6.
Hình 3.6. Biến động hiệu giá kháng thể của gà được tiêm vắc xin H5N1
Qua đồ thị trên ta thấy hiệu giá kháng thể ở 30 ngày sau tiêm phòng đạt 5,42 log2 , sau 60 ngày lên tới 5,62 log2, đến 90 ngày còn 4,96 log2 và 120 ngày giảm còn 4,23 log2 vẫn còn khả năng bảo hộ của vắc xin, đến 150 ngày hiệu giá kháng thể chỉ còn 3,18 log2 thì không còn khả năng bảo hộ. Theo quy định 1361/KTY-DT ngày 02 tháng 12 năm 2005 của Bộ Nông nghiệp và phát triển Nông thôn, tiêu chí đánh giá đàn gia cầm được bảo hộ là tỷ lệ phải đạt ít nhất 70% số mẫu có hiệu giá kháng thể HI ≥ 4 log2.
3.2.3.2. Tần số phân bố các mức kháng thể của gà được tiêm vắc xin H5N1 tại các thời điểm lấy mẫu
Tần số phân bố các mức kháng thể của gà tiêm vắc xin tại các thời điểm lấy mẫu được thể hiện qua bảng 3.10.
Bảng 3.10. Tần số phân bố các mức kháng thể của gà được tiêm vắc xin H5N1
Thời điểm lấy mẫu sau tiêm vắc xin mũi 1
(ngày)
Tỷ lệ các mẫu có hiệu giá kháng thể log2
Tổng số mẫu
(-) ≤ 3 4 5 6 7 8
30 2 6 9 15 10 7 1 50
60 2 4 4 16 11 10 3 50
90 6 5 6 13 10 8 2 50
120 10 6 7 11 8 7 1 50
150 14 20 8 7 1 0 0 50
Qua bảng 3.10 cho ta thấy: Khi kiểm tra hiệu giá kháng thể bằng phản ứng HI tại các thời điểm khác nhau thì hiệu giá kháng thể của các mẫu được phân bố đều từ ≤ 4 log2 đến 8 log2, nhưng với tỷ lệ khác nhau.
Tại thời điểm 150 ngày có tới 28% số mẫu không có đáp ứng miễn dịch (chiếm tỷ lệ cao nhất); so với thời điểm 60 ngày và 120 ngày chỉ có 4 - 20% số mẫu không có đáp ứng miễn dịch (tỷ lệ thấp nhất).
Tại thời điểm 30 ngày, hiệu giá kháng thể của các mẫu tập trung từ 4 log2 đến 7 log2, các mẫu đạt tỷ lệ 8 log2 rất thấp (5%). Hiệu giá kháng thể tập trung ở mức 4 - 7 log2. Theo Tô Long Thành và Đào Yến Khanh (2009) [30]: gà được tiêm vắc xin sau 1 tháng có hiệu giá kháng thể tập trung ở 5 - 7 log2.
Tại thời điểm 60 ngày, hiệu giá kháng thể của các mẫu tập trung ở mức cao từ 4 log2 đến 8 log2, các mẫu đạt tỷ lệ 8 log2 là 6%. Hiệu giá kháng thể tập trung ở mức 4 – 8 log2. Theo Tô Long Thành và Đào Yến Khanh (2009) [30]: gà được tiêm vắc xin sau 2 tháng có hiệu giá kháng thể tập trung ở 7 - 9 log2. Có thể nhận thấy rằng gà có hiệu giá kháng thể cao tại thời điểm này tăng cao hơn so với thời điểm 30 ngày sau khi tiêm vắc xin mũi 1.
Tại thời điểm 90 ngày, hiệu giá kháng thể của các mẫu tập trung ở mức cao từ 4 log2 đến 6 log2, các mẫu đạt tỷ lệ 8 log2 giảm xuống còn 4%. Có thể nhận thấy rằng, gà có hiệu giá kháng thể cao tại thời điểm này giảm đi so với thời điểm 60 ngày sau khi tiêm vắc xin mũi 1.
Tại thời điểm 120 ngày, hiệu giá kháng thể của các mẫu tập trung ở mức từ 3 log2 đến 5 log2. Theo Tô Long Thành và Đào Yến Khanh (2009) [30]: gà được tiêm vắc xin sau 4 tháng kháng thể vẫn đạt mức bảo hộ tập trung ở 5 – 8 log2. Có thể nhận thấy, gà có hiệu giá kháng thể cao tại thời điểm này giảm rất nhiều so với các thời điểm trước đó.
Tại thời điểm 150 ngày hiệu giá kháng thể của các mẫu tập trung ở mức không đạt bảo hộ từ ≤ 4 log2 đến 5 log2. Không có mẫu nào đạt được hiệu giá kháng thể ≥ 7 log2.
Như vậy, tại thời điểm 60 ngày sau khi tiêm vắc xin mũi 1, hiệu giá kháng thể phân bố ở các mức cao, rồi đến thời điểm 30 ngày, còn ở các thời điểm khác thì hiệu giá kháng thể tập trung ở các mức thấp hơn.
Tần số phân bố các mức kháng thể của gà tiêm vắc xin tại các thời điểm lấy mẫu được thể hiện qua qua các hình từ 3.7 - 3.11.
Hình 3.7. Phân bố hiệu giá kháng thể trong huyết thanh gà tại thời điểm sau tiêm 30 ngày
Hình 3.8. Phân bố hiệu giá kháng thể trong huyết thanh gà tại thời điểm sau tiêm 60 ngày
Hình 3.9. Phân bố hiệu giá kháng thể trong huyết thanh gà tại thời điểm sau tiêm 90 ngày
Thời điểm này hiệu giá kháng thể bắt đầu giảm hơn so với thời gian trước đó.
Hình 3.10. Phân bố hiệu giá kháng thể trong huyết thanh gà tại thời điểm sau tiêm 120 ngày
Hình 3.11. Phân bố hiệu giá kháng thể trong huyết thanh gà tại thời điểm sau tiêm 150 ngày