3.2. Kết quả khảo sát ảnh hưởng của dung môi tách chiết đến hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết từ Hoa Sứ trắng
3.2.6. Kết quả đánh giá hoạt tính kháng khuẩn của các loại cao chiết đối với nhóm
Tiến hành khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của các loại cao chiết Hoa Sứ trắng từ các dung môi và nồng độ khác nhau trên nhóm vi khuẩn gây bệnh cơ hội trên da gồm: P.aeruginosa, Staphylococcus aureus và E.feacalis. Kết quả thực nghiệm được trình bày ở Hình 3.12.
51
Dựa vào kết quả trên Hình 3.12 nhận thấy rằng các loại cao chiết từ EtOH đều có khả năng ức chế nhóm vi khuẩn gây bệnh cơ hội trên da và có đường kính vòng kháng khuẩn trung bình từ 9,8 mm đến 13,7 mm. Trong khi đó cao chiết nước lại không có khả năng ức chế đối với nhóm vi khuẩn này. Cao chiết EtOH 96% ức chế 3/3 chủng vi khuẩn thử nghiệm ở cả 3 nồng độ khảo sát. Nồng độ 200 mg/ml thể hiện hoạt tính kháng khuẩn tốt nhất ở chủng S.aureus có đường kính vòng ức chế 13,67 mm cao hơn so với kháng sinh ciprofloxacin (0,5 mg/ml) về phương diện thống kê (P < 0,01).
A B
Hình 3.12. Hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết từ Hoa Sứ trắng đối với nhóm vi khuẩn gây bệnh cơ hội trên da
Hình 3.13. Vòng ức chế S.aureus (A) và P.aeruginosa ở cao chiết EtOH 70% (B)
52
Đồng thời, cao chiết EtOH 96% (200 mg/ml) cũng thể hiện hoạt tính ức chế chủng P.aeruginosa với đường kính vòng ức chế 10,83 mm tương đương với kháng sinh ciprofloxacin (0,5 mg/ml). Nồng độ 100 mg/ml ức chế tốt nhất đối với chủng S.aureus và có đường kính vòng ức chế là 11,17 mm không có sự với kháng sinh ciprofloxacin (0,5 mg/ml) về mặt thống kê (P > 0,01). Nồng độ 50 mg/ml có đường kính vòng ức cao nhất là 9 mm ứng với chủng S.aureus. Điều này chứng tỏ, nồng độ cao chiết càng cao thì hoạt tính kháng khuẩn càng mạnh. Kế đến là cao chiết EtOH 70%, nồng độ 200 mg/ml có hoạt tính ức chế đối với cả 3 chủng là như nhau và cùng có đường kính vòng ức chế trung bình 12,50 mm. Ở nồng độ 100 mg/ml chỉ ức chế được 2 chủng S.aureus và E.feacalis, cả 2 đều có hoạt tính kháng khuẩn tương đương với đối chứng và có đường kính vòng ức chế lần lượt là 10,50 mm và 10,83 mm. Ở nồng độ 50 mg/ml, cao chiết EtOH 70% không có hoạt tính ức chế đối với vi khuẩn gây bệnh về da. Đối với cao chiết EtOH 50% chỉ thể hiện hoạt tính kháng khuẩn ở nồng độ 200 mg/ml ức chế được chủng E.feacalis với đường kính vòng ức chế trung bình là 11 mm. Tóm lại từ kết quả phân tích trên nhận thấy rằng cao chiết EtOH 70% có hoạt tính kháng khuẩn cao nhất nhưng lại có phổ kháng khuẩn hẹp hơn cao chiết EtOH 96% ở nồng độ 100 mg/ml và 50 mg/ml.
Từ kết quả nghiên cứu của Kalpana và ctv (2013) về hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết ethanol từ lá cây Moringa oleifera ở nồng độ 200 mg/ml đối với chủng vi khuẩn S.aureus cho thấy cao chiết Moringa oleifera ức chế chủng S.aureus với đường kính trung bình là 10,00 mm thấp hơn cao chiết EtOH 70% từ Hoa Sứ trắng ở cùng nồng độ 200 mg/ml là 12,50 mm. Điều này cho thấy hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết từ Hoa Sứ trắng mạnh hơn so với cao chiết từ lá Moringa oleifera. Và kết quả nghiên cứu của Nirosha (2013) từ cao chiết EtOH của lá Carica papaya L. thì cao chiết này kháng được chủng vi khuẩn P.aeruginosa với đường kính vòng kháng khuẩn trung bình là 12 mm thấp hơn hoạt tính của cao chiết EtOH từ Hoa Sứ trắng (200 mg/ml), trong khi đó cao chiết từ lá Carica papaya L. lại sử dụng nồng độ 250 mg/ml.
53
Theo kết quả của Kumar và ctv (2012) cho thấy kết quả của cao chiết nước từ Plumeria rubra acutifolia trên chủng S.aureus là âm tính và trong kết quả thử nghiệm của Hoa Sứ trắng, cao chiết nước không có khả năng ức chế được chủng S.aureus kết quả này tương với nghiên cứu của Naresh Kumar.
Tổng hợp kết quả hoạt tính kháng khuẩn của các loại cao chiết đối với 20 vi khuẩn gây bệnh gây bệnh
Từ kết quả hoạt tính kháng khuẩn có được từ các loại cao chiết khác nhau của Hoa Sứ trắng trên các nhóm vi sinh vật chỉ thị, ta có được kết quả đường kính vòng ức chế trên tổng số 20 chủng vi sinh vật khảo sát trình bày ở Bảng 3.1 và Bảng 3.2.
54
Bảng 3.1. Kết quả đường kính vòng ức chế (mm) của cao chiết Hoa Sứ trắng từ các loại dung môi khác nhau trên 10 chủng vi khuẩn gây bệnh.
Vi sinh vật Nồng độ
(mg/ml) Cao chiết nước Cao chiết ethanol 50%
Cao chiết ethanol 70%
Cao chiết ethanol
96% Ciprofloxacin(*) E.coli
200 NA NA 10,17b ± 0,76 11,17b ± 0,76 13,20a ± 0,29
100 NA NA NA 8,83b ± 0,29
50 NA NA NA 8,33b ± 0,58
ETEC
200 NA 10,50b ± 0,50 12,00b ± 1,00 11,33b ± 0,58 31,00a ± 0,50
100 NA 8,33b ± 0,58 9,67b ± 0,58 9,33b ± 1,04
50 NA NA NA NA
E.coli 0208
200 NA NA 11,00a ± 1,00 10,83a ± 0,76 12,30a ± 0,29
100 NA NA 9,33b±0,58 9,83b ± ,29
50 NA NA NA NA
E.coli O157:H7
200 NA NA 11,17b ± 0,76 10,50b ± 0,50 13,20a ± 0,29
100 NA NA NA 9,67b±0,58
50 NA NA NA 8,83b ± 0,76
L.innocua
200 NA NA 10,83ab ± 0,76 9,50b ± 0,50 12,00a ± 0,50
100 NA NA 8,67b ± 0,58 9,00b ± 0,00
50 NA NA NA NA
L.monocytogens
200 11,33ab ± 1,15 NA 13,00a ± 1,00 9,67b ± 0,58 12,20ab ± 0,29
100 9,17b ± 0,29 NA 9,67b ± 0,58 8,83b ± 0,76
50 NA NA NA NA
S.dublin
200 NA 12,33a ± 1,53 10,67a ± 0,29 11,00a ± 1,73 12,20a ± 0,76
100 NA 10,83ab ± 0,76 9,00b ± 1,00 9,33b ± 0,58
50 NA NA 8,67b ± 0,58 NA
S.enteritidis
200 11,00ab ± 1,00 9,5b ± 0,50 10,50ab ± 0,87 11,00ab ± 1,00 13,00a ± 0,50
100 8,67b ± 0,76 NA 9,00b ± 0,00 9,67b ± 0,58
50 NA NA NA NA
S.typhii
200 NA 10,17a ± 0,76 NA 11,33a ± 1,53 12,50a ± 0,50
100 NA NA NA 10,67b ± 0,58
50 NA NA NA NA
S.typhimurium
200 NA NA 11,83ab ± 1,04 9,67b ± 1,15 13,17a ± 0,29
100 NA NA 9,83b ± 0,76 8,50b ± 0,50
50 NA NA 8,17b ± 0,29 NA
NA: non activity
(*): Nồng độ ciprofloxacin là 0,5 mg/ml
55
Bảng 3.2. Kết quả đường kính vòng ức chế (mm) của cao chiết Hoa Sứ trắng từ các loại dung môi khác nhau trên 10 chủng vi khuẩn gây bệnh
Vi sinh vật Nồng độ
(mg/ml) Cao chiết nước Cao chiết ethanol 50%
Cao chiết ethanol 70%
Cao chiết ethanol
96% Ciprofloxacin(*) Shi.boydii
200 NA 11,00a ± 1,00 12,17a ± 0,76 11,00a ± 0,87 NA
100 NA NA 10,17a ± 0,76 9,50a±0,50
50 NA NA NA NA
Shi.flexneri
200 12,00a ± 1,00 NA 11,67a ± 1,53 10,83a ± 1,04 13,17a ± 0,29
100 NA NA 9,67b ± 0,58 10,17b ± 0,29
50 NA NA 8,83b ± 0,29 8,83b ± 0,76
Shi.sonnei
200 NA 10,67b ± 0,58 12,50b ± 1,50 10,17ab ± 0,29 33,00a ± 0,50
100 NA NA 9,50b±0,50 8,83b±0,76
50 NA NA 9,00b ± 0,50 NA
V.alginolyticus
200 NA NA 12,33b ± 0,58 10,00c ± 0,50 16,17a ± 0,29
100 NA NA 10,67b ± 0,58 9,00c ± 0,50
50 NA NA NA 8,17b ± 0,29
V.cholerae
200 NA NA 12,33a ± 0,29 10,33b ± 0,58 13.33a ± 0,58
100 NA NA 9,83b ± 0,76 9,50b ± 0,50
50 NA NA 9,17b ± 0,76 8,67b ± 0,76
V.harveyi
200 NA NA 11,67b ± 0,58 11,67b ± 0,58 18,00a ± 0,5
100 NA NA NA 9,50b ± 0,50
50 NA NA NA 8,67b ± 0,76
V.parahaemolyticus
200 NA 9,67c ± 0,58 12,33a ± 0,58 10,67bc ± 0,58 11,33ab ± 0,29
100 NA NA 11,17a ± 1,04 9,50a ± 0,50
50 NA NA 9,17b ± 0,76 8,33b ± 0,58
P.aeruginosa
200 NA NA 12,50a ± 0,76 10,83a ± 0,76 12,17a ± 0,58
100 NA NA NA 8,67b ± 0,76
50 NA NA NA 8,33b ± 0,29
S.aureus
200 NA NA 12,50ab ± 0,50 13,67a ± 0,58 12,17 ± 0,29
100 NA NA 10,50a ± 0,50 11,17a ± 0,76
50 NA NA NA 9,00b ± 0,00
E.feacalis
200 NA 11,00ab ± 1,00 12,50a ± 0,50 10,33b ± 0,58 12,00ab ± 0,50
100 NA NA 10,83a ± 0,29 8,83b ± 0,76
50 NA NA 8,17b ± 0,29 8,00b ± 0,00
NA: non activity
(*): Nồng độ ciprofloxacin đối với nhóm Vibrio spp. là 0,008 mg/ml và đối với các vi sinh vật còn lại là 0,5 mg/ml
56
tách chiết có ảnh hưởng rất lớn đến hoạt tính sinh học của cao chiết thu được. Trong các loại cao chiết từ Hoa Sứ trắng ở những nồng độ khác nhau thì có phổ kháng khuẩn khác nhau trên 20 chủng vi khuẩn gây bệnh. Trong các loại dung môi khảo sát thì dung môi EtOH 70% ở nồng độ 200 mg/ml thể hiện hoạt tính kháng khuẩn cao nhất kháng được 19/20 chủng vi khuẩn khảo sát với đường kính vòng kháng trung bình 8,17 mm đến 12,50 mm, đặc biệt là đối với các chủng thuộc nhóm Listeria spp., Vibrio spp., và nhóm vi khuẩn gây bệnh cơ hội trên da. Ở nồng độ 100 mg/ml cao chiết EtOH 70% ức chế được 15/20 chủng và nồng độ 50 mg/ml ức chế được thấp nhất là 7/20 chủng vi khuẩn thử nghiệm. Tuy nhiên cao chiết EtOH 70% lại có phổ kháng khuẩn hẹp hơn cao chiết EtOH 96%. Ở nồng độ 200 mg/ml và 100 mg/ml EtOH 96% ức chế được 20/20 chủng vi khuẩn thử nghiệm, riêng nồng độ 50 mg/ml thì EtOH 96% chỉ ức chế được 10/20 chủng vi khuẩn thử nghiệm. Bên cạnh đó, cao chiết từ dung môi nước và EtOH 50% thì có phổ kháng khuẩn hẹp và hoạt tính kháng khuẩn cũng thấp hơn, cụ thể là cao chiết EtOH 50% (200 mg/ml) kháng lại 8/20 chủng vi khuẩn và nồng độ 100 mg/ml chỉ ức chế được 2/20 chủng. Cao chiết nước (200 mg/ml) kháng lại 3/20 chủng và ở nồng độ 100 mg/ml ức chế 2/20 chủng vi khuẩn thử nghiệm . Từ kết quả đánh giá hoạt tính kháng khuẩn của các loại cao chiết từ Hoa Sứ trắng trên 20 chủng vi khuẩn khảo sát cho thấy đường kính vòng kháng khuẩn tăng dần từ nồng độ 50 mg/ml đến 200 mg/ml.
Điều này chứng tỏ nồng độ khảo sát càng cao thì hoạt tính kháng khuẩn của các loại cao chiết từ Hoa Sứ trắng càng mạnh. Và cũng từ những kết quả trên có thể kết luận rằng tách chiết mẫu Hoa Sứ trắng bằng dung môi ethanol sẽ thể hiện được hoạt tính kháng khuẩn tốt nhất. Đặc biệt cao chiết từ EtOH 70% thể hiện hoạt tính kháng khuẩn cao hơn so với các dung môi khác.
Theo kết quả nghiên cứu của Mishra và ctv (2008) đã tiến hành thử nghiệm khả năng kháng khuẩn của cao chiết ethanol từ cây Androgaphis paniculata trên các chủng vi sinh vật như E.coli (7,00 mm), S.typhimurium (6,80 mm), Shi.sonnei (7,00
57
kết quả nghiên cứu trên, so sánh với hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết EtOH 70% từ Hoa Sứ trắng ở nồng độ 200 mg/ml với các chủng vi khuẩn như E.coli (10,17 mm), S.typhimurium (11,83 mm), Shi.sonnei (12,50 mm), Shi.boydii (12,17 mm), V.alginolyticus (12,33 mm), và V.cholerae (12,33 mm) cho thấy cao chiết EtOH 70%
từ Hoa Sứ trắng có hoạt tính kháng khuẩn cao hơn cao chiết ethanol từ cây Androgaphis paniculata, riêng chủng V.cholera là có đường kính thấp hơn cao chiết ethanol từ cây Androgaphis paniculata.
Từ kết quả nghiên cứu của Vinoth và ctv (2012), khi khảo sát khả năng kháng khuẩn của cao chiết ethanol từ lá Moringa oleifera trên các chủng vi khuẩn E.coli, P.aeruginosa, S.aureus, S.typhii có đường kính vòng kháng khuẩn lần lượt là 8 mm, 9 mm, 11 mm và 13 mm cho thấy thấp hơn hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết ethanol từ Hoa Sứ trắng tuy khảo sát cùng nồng độ là 200 mg/ml. Cũng trong nghiên cứu này, Vinoth cũng khảo sát trên cao chiết nước từ lá Moringa oleifera cho thấy rằng cao chiết không có khả năng ức chế 4 chủng vi khuẩn thử nghiệm tương và cao chiết nước từ Hoa Sứ trắng cũng không có hoạt tính ức chế 4 chủng vi khuẩn nói trên.
Khi so sánh với kết quả của Đinh Vũ Nghị (2017) khi khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của Hoa Sứ vàng thì nhận thấy rằng các loại cao chiết từ Hoa Sứ trắng có hoạt tính kháng khuẩn mạnh hơn so với các loại cao chiết từ Hoa Sứ vàng.