Chƣơng 1 : TỔNG QUAN TÀI LIỆU
2.4. PHƢƠNG PHÁP NGHIấN CỨU
2.4.8. Phƣơng phỏp xỏc định bệnh tớch đại thể, vi thể
- Phương phỏp xỏc định bệnh tớch đại thể: Mổ khỏm những lợn bị bệnh giun đũa sau khi gõy nhiễm (cú biểu hiện lõm sàng của bệnh giun đũa lợn), quan sỏt bằng mắt thƣờng và kớnh lỳp cỏc phần ruột non để tỡm giun đũa, chụp ảnh những vựng cú bệnh tớch điển hỡnh.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn
- Nghiờn cứu biến đổi bệnh lý vi thể bằng phƣơng phỏp làm tiờu bản tổ chức học theo quy trỡnh tẩm đỳc parafin, nhuộm Hematoxilin - eosin, đọc kết quả dƣới kớnh hiển vi quang học Labophot - 2 và chụp ảnh bằng mỏy ảnh gắn trờn kớnh hiển vi.
Phương phỏp làm tiờu bản vi thể cỏc đoạn ruột non cú bệnh tớch đại thể theo thứ tự cỏc bước sau:
+ Lấy bệnh phẩm: Cắt phần ruột non cú nhiều giun đũa ký sinh. + Cố định bằng dung dịch Formol 10%.
+ Sau khi cố định lấy mẫu bệnh phẩm trong Formol 10% ra cắt mỏng 2 - 3 cm, rửa tổ chức dƣới vũi nƣớc chảy nhẹ từ 2 - 3 giờ để loại bỏ Formol cú trong tổ chức.
+ Khử nƣớc: Dựng cồn tuyệt đối để rỳt nƣớc trong bệnh phẩm ra. + Làm trong tiờu bản: Ngõm bệnh phẩm qua hệ thống Xylen.
+ Tẩm parafin: Ngõm bệnh phẩm đó làm trong vào cỏc cốc đó đựng parafin núng chảy, để ở tủ ấm nhiệt độ 560C.
+ Đổ Block: Rút parafin núng chảy vào khuụn giấy rồi đặt miếng tổ chức (bệnh phẩm) đó tẩm parafin vào. Khi parafin đụng đặc hồn toàn thỡ búc khuụn. Sửa lại Block cho vuụng vắn.
+ Cắt và dỏn mảnh: Cắt bệnh phẩm trờn mỏy cắt microtocom, độ dày mảnh cắt 3 - 4 àm. Dỏn mảnh cắt lờn phiến kớnh bằng dung dịch Mayer (lũng trắng trứng gà 1 phần, glyxeril 1 phần; 1 ml hỗn hợp trờn pha trong 19 ml nƣớc cất).
+ Nhuộm tiờu bản bằng phƣơng phỏp Hematoxilin - eosin. Phƣơng phỏp nhƣ sau: Tẩy nến bằng Xylen, sau đú ngõm tiờu bản tổ chức vào cồn Ethanol 96% trong 5 phỳt. Tiờu bản tổ chức đƣợc rửa dƣới dũng nƣớc chảy nhẹ trong 5 phỳt và nhuộm Hematoxilin trong 5 phỳt, sau đú lại rửa nƣớc trong 15 phỳt và nhuộm Eosin trong 1 - 2 phỳt. Rửa dƣới dũng nƣớc chảy nhẹ, làm khụ tiờu bản trong dung dịch cồn cú nồng độ tăng dần 96% đến 100% với thời gian giảm dần từ 5 phỳt đến 2 phỳt.
Số húa bởi Trung tõm Học liệu – Đại học Thỏi Nguyờn http://www.lrc-tnu.edu.vn