Sau khi tiến hành khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của cao chiết Hoa Sứ Trắng từ 4 loại dung môi khảo sát cho thấy cao chiết EtOH 70% có khả năng ức chế các loại vi khuẩn tốt hơn các loại cao chiết khác. Dựa vào cơ sở trên, tiến hành định tính một số thành phần hóa học có khả năng kháng khuẩn trong mẫu cao chiết Hoa Sứ trắng 70%.
Kết quả được trình bày ở Bảng 3.3.
58
Sứ trắng
Nhóm hợp chất Thử nghiệm Kết quả
Carbohydrate
Molisch Fehling Barfoed
+ + +
Alkaloid
Mayer Dragendorff
Hager Wagner
+ + + +
Saponin Foam +
Cardiac glycoside Legal
Keller Killiani
+ + Flavonoid Alkaline reagent
Ferric chloride
+ + Phenolic compound Lead acetate
Gelatin
+ +
Tannin Ferric chloride
Lead acetate
+ +
Steroid Salkowski
Libermann Burchard
+ +
Amino acid Ninhydrin -
Chú thích: (+) : dương tính; (-) âm tính
Từ bảng kết quả định tính thành phần hóa học của Hoa Sứ trắng được chiết tách từ ethanol 70% cho thấy rằng dung môi ethanol 70% có khả năng tách chiết được
59
glycosid, tannin, hợp chất phenol, tuy nhiên ethanol 70% lại không chiết xuất được amino aicd.
Trong thử nghiệm alkaloid cho kết quả dương tính, điều đó chứng tỏ trong Hoa Sứ trắng có chứa các hợp chất thuộc nhóm alkaloid như: coumarin, polyphenol, purin, amino acid, protein, acid triterpen… (Nguyễn Kim Phi Phụng, 2007). Đối với thử nghiệm phenolic cho phản ứng dương tính, tương ứng với kết quả nghiên cứu của David Wang và ctv, 2007 công bố tìm được các hợp chất acid caffeic, acid 3,5- dicaffeoylquinic, 1,4 - acid dicaffeoylquinic và 3,4 dihydroxy - cinnamic acid methyl ester đều thuộc nhóm phenolic. Trong 3 thử nghiệm hợp chất thuộc nhóm flavonoid có 2 thử nghiệm có kết quả dương tính có thể được giải thích như sau: flavonoid có nhiều nhóm hợp chất trong đó mỗi phản ứng định tính giúp nhận biết một nhóm chất riêng trong trường hợp này phản ứng của ferric clorid giúp nhận biết chalcon trong nhóm chất flavonoid (Đặng Thị Luyến và ctv, 2008), phản ứng alkaline giúp phân biệt nhóm flavon và flavonol (Manpreet Kaur, 2015) và phản ứng shinoda giúp phân biệt anthocyanidins trong nhóm chất flavonoid (Greg, 2014). Ngoài ra còn có hợp chất tannin có dẫn chất ellagitannin, ở hợp chất terpennoid, tinh dầu thì có dẫn chất là capsaicin. Tất cả các dẫn chất trên đều có chức năng phá vỡ màng tế bào, liên kết bám dính, tạo phức hợp với thành tế bào, khử hoạt tính enzyme và bám dính protein, các chức năng trên giúp tiêu diệt vi sinh vật. Từ những kết quả định tính trên có thể kết luận rằng cao chiết Hoa Sứ trắng từ ethanol 70% có khả năng ức chế vi khuẩn gây bệnh do có sự hiện diện của các hợp chất alkaloid, flavonoid, phenol, tannin, triterpenoid.
Theo nghiên cứu của Ramproshad và ctv (2012), khảo sát thành phần hóa học và dược chất có trong Plumeria rubra đã xác định trong Plumeria rubra chứa các hợp chất như alkaloid, steroid, flavonoid tương ứng với kết quả trong thử nghiệm định tính thành phần hóa học của Hoa Sứ trắng. Nhưng nghiên cứu Ramproshad lại không thấy
60
Hoa Sứ trắng cho thấy có sự hiện diện của saponin.
Theo một nghiên cứu khác của Subur Khan (2010) cho thấy kết quả có sự hiện diện của steroid, tannin, glycoside và flavonoid trong chiết từ ethanol của hoa Plumeria rubra, điều này tương đương với kết quả trong thử nghiệm từ Hoa Sứ trắng.
Từ những kết quả trên khẳng định rằng cao chiết Hoa Sứ trắng từ dung môi ethanol 70% có sự hiện diện của rất nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học: alkaloid, phenol, alkaloid, tannin, flavonoid, saponin, triterpenoid, glycoside, carbohydrate, sự hiện diện của những hợp chất này tạo nên hoạt tính kháng khuẩn cho Hoa Sứ trắng, đặc biệt là flavonoid. Các flavonoid có hoạt tính kháng khuẩn do chúng có khả năng tạo phức với các protein ngoại bào và thành tế bào vi khuẩn. Flavonoid càng ưa béo thì càng có khả năng phá vỡ màng tế bào vi sinh vật (Quỳnh Ngọc, 2011
Tóm lại, từ những kết quả trên cho thấy rằng Hoa Sứ trắng là một loại thảo dược có hoạt tính sinh học tương đối cao. Mặc dù dung môi nước cho hàm lượng thu hồi cao cao nhất trong 4 loại dung môi khảo sát nhưng khi khảo sát khả năng kháng khuẩn thì cao chiết EtOH 70% cho hoạt tính sinh học mạnh nhất, ức chế được các chủng vi khuẩn thử nghiệm với đường kính vòng ức chế tương đối cao. Bên cạnh đó, trong cao chiết ethanol 70% cũng hiện diện nhiều hợp chất có hoạt tính sinh học như carbohydrate, alkaloid, flavonoid, saponin, steroid, cardiac glycosid, tannin, hợp chất phenol; những hợp chất này tạo nên hoạt tính kháng khuẩn cho Hoa Sứ trắng.
61
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 1. Kết luận
Qua quá trình thực hiện tách chiết mẫu Hoa Sứ trắng bằng các loại dung môi khác nhau nhận thấy rằng dung môi nước cho hàm lượng thu hồi cao cao nhất trong 4 loại dung môi khảo sát với hàm lượng trung bình là 36,27%.
Kết quả khảo sát hoạt tính kháng khuẩn của 4 loại cao chiết từ Hoa Sứ trắng trên 20 chủng vi sinh vật thử nghiệm cho thấy cao chiết ethanol 96% từ Hoa Sứ trắng có phổ kháng khuẩn rộng và cao chiết ethanol 70% có hoạt tính kháng khuẩn tương đối mạnh, đặc biệt là đối với chủng Shi.sonnei, S.aureus và E.feacalis.
Cao chiết ethanol 70% từ Hoa Sứ trắng có phản ứng dương tính với carbohydrate, alkaloid, saponin, cardiac glycoside, flavonoid, phenolic, tannin, steroid, trong đó có những hợp chất kháng khuẩn , điều đó bổ sung cho kết quả đánh giá hoạt tính kháng khuẩn và phù hợp với các nghiên cứu đã từng công bố trước đây.
2. Kiến nghị
Tiến hành thí nghiệm hoạt tính của cao thuốc trên mô hình động vật để làm cơ sở ứng dụng điều chế thuốc trị bệnh cho người.
Tiến hành đánh giá khả năng kháng khuẩn của cao chiết từ Hoa Sứ trắng trên nhiều vi sinh vật gây bệnh khác.
Tiến hành đánh giá khả năng kháng nấm của cao chiết từ Hoa Sứ trắng.
Tiến hành khảo sát khả năng kháng oxy hóa của cao chiết từ Hoa Sứ trắng.
62
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tài liệu tiếng việt
Đỗ Tất Lợi (2001)- “Những cây thuốc và vị thuốc Việt Nam”, NXB Khoa học Kỹ thuật.
GV Bùi Thi Hải Hòa và sinh viên thực hiện (2012), Chuyên Đề: Độc Tố E.coli, Viện Đại học Mở Hà Nội.
Hoàng Sầm và Hứa Văn Thao (2012). Hoạt tính sinh học của saponin với ung thư, TruongSinhThang. 17/08/2012, xem 17-06-2015, link:<http://truongsinhthang.vn/- ChiTietTinTuc.aspx?ArticleID=21>.
Ngô Văn Thu (1998), Bài giảng dược liệu, tập I, Trường đại học Dược Hà Nội Ngô Văn Thu (2011), Bài giảng dược liệu, tập I, Trường đại học Dược Hà Nội Nguyễn Kim Phi Phụng, 2007, Phương pháp cô lập các hợp chất hữu cơ, NXB ĐHQG TPHCM
Nguyễn Lân Dũng và Dương Văn Hợp (2007). Thực tập vi sinh vật học, Nhà xuất bản Khoa Học Kỹ Thuật, Hà Nội.
Nguyễn Phương Hà Linh Linh (2011). Cấu tạo, tính chất và vai trò của carbohydrate.
Nguyễn Tấn Thịnh (2013), Tìm hiểu thành phần hợp chất thứ cấp trong cây lược vàng, Trường đại học công nghệ TP.HCM.
Nguyễn Thị Hiền và ctv (2010). Chất kháng khuẩn thực vật. Tiểu luận môn công nghệ chế biến rau trái, Kỹ thuật hóa học. Đại học bách khoa TP.HCM.
PGS. TS. Nguyễn Thanh Bảo, 2007, Vi khuẩn học, Trường Đại học Y Dược Tp. HCM.
Phạm Minh Nhựt(2013). Thực hành vi sinh đại cương. Trường Đại học Công Nghệ Tp. HCM.
Phùng Trung Hùng và cộng tác viên (2013), Đại cương carbohydrate.
63
thông tin KH&CN TP.HCM.
Võ Văn Chi, 2012, Từ điển cây thuốc Việt Nam (Bộ mới), tập I, NXB Y học, Hà Nội
Vũ Thị Việt Hoa, Tô Minh Châu, Vũ Thị Lân Ân, Lâm Thanh Hiền, Nguyễn Thị Ngọc Diệp, Nguyễn Thúy Hương (2000) , Vi sinh học đại cương, Trường Đại học Nông Lâm Tp.HCM.
Vũ Xuân Tạo (2011), Nghiên cứu alkaloid & quy trình tách chiết một số chất có bản chất là alkaloid, Luận văn tốt nghiệp, Trường Đại học Khoa Học Tự Nhiên TP.HCM.
Tài liệu nước ngoài
Ahlem Rebaya, Souad Igueld Belghith, Safa Hammrouni, Abderrazak Maaroufi, Malika Trabelsi Ayadi, Jamila Kalthoum Chérif (2016) Antibacterial and Antifungal Activities of Ethanol Extracts of Halimium halimifolium, Cistus salviifolius and Cistus monspeliensis. International Journal of Pharmaceutical and Clinical Research; 8(4): 243-247.
Babuselvam M., Farook K.A.M., Abideen S., Mohamed M.P. and Uthiraselvam M. (2012). Screening of antibacterial activity of mangrove plant extracts against fish and shrimp pathogens, International Journal of Applied Microbiology Science, 1 (3), 20-25.
Burt, S., 2004 Essential oils: their antibacterial properties and potential applications in foods – a review. Int. J. Food Microbiol. 94, 223 – 253.
Gislene G. F. Nascimento, 2000. Antibacterial activity of plant extracts and phytochemicals on antibiotic-resistant bacteria. Brazilian Journal of Microbiology.
H. Qiao, T.J. Sun (2014). Antibacterial activity of ethanol extract and fractions obtained from Taraxacum mongolicum flower, Research Journal of Pharmacognosy (RJP) 1: 35-39.
64
M.,Razafitsalama J., Andriantsiferana R., Rasamison V. E., Kingston D. G. I. (2007), Cytotoxic cardenolide glycosides of Roupellina (Strophanthus) boivinii, The Madagascar rainforest, J Nat Prod, pp:70:1766 – 1770.
Khalil 2012, Antimicrobial Activity of Ethanol Leaf Extracts of Catharanthus Roseus From Saudi Arabia. International Conference on Environment Science and Biotechnology.
Khan et al, 2010, comparative phytochemical screening of flowers of Plumeria alba and Plumeria rubra. Asian Journal of Pharmaceutical and Clinical Research.
ISSN - 0974-2441.
Kumar et al 2012, Antimicrobial potential of Plumeria rubra Syn Plumeria acutifolia bark, Der Pharma Chemica, 4(4):1591-1593.
Maneemegalai et al 2010, Evaluation of Antibacterial Activity of Flower Extracts of Cassia auriculata L.. Ethnobotanical Leaflets 14: 182- 92.
Mir et al 2016, Estimation of alkaloid, saponin and flavonoid, content in various extracts of Crocus sativa. Journal of Medicinal Plants Studies 2016; 4(5): 171- 174
Muruganatham et al 2015, Antimicrobial activity of Ethanolic extracts of Plumeria rubra flowers. American journal of pharmtech reseach.
Oladipupo A. Lawal, Isiaka A. Ogunwande and Andy R. Opoku, 2014, Chemical Composition of Essential Oils of Plumeria rubra L. Grown in Nigeria, European Journal of Medicinal Plants 6(1): 55-61.
O. O. Igbinosa et al, 2009. Antimicrobial activity and phytochemical screening of stem bark extracts from Jatropha curcas (Linn). African Journal of Pharmacy and Pharmacology Vol. 3(2). pp. 058-062.
65
activities of leaves of medicinal plant Plumeria rubra. International journal of research in pharmacy and chemistry. ISSN: 22312781.
Rozman T., Jersek B. (2009), Antimicrobial activity of rosemary extracts (Rosmarimus officinalis L.) against diferent species of Listeria, Acta agriculturae Slovenica.
S.Kalpana, S.Moorthi and Sushila kumari 2013, Antimicrobial activity of different extracts of leaf of Moringa oleifera (Lam) against gram positive and gram negative bacteria. International Journal of Current Microbiology and Applied Sciences.
ISSN: 2319 – 7006.
Vinoth et al, 2012, Phytochemical analysis and antibacterial activity of Moringa oleifera lam. International journal of research in Biological Sciences. ISSN
2249 – 9687.
1