3.2. Kết quả tổng hợp các hợp chất lai của một số triterpenoid có chứa nhóm
3.2.1. Kết quả tổng hợp các hợp chất lai của betulin có chứa nhóm
Mặc dù nhiều dẫn xuất của acid triterpenoid đã được điều chế và sàng lọc hoạt tính gây độc tế bào của chúng [92-99] nhưng các hợp chất lai của triterpenoid có chứa nhóm hydroxamate thì được mô tả rất ít cho đến nay. Acid hydroxamic là nhóm được nghiên cứu rộng rãi với nồng độ ức chế nằm trong khoảng micromol đến nanomol. Chính vì thế với việc nghiên cứu thành công quy trình tổng hợp các hợp chất lai của một số triterpenoid có chứa nhóm benzamide, bằng các phương pháp tương tự luận án tiếp tục đặt ra hướng nghiên cứu tiếp theo là tổng hợp các hợp chất lai của một số triterpenoid có chứa nhóm hydroxamate nhằm mục tiêu tìm ra những hợp chất mới có hoạt tính sinh học lý thú.
3.2.1. Kết quả tổng hợp các hợp chất lai của betulin có chứa nhóm hydroxamate qua cầu nối ester
Các dẫn xuất ester 76a, 76b, 76e và 76f thu được khi cho betulin phản ứng với các anhydride acid khác nhau (sơ đồ 3.3) được cho phản ứng với H2NOH.HCl hoặc HNMeOMe.HCl với tỉ lệ mol là 1:2 trong dung môi DMF trong sự có mặt của BOP/DMAP thu được các sản phẩm hydroxamate 89a-h (sơ đồ 3.10). Cấu trúc của các hợp chất 89a-h được chứng minh bằng các phương pháp phổ hiện đại. Trong phân tử của các hợp chất này đều có chứa nhóm chức -CONHOH hoặc -CONMeOMe (gọi chung là nhóm hydroxamate).
Sơ đồ 3.10: Tổng hợp các hợp chất 89a-h
Trên phổ 1H-NMR của hợp chất 89a ngoài xuất hiện đầy đủ tín hiệu proton của khung lupan, còn xuất hiện thêm tín hiệu singlet 1H ở vùng trường yếu 10,39 ppm là đặc trưng của nhóm -NH, tín hiệu singlet 1H ở 8,69 ppm là của nhóm -OH trong -CONHOH (hình 3.19). Trên phổ 13C-NMR ngoài các tín hiệu của khung lupan, đặc biệt là nhóm cacbonyl của ester xuất hiện ở 172,8 ppm còn xuất hiện nhóm cacbonyl ở 168,3 ppm là của nhóm cacbonyl trong - CONHOH (hình 3.20). Trên phổ hồng ngoại IR cũng xuất hiện tín hiệu ở 3354 cm-1 với đỉnh nhọn là đặc trưng của nhóm -NH, ngoài nhóm cacbonyl của ester C-28 ở tín hiệu 1706 cm-1 còn xuất hiện thêm tín hiệu ở 1698 cm-1 là của nhóm cacbonyl trong -CONHOH. Trên phổ khối lượng của hợp chất 89a tìm thấy mảnh m/z [M+H]+: 558,3437 (hình 3.21) phù hợp với khối lượng tính toán theo lý thuyết cho CTPT C34H56NO5 là 558,3458. So sánh các kết quả phân tích phổ này với các tài liệu tham khảo đã được công bố trước đó [62, 63], có thể khẳng định cấu trúc của hợp chất 89a phù hợp với dữ liệu phổ đồ.
Hình 3.19: Phổ 1H-NMR của hợp chất 89a
Hình 3.20: Phổ 13C-NMR của hợp chất 89a
Hình 3.21: Phổ LC-MS/MS của hợp chất 89a
Sơ đồ 3.11:Cơ chế hình thành sản phẩm 89a
Đối với hợp chất 89b trên phổ 1H-NMR ngoài tín hiệu của khung lupan còn xuất hiện thêm tín hiệu singlet 3H ở 3,72 ppm là đặc trưng cho nhóm -NMe và tín hiệu singlet 3H ở 3,17 ppm là của nhóm -OMe (hình 3.22). Trên phổ 13C- NMR ngoài nhóm -C=O của este (C-28) ở tín hiệu 173,3 ppm, còn xuất hiện
C-B21L2 #5920RT:14.88AV:1NL:4.90E6 T:FTMS + p ESI SIM ms [556.5000-559.5000]
556.6 556.8 557.0 557.2 557.4 557.6 557.8 558.0 558.2 558.4 558.6 558.8 559.0 559.2 559.4
m/z 0
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100
Relative Abundance
558.3437
559.3469
557.5972 557.8488 558.1019
557.3305 558.6008 559.0940
556.5800 557.2203 558.8276
thêm tín hiệu ở 171,1 ppm là của nhóm -C=O trong nhóm -CONMeOMe (hình 3.23). Trên phổ IR xuất hiện hai tín hiệu ở 1733 và 1667 cm-1 là của hai nhóm -C=O này.
Hình 3.22: Phổ 1H-NMR của hợp chất 89b
Hình 3.23: Phổ 13C-NMR của hợp chất 89b
Hợp chất 89b còn được chứng minh bằng phổ khối lượng phân giải cao, trên phổ khối lượng tìm thấy mảnh m/z [M+H]+: 586,2869 (hình 3.24) phù hợp với khối lượng tính toán theo lý thuyết cho CTPT C36H60NO5 là 586,2866. So sánh với các dữ liệu phổ ở một số tài liệu đã được công bố trước đó [62, 63], có
thể khẳng định cấu trúc dự kiến của hợp chất 89b như trên phổ đồ. Cấu trúc của các hợp chất khác cũng được khẳng định tương tự.
Hình 3.24: Phổ LC-MS/MS của hợp chất 89b
C-B28 #4569RT:11.49AV:1NL:1.59E5 T:FTMS + p ESI SIM ms [584.5000-587.5000]
585.5 585.6 585.7 585.8 585.9 586.0 586.1 586.2 586.3 586.4 586.5 586.6 586.7 586.8 586.9 587.0 587.1 587.2
m/z 0
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70 75 80 85 90 95 100
Relative Abundance
586.2869
586.0152 586.7262
Hình 3.25: Cấu trúc hóa học và một số đặc trưng vật lý của hợp chất 89a-h
Bảng 3.9: Ttín hiệu đặc trưng trên phổ 1H-NMR của các hợp chất 89a-h Chất
H
89a 89b 89c 89d 89e 89f 89g 89h
NH
10,39 (1H,
s)
10,35 (1H, s)
10,38 (0,5H,
d)
OH
8,69 (1H, s)
8,69 (1H, s)
8,62 (0,5H,
d)
OMe
3,72 (3H, s)
3,67 (3H, s)
3,66 (3H, m)
3,74 (3H, s)
NMe
3,17 (3H, s)
3,17 (3H, s)
3,17 (3H, s)
3,16 (3H, s)
Ha-29
4,69 (1H, s)
4,68 (1H, s)
4,69 (1H, s)
4,68 (1H, s)
4,69 (1H, s)
4,67 (1H, s)
4,69 (1H, s)
4,67 (1H, s)
Hb-29
4,55 (1H, s)
4,58 (1H, s)
4,55 (1H, s)
4,58 (1H, s)
4,56 (1H, s)
4,58 (1H, s)
4,55 (1H, s)
4,57 (1H, s)
Ha-28
4,27 (1H, d, J =
11,0 Hz)
4,27 (1H, d, J =
11,0 Hz)
4,27 (1H, d,
J = 11,0
Hz)
4,26 (1H, d, J =
11,0 Hz)
4,25 (1H, d, J =
11,0 Hz)
4,34 1H, d,
J = 11,0
Hz)
4,18 (0,5H,
d, J = 6,0 Hz);
4,16 (0,5H,
d, J = 6,0 Hz);
4,28 (1H, d, J =
11,0 Hz)
Hb-28
4,25 (1H, d, J =
11,0 Hz)
3,89 (1H, d, J =
11,0 Hz)
3,85 (1H, d,
J = 11,0
Hz)
3,86 (1H, d, J =
11,0 Hz)
4,22 (1H, d, J =
11,0 Hz)
4,21 (1H, d, J =
11,0 Hz)
3,79 (0,5H,
dd, J
= 8,0;
1,0 Hz);
3,65 (0,5H,
dd, J
= 8,0;
1,0 Hz)
4,22 (1H, d, J =
11,0 Hz)
H-19
2,97- 2,94 (1H, m)
2,45- 2,41 (1H, m)
2,73- 2,67 (1H,m)
2,98- 2,94 (1H, m)
2,98- 2,94 (1H, m)
2,93- 2,88 (1H, m)
2,87- 2,85 (1H, m)
2,81- 2,73 (1H, m)
H-26
1,03 (3H, s)
1,02 (3H, s)
1,02 (3H, s)
1,03 (3H, s)
1,03 (3H, s)
1,07 (3H, s)
1,03 (3H, s)
1,03 (3H, s)
H-27
0,97 (3H, s)
0,98 (3H, s)
0,97 (3H, s)
0,97 (3H, s)
0,97 (3H, s)
0,97 (3H, s)
0,98 (3H, s)
0,98 (3H, s)
H-23
0,93 (3H, s)
0,96 (3H, s)
0,93 (3H, s)
0,96 (3H, s)
0,93 (3H, s)
0,96 (3H, s)
0,93 (3H, s)
0,93 (3H, s)
H-25
0,87 (3H, s)
0,84 (3H, s)
0,87 (3H, s)
0,82 (3H, s)
0,87 (3H, s)
0,84 (3H, s)
0,86 (3H, s)
0,86 (3H, s)
H-24
0,76 (3H, s)
0,76 (3H, s)
0,78 (3H, s)
0,76 (3H, s)
0,76 (3H, s)
0,77 (3H, s)
0,76 (3H, s)
0,76 (3H, s)