Phân tích đặc điểm hình thái
Tất cả các mẫu cá thể trai tai tượng thu được đều được sử dụng làm mẫu nghiên cứu. Trai tai tượng được rửa bằng nước sạch, đặt lên khay đá để ráo nước. Dùng thước có chia độ đo (cm và mm) để đo các kích thước của vỏ trai (Hình 2.2).
- Chiều dài vỏ được đo từ mép vỏ mặt sau đến mép vỏ mặt trước.
- Chiều cao vỏ đo từ mép vỏ phía mặt lưng đến đỉnh vỏ phía mặt bụng.
- Chiều rộng vỏ là khoảng rộng nhất giữa hai vỏ khi chúng khép chặt.
- Chiều dài bản lề đo từ đỉnh vỏ đến mép vỏ, nơi hai mảnh vỏ đóng mở.
- Chiều dài lỗ tơ chân đo từ đỉnh vỏ đến hết chiều dài lỗ tơ chân.
Hình 2.1. Sơ đồ nghiên cứu hình thái và đa dạng di truyền trai tai tƣợng
Phân tích đa dạng di truyền và cấu trúc quần thể
Giải trình tự gen
Khuếch đại gen 16S và CO1 mt DNA Tách chiết DNA
Nghiên cứu hình thái Mẫu trai tai tượng
Điện di - Đo kích thước, cân khối lượng
- Quan sát màu sắc, hoa văn màng áo
Bộ kit WIZARD SV Genomic DNA Purification (Promega)
Cặp mồi 16S, CO1- Tricro 90v 30 – 40 phút Máy ABI Prism 3700 DNA Analyser Phân tích MP/NJ/BI
Hình 2.2. Đo kích thƣớc của trai tai tƣợng
LV chiều dài vỏ,WV chiều rộng vỏ, HV chiều cao vỏ, LBL chiều dài bản lề, LLTC chiều dài lỗ tơ chân, WLTC chiều rộng lỗ tơ chân
Sau đó, dùng cân kỹ thuật để cân khối lượng từng mẫu. Chụp ảnh và quan sát hình dạng bên ngoài của vỏ trai tai tượng (Hình 2.3).
Hình 2.3. Hình dạng ngoài của trai tai tƣợng
(Nguồn: Fatherree, 2008)
Đồng thời, tiến hành quan sát màng áo của các cá thể trai tai tượng thu được để xác định màu sắc, hoa văn của màng áo (Hình 2.4 và 2.5)
LV LBL WV WLT C LLTC HV Nếp gấp Đỉnh vỏ Vẩy Đường bản lề Bản lề Mép vỏ Lỗ tơ chân
Hình 2.4. Quan sát màng áo của trai tai tƣợng từ mặt lƣng
(Theo Animal-World, 2009)
1 ống hút nước, 2 ống thoát nước, 3 màng áo
Hình 2.5. Quan sát mặt bên màng áo của trai tai tƣợng
1 màng áo, 2 mặt bên màng áo, 3 cơ co rút tơ chân, 4 cơ khép vỏ, 5 chân
Màu sắc và cấu tạo màng áo của trai tai tượng được mô tả sơ bộ trong Bảng 2.1. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
1 2 4 3 5 2 3 1
Bảng 2.1. So sánh giải phẫu học màng áo của các loài trai tai tƣợng
Loài Màu sắc/cấu tạo Xúc tu miệng
T. gigas
Màu nâu; có các vòng tròn màu xanh xung quanh những bộ phận trong suốt kéo dài đến mép màng áo
Không có
T. derasa Màng áo kéo dài ra, có màu sắc rực rỡ như xanh da trời, nâu, xanh lá
Độ dài trung bình, hẹp, phân nhánh
T. squamosa Có những chấm lốm đốm với nhiều màu xanh lá, xanh da trời, nâu, da cam và vàng
Ngắn, cùn, phân nhánh
T. maxima Thường có màu sáng, đa dạng Ngắn, cùn,
phân nhánh
T. crocea Thường có màu sáng: xanh lá, xanh da trời, tía, nâu và da cam
Ngắn, cùn, phân nhánh
T. tevoroa Nâu, xám, xanh lá, màng áo nhăn nheo với nhiều hột giống mụn cơm
Dài, rộng và không phân nhánh
H. hippopus Vàng – nâu, các màu tối, với các đường xanh lá
hoặc xám, mờ Không có
H. porcellanus Vàng – nâu, các màu tối, với các đường xanh lá
hoặc xám, mờ
Dài trung bình, rộng, phân nhánh
(Theo Norton và Jones, 1992)
Trai tai tượng được định danh dựa vào đặc điểm hình thái theo Rosewater (1965, 1982) [54, 55] và Lucas (1988) [44].
Dựa theo giải trình tự DNA
Các loài trai tai tượng cũng được định danh dựa trên việc giải trình tự DNA của gen 16S và CO1 mtDNA.