3. í nghĩa khoa học và thực tiễn của đề tài
2.3.4. Phƣơng phỏp nghiờn cứu đốt và trứng sỏn dõy ở ngoại cảnh
2.3.4.1. Phương phỏp xột nghiệm đốt và trứng sỏn dõy ở mẫu chất độn nền chuồng và khu vực chăn thả
Mẫu lấy về đƣợc xột nghiệm ngay trong ngày, những mẫu chƣa xột nghiệm ngay đƣợc bảo quản ở nhiệt độ 2-40
C, khụng quỏ 3 ngày. Xột nghiệm đốt sỏn dõy bằng phƣơng phỏp gạn rửa sa lắng và xột nghiệm trứng sỏn dõy bằng phƣơng phỏp Fullerborn.
2.3.4.2. Phương phỏp xỏc định thời gian phõn huỷ đốt và sức đề khỏng của trứng sỏn dõy trong phõn, trong đất, trong nước
* Phương phỏp thu nhận đốt sỏn từ phõn gà mới thải:
Dựng phƣơng phỏp gạn rửa sa lắng để phõn lập và thu nhận một số lƣợng lớn đốt sỏn từ phõn gà mới thải. Sử dụng những đốt sỏn này để bố trớ cỏc thớ nghiệm.
* Thớ nghiệm 1: Theo dừi thời gian phõn huỷ đốt, giải phúng trứng sỏn và thời gian sống của trứng trong phõn (trường hợp đốt và trứng sỏn lưu cữu trong phõn, chưa gặp ký chủ trung gian)
- Lụ 1: gồm 5 mẫu, mỗi mẫu là hỗn hợp phõn của 30 gà nhiễm sỏn dõy nặng (cú 30 - 50 đốt/lần thải phõn). Mỗi mẫu đƣợc đặt vào một đĩa petri, để mẫu ở điều kiện nhiệt độ và ẩm độ khụng khớ bỡnh thƣờng.
- Lụ 2: Bố trớ nhƣ lụ 1, chỉ khỏc là cỏc mẫu phõn luụn đƣợc duy trỡ trong trạng thỏi ẩm ƣớt.
+ Mỗi ngày lấy 2 gam phõn từ mỗi mẫu, xột nghiệm bằng phƣơng phỏp lắng cặn tỡm đốt sỏn để xỏc định thời gian phõn huỷ đốt sỏn.
+ Sau khi đốt sỏn đó phõn huỷ hết, cứ 3 ngày lấy 2-3 gam phõn từ mỗi mẫu, xột nghiệm trứng sỏn dõy bằng phƣơng phỏp Fullerborn để xỏc định thời gian sống của trứng.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Hỡnh 2.1: Ảnh xột nghiệm trứng sỏn dõy bằng phương phỏp Fullerborn
Hỡnh 2.2. Ảnh thớ nghiệm theo dừi thời gian phõn huỷ của đốt sỏn và thời gian sống của trứng trong phõn
* Thớ nghiệm 2: Theo dừi thời gian phõn huỷ đốt, giải phúng trứng sỏn và thời gian sống của trứng trong lớp đất bề mặt (trƣờng hợp đốt và trứng sỏn dõy phỏt tỏn ra đất, chƣa gặp ký chủ trung gian)
Cho đất ở mỗi độ ẩm (<10%; 10 - 20%; 20 - 30%; 30 - 40%) vào 8 khay (kớch thƣớc 30 x 20 x 10 cm) thành một lớp dày khoảng 1,5 - 2 cm (mỗi độ ẩm đƣợc bố trớ trong 2 khay (khay 1 và khay 2). Khay 1 dựng để xỏc định
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
thời gian phõn huỷ đốt, khay 2 để xỏc định thời gian sống của trứng sỏn dõy trong đất). Dựng cỏc thanh gỗ mỏng ngăn thành 32 ụ nhỏ. Mỗi ụ đặt 5 đốt sỏn dõy vào giữa lớp đất. Duy trỡ độ ẩm đất theo từng lụ thớ nghiệm:
Lụ I: Đất cú ẩm độ < 10% Lụ II: Đất cú ẩm độ 10% - 20% Lụ III: Đất cú ẩm độ 20% - 30% Lụ IV: Đất cú ẩm độ 30% - 40%
Mỗi ngày lấy đất cú đốt sỏn ở một ụ trong khay 1 để xỏc định thời gian phõn huỷ đốt sỏn trong đất bằng phƣơng phỏp lắng cặn.
Sau khi toàn bộ số đốt sỏn ở khay 1 đó phõn huỷ hết, cứ 3 ngày lấy đất cú trứng sỏn dõy ở một ụ trong khay 2 để xỏc định thời gian tồn tại của trứng sỏn dõy trong đất bằng phƣơng phỏp Fullerborn.
Thớ nghiệm đƣợc bố trớ trong cỏc mựa: Xuõn, Hố, Thu, Đụng.
Phương phỏp xỏc định và duy trỡ độ ẩm đất: Xỏc định độ ẩm của đất trƣớc khi thớ nghiệm theo tài liệu của Lờ Văn Khoa và cs, 1996 [4]. Độ ẩm của đất đƣợc xỏc định bằng cỏch: lấy 100 gam đất, sấy ở 1050C cho đến khi khối lƣợng giữa cỏc lần cần khụng đổi thỡ dừng lại và tớnh ẩm độ theo cụng thức:
Wt (%) = (a/b) x 100
Trong đú: a: Lƣợng nƣớc mất sau khi sấy b: Khối lƣợng đất trƣớc khi sấy Wt: Độ ẩm của đất (%).
Hàng ngày kiểm tra độ ẩm đất ở cỏc khay bằng phƣơng phỏp cảm quan. Duy trỡ độ ẩm nhƣ vậy trong suốt thời gian thớ nghiệm (dựng bỡnh phun sƣơng bổ sung nƣớc để duy trỡ độ ẩm cần thiết).
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Hỡnh 2.3: Ảnh lụ thớ nghiệm theo dừi thời gian phõn huỷ của đốt và thời gian sống của trứng ở lớp đất bề mặt
* Thớ nghiệm 3: Theo dừi thời gian phõn huỷ đốt, giải phúng trứng sỏn và thời gian sống của trứng trong nước (trường hợp đốt và trứng sỏn dõy rơi vào nước ở khu vực chăn thả gà, chưa gặp ký chủ trung gian)
Bố trớ thớ nghiệm gồm 10 đĩa petri chứa cỏc mẫu nƣớc thu thập từ cỏc khu vƣờn chăn thả gà. Mỗi đĩa petri chứa một lớp nƣớc cao khoảng 1cm. Cho vào mỗi đĩa petri 30 đốt sỏn.
- Hàng ngày quan sỏt bằng kớnh lỳp để xỏc định thời gian phõn huỷ đốt. - Sau khi đốt đó phõn huỷ hết, cứ 3 ngày kiểm tra 1 lần bằng cỏch: dựng đũa thuỷ tinh khuấy đều nƣớc trong đĩa petri, dựng cụng tơ hỳt hỳt khoảng 1 ml nƣớc ở mỗi đĩa petri, xột nghiệm tỡm trứng sỏn dõy trong nƣớc bằng phƣơng phỏp Darling.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Hỡnh 2.4: Ảnh thớ nghiệm xỏc định thời gian tồn tại của đốt, trứng sỏn dõy trong nước
2.4. PHƢƠNG PHÁP XỬ Lí SỐ LIỆU
Số liệu thu đƣợc đƣợc xử lý bằng phƣơng phỏp thống kờ sinh học (Nguyễn Văn Thiện (2000) [21]), trờn phần mềm Excel 2003.
- Số trung bỡnh cộng: n m P Trong đú: P: Số trung bỡnh cộng
m: số mẫu gà cú đặc điểm nghiờn cứu. n: tổng số mẫu.
- Sai số của số trung bỡnh: mp = mq = n q p. = n p p(1 )
Trong đú: mp và mq: sai số của p và q.
p và q: tỷ lệ % cỏc thành viờn cú và khụng cú đặc điểm nghiờn cứu . n: dung lƣợng mẫu.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Cụ thể hoỏ bằng một số cụng thức tớnh tỷ lệ và cƣờng độ nhiễm sỏn dõy gà nhƣ sau:
Tỷ lệ nhiễm (%) = Số mẫu nhiễm sỏn dõy gà x 100 Số mẫu kiểm tra
Cƣờng độ nhiễm (%) = Số mẫu nhiễm ở mỗi cƣờng độ x 100 Số mẫu nhiễm
Tỷ lệ nhiễm theo tuổi (%)= Số mẫu nhiễm sỏn dõy ở mỗi lứa tuổi x 100 Số mẫu kiểm tra ở tuổi đú
Tỷ lệ nhiễm theo giống gà (%) = Số mẫu nhiễm sỏn dõy ở mỗi giống x 100 Số mẫu kiểm tra ở giống đú
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
CHƢƠNG 3
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. TèNH HèNH NHIỄM SÁN DÂY Ở GÀ THẢ VƢỜN CỦA TỈNH THÁI NGUYấN THÁI NGUYấN
3.1.1. Cỏc loài sỏn dõy ký sinh ở gà thả vƣờn của một số huyện thuộc tỉnh Thỏi Nguyờn Thỏi Nguyờn
Theo Nguyễn Thị Kỳ (1994) [7], Nguyễn Thị Lờ (1996) [11], cú 12 loài sỏn dõy ký sinh ở gà đó đƣợc tỡm thấy ở Việt Nam : Cotugina digonopora, Davainea proglottina, R. echinobothrida, R. georgiensis, R. penetrans, R. prnetrans nova, R. peradenica, R. tetragona, R. volzi, R. macassariensis, R. tinguiana, R. cesticillus.
Bằng phƣơng phỏp mổ khỏm, thu thập và định loài sỏn dõy ở Viện sinh thỏi và Tài nguyờn sinh vật, chỳng tụi đó xỏc định đƣợc 5 loài sỏn dõy ký sinh ở gà của 3 huyện thuộc tỉnh Thỏi Nguyờn nhƣ sau :
- Huyện Phỳ Bỡnh : Phỏt hiện đƣợc 4 loài sỏn dõy gồm: R. cesticillus, R. volzi, R. tetragona, R. echinobothrida.
- Huyện Đồng Hỷ : Phỏt hiện đƣợc 4 loài sỏn dõy gồm: R. volzi, R. tetragona, R. echinobothrida, Cotugina digonopora.
- Huyện Định Húa : Phỏt hiện đƣợc 3 loài sỏn dõy gồm: R. cesticillus, R. tetragona, R. echinobothrida.
Qua bảng 3.1 cho thấy:
- Gà nuụi ở 3 huyện của tỉnh Thỏi Nguyờn nhiễm 5 loài sỏn dõy, đú là:
R. cesticillus, R. volzi, R. tetragona R. echinobothrida, Cotugnia digonopora. Trong đú, loài Cotugnia digonopora thuộc giống Cotugnia, họ Davaineidae,
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
thuộc phõn giống Raillietina, họ Davaineidae của lớp Cestoda. Đõy là 5 loài sỏn dõy phổ biến và gõy tỏc hại lớn cho gà của nhiều nƣớc trờn thế giới, trong đú cú Việt Nam.
Bảng 3.1: Những loài sỏn dõy ký sinh ở gà thả vƣờn của 3 huyện thuộc tỉnh Thỏi Nguyờn
Thành phần loài sỏn dõy Vị trớ ký sinh Phõn bố (huyện) Tần suất xuất hiện (%) Phỳ Bỡnh Đồng Hỷ Định Hoỏ R. cesticillus (Molin, 1858) Ruột non, ruột già + - + 66,67 R. volzi (Fuhrmann, 1905) Ruột non, ruột già + + - 66,67 R. tetragona (Dolin, 1858) Ruột non, ruột già + + + 100 R. echinobothrida (Megnin, 1881) Ruột non, ruột già + + + 100 Cotugnia digonopora (Pasquale, 1890) Ruột non - + - 33,33 Tổng loài phỏt hiện - 4 4 3 -
* Ghi chỳ: (+): Cú phỏt hiện thấy (-): Khụng phỏt hiện thấy
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Hỡnh 3.1: Ảnh đốt và đầu sỏn dõy R. echinobothrida
(tiờu bản nhuộm Carmin, x 400)
Hỡnh 3.2: Ảnh đốt và đầu sỏn dõy R. tetragona
(tiờu bản nhuộm Carmin, x 400)
Hỡnh 3.3: Ảnh đốt và đầu sỏn dõy R. cesticillus
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Hỡnh 3.4: Ảnh đốt và đầu sỏn dõy R. volzi
(tiờu bản nhuộm Carmin, x 400)
Hỡnh 3.5: Ảnh đốt và đầu sỏn dõy Cotugnia digonopora
(tiờu bản nhuộm Carmin, x 400)
- 5 loài sỏn dõy trờn ký sinh ở ruột non và ruột già đƣờng tiờu húa, ký sinh nhiều ở 2 vị trớ là hồi tràng (thuộc ruột non) và đoạn đầu manh tràng (thuộc ruột già).
Ruột non là cơ quan hấp thu chớnh của ống tiờu húa, đặc điểm cấu tạo của ruột non thuận lợi cho sự hấp thu cỏc chất dinh dƣỡng. Tại đõy, tất cả cỏc chất dinh dƣỡng đều đƣợc hấp thu ở ruột non nhƣ đƣờng đơn, amino axit đƣợc hấp thu vào mỏu, cỏc axit bộo đƣợc hấp thu vào mạch bạch huyết... (Hoàng Toàn Thắng và cs (2006) [17], ). Nhờ ký sinh tại ruột non mà sỏn dõy
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
cú điều kiện sinh trƣởng, phỏt triển. Phần dƣỡng chấp khụng đƣợc hấp thu sẽ đƣợc chuyển xuống manh tràng qua van hồi manh tràng, vỡ vậy chỳng tụi cho rằng van hồi manh tràng cũng là vị trớ sỏn dõy ký sinh nhiều.
Nhƣ vậy, thành phần loài sỏn dõy ký sinh ở gà thả vƣờn của 3 huyện trờn cũng nằm trong cỏc loài mà một số tỏc giả đó thấy ở Việt Nam. Tuy nhiờn, sự phõn bố của cỏc loài sỏn dõy và ký chủ trung gian của chỳng phụ thuộc vào nhiều yếu tố. Trong đú, cỏc yếu tố tự nhiờn (địa hỡnh, khớ hậu...) cú liờn quan đến sự phõn bố của sỏn dõy.
3.1.2. Tỷ lệ và cƣờng độ nhiễm sỏn dõy ở gà thả vƣờn của cỏc huyện
Kết quả xỏc định tỷ lệ và cƣờng độ nhiễm sỏn dõy gà của 3 huyện đƣợc trỡnh bày ở bảng 3.2 và 3.3.
3.1.2.1. Tỷ lệ và cường độ nhiễm sỏn dõy ở gà thả vườn của cỏc huyện qua xột nghiệm phõn
Thu thập 2.357 mẫu phõn gà tại 3 huyện Định Hoỏ, Đồng Hỷ, Phỳ Bỡnh của tỉnh Thỏi Nguyờn, bằng phƣơng phỏp gạn rửa sa lắng, chỳng tụi đó phỏt hiện đƣợc những gà nhiễm sỏn dõy. Kết quả về tỷ lệ và cƣờng độ nhiễm sỏn dõy đƣợc thể hiện qua bảng 3.2
Kết quả bảng 3.2, cho thấy: - Về tỷ lệ nhiễm:
Trong tổng số 2.357 gà kiểm tra cú 1.215 gà bị nhiễm sỏn dõy, tỷ lệ nhiễm chung là 51,55%, biến động từ 44,87% - 62,43%. Tỷ lệ này khỏc nhau giữa cỏc huyện. Sự khỏc nhau này phụ thuộc vào nhiều yếu tố nhƣ địa hỡnh, thời tiết khớ hậu, điều kiện chăn nuụi, tỡnh trạng vệ sinh thỳ y, mức độ ỏp dụng cỏc tiến bộ khoa học kỹ thuật… Do địa hỡnh phức tạp, một số địa phƣơng ở vựng sõu, vựng xa phần lớn chăn nuụi gà theo phƣơng thức tận dụng, điều kiện vệ sinh thỳ y kộm, đồng thời cỏc loại ký chủ trung gian phỏt triển nhiều, nờn tỷ lệ gà nhiễm sỏn dõy cao. Ngƣợc lại cỏc địa phƣơng cú điều
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn 62,43 44,87 49,11 0 10 20 30 40 50 60 70 Tỷ lệ % Định Hoá Đồng Hỷ Phú Bình Huyện
kiện chăn nuụi tốt, đảm bảo vệ sinh thỳ y, đồng thời hạn chế đƣợc sự phỏt triển ký chủ trung gian thỡ tỷ lệ nhiễm thấp hơn.
Bảng 3.2. Tỷ lệ và cƣờng độ nhiễm sỏn dõy ở gà thả vƣờn của cỏc huyện
(Qua xột nghiệm phõn) Địa phƣơng (huyện) Số mẫu kiểm tra Số mẫu nhiễm Tỷ lệ nhiễm (%) Cƣờng độ nhiễm Nhẹ Trung bỡnh Nặng n % n % n % Định Hoỏ 692 432 62,43 269 62,27 86 19,91 77 17,82 Đồng Hỷ 818 367 44,87 236 64,31 91 24,80 40 10,90 Phỳ Bỡnh 847 416 49,11 263 63,22 115 27,64 38 9,13 Tớnh chung 2.357 1.215 51,55 768 63,21 292 24,03 155 12,76
Tỷ lệ nhiễm sỏn dõy ở cỏc huyện đƣợc minh họa rừ hơn qua hỡnh 3.6.
Hỡnh 3.6: Biểu đồ về tỷ lệ nhiễm sỏn dõy ở gà tại 3 huyện của tỉnh Thỏi Nguyờn
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Hỡnh 3.6 cho thấy, tỷ lệ nhiễm sỏn dõy cao nhất ở gà nuụi tại huyện Định Hoỏ (62,43%), sau đú là gà nuụi tại huyện Phỳ Bỡnh (49,11%), cuối cựng là huyện Đồng Hỷ (44,87%).
Nhỡn chung, tỷ lệ nhiễm sỏn dõy ở 3 huyện trờn đều tƣơng đối cao. Đặc biệt, Định Hoỏ là một huyện cú nhiều đồi nỳi xen kẽ những cỏnh đồng trũng, mụi trƣờng chăn nuụi khụng đảm bảo vệ sinh. Đõy là mụi trƣờng thuận lợi để cỏc loài cụn trựng (kiến, ruồi nhà, ốc sờn…) là ký chủ trung gian của sỏn dõy gà tồn tại, phỏt triển. Vỡ vậy, gà thả vƣờn dễ ăn phải số lƣợng lớn cỏc ký chủ trung gian (kiến, ốc sờn…) chứa ấu trựng cú sức gõy bệnh, và bị nhiễm sỏn dõy.
Hỡnh 3.7: Ảnh sỏn dõy trong phõn gà
Qua khảo sỏt chỳng tụi thấy, nhiều hộ chăn nuụi khụng chỳ ý đến vấn đề vệ sinh thỳ y trong chăn nuụi, hầu hết cỏc đàn gà đều khụng đƣợc định kỳ tẩy giun sỏn, dẫn đến gà cũi cọc, chậm lớn, sinh sản kộm.
- Về cường độ nhiễm:
Gà ở 3 huyện nghiờn cứu đều nhiễm sỏn dõy với cƣờng độ nhẹ đến nặng. Tớnh chung, trong tổng số 1.215 mẫu phõn gà bị nhiễm sỏn dõy, cú 768 mẫu nhiễm nhẹ, chiếm tỷ lệ (63,21%); 292 mẫu nhiễm trung bỡnh, chiếm tỷ lệ (24,03%); 155 mẫu nhiễm nặng, chiếm tỷ lệ (12,76%).
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Nhƣ vậy, gà nhiễm sỏn dõy phần lớn ở cƣờng độ nhẹ, cƣờng độ nhiễm nặng thấp (biến động từ 9,13% - 17,82%). Trong đú, gà ở Định Hoỏ nhiễm sỏn dõy nặng nhất (17,82%), rồi đến Đồng Hỷ (10,90%), tỷ lệ nhiễm nặng ở huyện Phỳ Bỡnh là thấp nhất (9,13%).
Kết quả nghiờn cứu của chỳng tụi phự hợp với nhận xột của Phạm Sỹ Lăng và Phan Địch Lõn (2002) [10], Dƣơng Cụng Thuận (2003) [24]: Nƣớc ta là nƣớc nhiệt đới, nhiều vựng khớ hậu núng và ẩm quanh năm nờn rất thớch hợp cho sự phỏt triển và lõy lan của bệnh sỏn dõy gà. Vỡ vậy mà tỷ lệ nhiễm sỏn dõy gà cao và cƣờng độ nhiễm khỏ nặng.
3.1.2.2. Tỷ lệ và cường độ nhiễm sỏn dõy ở gà thả vườn của cỏc huyện qua mổ khỏm
Mổ khỏm khụng toàn diện cơ quan tiờu hoỏ 345 gà tại 3 huyện, chỳng tụi đó xỏc định đƣợc tỷ lệ và cƣờng độ nhiễm sỏn dõy của gà. Kết quả thu đƣợc đƣợc trỡnh bày ở bảng 3.3.
Bảng 3.3: Tỷ lệ và cƣờng độ nhiễm sỏn dõy ở gà thả vƣờn của cỏc huyện
(Qua mổ khỏm) Địa phƣơng (huyện) Số gà mổ khỏm (con) Số gà nhiễm (con) Tỷ lệ nhiễm (%) Cƣờng độ nhiễm (số lƣợng sỏn/ gà) Định Hoỏ 85 55 64,71 2 - 161 Đồng Hỷ 107 51 47,66 3 - 153 Phỳ Bỡnh 153 76 49,67 2 - 108 Tớnh chung 345 182 52,75 2 - 161
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
Số liệu bảng 3.3 cho thấy: - Về tỷ lệ nhiễm:
Trong 345 gà mổ khỏm, cú 182 gà nhiễm sỏn dõy, chiếm tỷ lệ 52,75%. Trong đú gà ở huyện Định Hoỏ nhiễm sỏn dõy với tỷ lệ cao nhất (64,71%). huyện Đồng Hỷ, Phỳ Bỡnh cú tỷ lệ gà nhiễm sỏn dõy lần lƣợt là 47,66% và