Hợp chất β-sitosterol (SSH1)

Rửa giải cột bằng hệ dung môi n-hexan - etyl axetat (20:1), thu được khối chất rắn vô định hình, kết tinh lại trong n-hexan đã thu được tinh thể hình kim không màu (68 mg), điểm chảy 138-140 0C.

Phổ ESI-MS (m/z): 414 [M]+.

Phổ IR (νmax , cm-1): 3431,5 (dao động hóa trị OH), 2931,3 (dao động hóa trị CH); 1647,2 (C=C). Phổ 1 H-NMR (500M Hz, CDCl3) δ (ppm): 3,51 (1H, m, H-3); 5,31 (1H, dd, J = 5; 2 Hz, H-6); 1,01 (3H, s, H-18); 0,92 (3H, d, J = 6,6 Hz, H- 21); 0,85 (3H, d, J = 7,1 Hz, H-26); 0,84 (3H, d, J = 6,6 Hz, H-29); 0,81 (3H, d, J = 6,6 Hz, H-28); 0,68 (3H, s, H-19). Phổ 13 C-NMR (125M Hz, CDCl3) δ (ppm): 37,3 (C-1); 31,7 (C-2); 71,8 (C-3); 42,3 (C-4); 140,8 (C-5); 121,7 (C-6); 31,9 (C-7); 31,9 (C-8); 50,2 (C- 9); 36,5 (C-10); 21,1 (C-11); 39,8 (C-12); 42,3 (C-13); 56,8 (C-14); 24,3 (C- 15); 28,3 (C-16); 56,1 (C-17); 11,9 (C-18); 19,4 (C-19); 36,2 (C-20); 18,8 (C- 21); 33,9 (C-22); 26,1 (C-23); 45,9 (C-24); 29,2 (C-25); 19,1 (C-26); 19,4 (C- 27); 23,1 (C-28); 11,9 (C-29). 2.4.1.2. Hợp chất 1-linoleoylglycerol (SSH2)

Rửa giải cột bằng hệ dung môi n-hexan-etyl axetat (15:1), thu được chất vô định hình, kết tinh lại trong dung môi clorofom thu được chất bột màu trắng (57mg), điểm nóng chảy là 85-86 0

C, RfB= 70.

Thủy phân este hóa chất SSH2: Lấy 20mg chất SSH2 thủy phân trong dung môi metanol (30 ml) với sự có mặt của dung dịch HCl 1N (2 ml), hỗn hợp phản ứng được đun hồi lưu 6h, Sau khi phản ứng kết thúc thêm 70ml nước cất và chiết bằng n-hexan (3x20 ml). Dịch chiết n-hexan được làm khô

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

bằng Na2SO4 khan và đuổi hết dung môi thu được 11mg cặn. Sau khi chạy qua thiết bị GC có so sánh với các phổ đồ của chất chuẩn cho biết thành phần chính là metyl linoleat. Do vậy, có thể khẳng định phần axit của SSH2 chính là axit linoleic. Phổ thủy phân este hóa hợp chất SSH2 xem hình 3.3.1.

Phổ IR: ν (cm-1

), 3435 (OH), 1684 (C=O), 1028-1227 (C-O-C, este). Phổ 1 H-NMR (500MHz, CDCl3, TMS, δ ppm): Phần axit: 0,88 (3H, t, J=7Hz, H-18); 1,28 (s broad, CH2); 2,35 (2H, t J=7,5Hz, H-2); 1,64 (2H, m, H-3); 2,02 (6H, m, H-8,11,14); 5,35 (4H, m, H-9,10,12,13); Phần glycerin: 4,20 (2H, m, H-1); 3,94 (1H, m, H-2), 3,69 (1H, m, H-3). Phổ 13 C-NMR (125MHz, CDCl3, TMS, δ ppm): Phần axit: 174,34 (C- 1); 35,94 (C-2); 24,94 (C-3); 31.55-34,18 (C-8,11,17,20,16); 25,55-29,79 (CH2); 129,76-130,04 (C-9,10,12,13); 14,11 (CH3) Phần glycerin: 65,21 (C- 1); 70,31 (C-2); 63,37 (C-3). 2.4.1.3. Hợp chất (+)-gomisin M2 (SSH3)

Tiếp tục rửa giải cột bằng dung môi n-hexan – etyl axetat (10 : 1) thu được thu được chất vô định hình, kết tinh lại trong dung môi axeton thu được chất rắn tinh thể hình kim, không màu, khối lượng 215,7 mg, nhiệt độ nóng chảy 158-160 0

C, RfC= 65.

Phổ FT-ICR/MS (m/z): 387 [M+H]+

Phổ IR (νmax , cm-1): 3345,0 (dao động hóa trị OH); 2960,5 và 2867,9 (dao động hóa trị CH); 1634,0 (C=C); 1205,5 và 1035,2 (C-O-C).

Phổ 1 H-NMR (500MHz, CDCl3, TMS, δ ppm): 6,64 (1H, s, H-4); 2,57 và 2,46 (1H, dd, 7,5/13,5Hz và 1,5/13,5Hz , H-6); 1,93 (1H, m, H-7); 1,85 (1H, m, H-8); 2,17 và 2,46 (1H, dd, 1,0/13,5Hz và d, 13,5Hz, H-9); 6,44 (1H,s, H-11); 0,76 ( 3H, d, 7,0Hz, H-17); 0,98 ( 3H, d, 7,0Hz, H-18); 5,96 và 6,01 ( 1H, d, 1,0Hz, H-19); 3,56/3,91/3,89 ( 3H, s, H- OCH3) . Phổ 13 C-NMR (125MHz, CDCl3, TMS, δ ppm): 150,76 (C-1); 140,83 (C-2); 152,46 (C-3); 112,81 (C-4); 136,03 (C-5); 39,40 (C-6); 33,68 (C-7);

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

41,05 (C-8); 36,02 (C-9); 138,35 (C-10); 102,46 (C-11); 148,83 (C-12); 133,69 (C-13); 37,27 (C-14); 121,94 (C-15);118,94 (C-16); 13,13 (C-17); 21,81 (C-18); 101,6 (C-19); 61,74 (C-1-OCH3); 61,63 (C-2-OCH3); 56,43 (C-3-OCH3).

2.4.1.4. Hợp chất (±)-gomisin M1 (SSH4)

Rửa giải cột bằng hệ dung môi n-hexan-etyl axetat (5:1), thu được khối chất vô định hình. Đem kết tinh lại trong dung môi axeton thu được chất tinh thể hình kim, khối lượng 79,7mg, điểm chảy 117-119 0

C, RfD= 80. Phổ FT-ICR/MS (m/z): 387 [M+H]+.

Phổ IR (νmax, cm-1): 3494,5 (dao động hóa trị OH); 2960,5 và 2875,0 (dao động hóa trị CH); 1614,0 (C=C); 1238,4 và 1049,3 (C-O- C).

Phổ 1 H-NMR (500MHz, CDCl3, TMS, δ ppm): 6,37 (1H, s, H-4); 2,56 và 2,52 (1H, dd, 2,0/13,5Hz và 7,5/13,5Hz , H-6); 1,88 (1H, m, H-7); 1,76 (1H, m, H-8); 2,24 và 2,02 (1H, dd, 9,5/13,5Hz và d, 2,0/13,0Hz, H-9); 6,50 (1H,s, H-11); 0,73 ( 3H, d, 7,0Hz, H-17); 0,96 ( 3H, d, 7,0Hz, H-18); 5,92 và 6,01 ( 1H và d, 1,0Hz, H-19); 3,86/3,91/3,88 ( 3H, s, H- OCH3); 5,95 (1H, s, H-OH) . Phổ 13 C-NMR (125MHz, CDCl3, TMS, δ ppm): 146,91 (C-1); 133,60 (C-2); 150,44 (C-3); 150,44 (C-4); 134,52 (C-5); 39,25 (C-6); 33,55 (C-7); 40,80 (C-8); 35,73 (C-9); 138,39 (C-10); 103,47 (C-11); 148,90 (C-12); 134,70 (C-13); 141,08 (C-14); 120,26 (C-15); 116,71 (C-16); 12,96 (C-17); 21,44 (C-18); 100,81 (C-19); 59,75 (C-1-OCH3); 61,00 (C-2-OCH3); 55,74 (C-3-OCH3).

2.4.2. Cặn dịch chiết etyl axetat của cây Ngũ vị tử nam(SSE)

Dịch chiết etyl axetat làm khan bằng Na2SO4, sau đó cất loại dung môi dưới áp suất giảm, thu được 104,3g cặn khô thô. Sau khi kiểm tra sắc ký lớp mỏng, lấy 50g cặn trên đem tách trên cột silica gel, rửa giải cột bằng hệ dung môi clorofom-metanol tăng dần theo độ phân cực (0-100% metanol), dịch rửa giải được thu ở những thể tích nhỏ (510ml/phân đoạn). Kiểm tra các phân đoạn thu được bằng sắc ký lớp mỏng và hiện màu bằng thuốc thử vanilin -

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

H2SO4 5%, sau đó các phân đoạn giống nhau được gộp lại rồi đem cất loại dung môi.

2.4.2.1. Hợp chất β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranosit (SSE1)

Rửa giải cột bằng dung môi etyl axetat thu được chất bột vô định hình, làm sạch khối chất rắn này trong dung môi etyl axetat rồi kết tinh lại trong metanol thu được chất bột vô định hình màu trắng có khối lượng 49 mg, nhiệt độ nóng chảy 269-270o C, RfD= 65. Phổ ESI-MS: m/z (%): 396 [M - C6H12O6]+. Phổ FT-IR νmax (cm-1): 3390 (rộng); 2934; 1644; 1461; 1373; 1073; 1026. Phổ 1 H-NMR (500 M Hz, DMSO-d6) δ (ppm): 3,57 (1H, m, H-3); 5,34 (1H, dd, J = 5; 2 Hz, H-6); 0,65 (3H, s, H-18); 0,93 (3H, s, H-19); 0,94 (3H, d, J = 6,6 Hz, H-21); 0,83 (3H, d, J = 7,1 Hz, H-26); 0,85 (3H, d, J = 6,6 Hz, H-29); 0,80 (3H, d, J = 6,6 Hz, H-28). Phổ 13 C-NMR (125M Hz, DMSO-d6); δ (ppm): 36,3 (t, C-1); 27,9 (t, C-2); 76,8 (d, C-3); 38,4 (t, C-4); 140,6 (s, C-5); 121,3 (d, C-6); 31,7 (d, C-7); 31,5 (d, C-8); 50,7 (d, C-9); 35,6 (s, C-10); 21,0 (t, C-11); 36,9 (t, C-12); 45,2 (s, C-13); 56,3 (d, C-14); 23,9 (t, C-15); 29,4 (t, C-16); 55,5 (d, C-17); 11,9 (q, C-18); 19,8 (q, C-19); 33,4 (d, C-20); 19,6 (d, C-21); 31,5 (t, C-22); 28,8 (t, C-23); 49,7 (d, C-24); 25,5 (t, C-25); 19,0 (q, C-26); 20,7 (q, C-27); 22,7 (t, C-28); 12,2 (q, C-29); 100,9 (d, C-1'); 77,1 (d, C-3'); 76,8 (d, C-5'); 73,6 (d, C-2'); 70,2 (d, C-4'); 61,2 (t, C-6').

2.4.2.2. Hợp chất axit kadsuric [axit 3,4-seco-lanosta-4(28),9(11),24(Z)-trien-3,26-dioic] (SSE2) 3,26-dioic] (SSE2)

Tiếp tục rửa giải cột bằng dung môi clorofom-metanol (9 : 1) thu được khối chất vô định hình. Đem kết tinh lại trong dung môi clorofom thu được tinh thể hình kim ,không màu, có khối lượng 37mg, điểm chảy: 156-158 0

C, RfE=75. Phổ LC-ESI/MS positive (m/z): 471,0[M+H]+

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn Phổ 1 H-NMR (500MHz, CDCl3, TMS, δ ppm): 5,36 (1H, dd, J = 5,5Hz, H-11); 6,09 (1H, dd, J = 7,5Hz, H-24); 4,87 và 4,72 (2H, dd, H-29); 0,66 (3H, s, H-18); 1,08 (3H, s, H-19); 0,94 (3H, d, H-21); 1,91 (3H, s, H-27); 0,76 (3H, s, H-28); 1,77 (3H, s, H-30). Phổ 13 C-NMR (125MHz, CDCl3, TMS, δ ppm): 32,02(C-1); 26,81(C- 2); 180,84 (C-3); 147,62 (C-4); 49,50 (C-5); 27,91 (C-6); 28,99 (C-7); 42,50 (C-8); 142,43 (C-9); 42,56 (C-10); 118,74 (C-11); 37,72 (C-12); 44,02 (C- 13); 47,26 (C-14); 33,77 (C-15); 27,87 (C-16); 50,65 (C-17); 14,61 (C-18); 26,85 (C-19); 35,98 (C-20); 18,27 (C-21); 35,75 (C-22); 26,65 (C-23); 147,11 (C-24); 125,90 (C-25); 173,55 (C-26); 20,50 (C-27); 18,11 (C-28); 113,74 (C- 29); 23,17 (C-30).

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

Chƣơng 3

THẢO LUẬN KẾT QUẢ

3.1. Nguyên tắc chung

Để phân lập được các hợp chất trong bất kỳ một thực vật nào mà không làm ảnh hưởng tới thành phần hoá học có trong nó thì trước khi ngâm chiết bằng dung môi hữu cơ, mẫu thực vật phải được đưa đi khử men ngay sau khi thu mẫu và sấy khô ở điều kiện thích hợp. Về nguyên tắc việc ngâm chiết mẫu thực vật có thể tiến hành theo 2 cách phổ biến sau:

1. Chiết và phân lập các hợp chất từ mẫu thực vật bằng các loại dung môi có độ phân cực tăng dần: ete dầu hoả hoặc n-hexan, clorofom, etyl axetat, metanol hoặc etanol v.v....

2. Chiết tổng bằng các ancol (metanol, etanol) hay hệ dung môi ancol- nước. Sau đó tách loại các hợp chất bằng các loại dung môi có độ phân cực tăng dần như phương pháp 1 để thu được các dịch chiết có chứa các hợp chất có độ phân cực tương đối giống nhau.

Quá trình ngâm chiết thân, cành cây Ngũ vị tử nam (Schisandra

sphenanthera) được thực hiện theo phương án 2 (Sơ đồ 2.1).

3.2. Phân lập và nhận dạng các hợp chất có trong các dịch chiết khác nhau của cây Ngũ vị tử nam nhau của cây Ngũ vị tử nam

Các dịch chiết từ thân cành cây Ngũ vị tử nam (Schisandra sphenanthera) đều là những hỗn hợp phức tạp chứa các hợp chất khác nhau. Để phân lập từng chất ra khỏi hỗn hợp, đã sử dụng các phương pháp sắc ký cột như: Cột nhồi silica gel, với các hệ dung môi rửa giải thích hợp và thường phải lặp lại nhiều lần. Việc tinh chế các chất thường dùng phương pháp kết tinh lại trong dung môi hoặc hệ dung môi thích hợp. Nhờ đó, sẽ thu được các đơn chất có độ tinh khiết cao, đáp ứng các nhu cầu để khảo sát tính chất hóa lý và quang phổ của chúng. Đó là những yếu tố quan trọng trong quá trình nhận dạng và

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

xác định cấu trúc hóa học của các chất đã phân lập được từ các đối tượng nghiên cứu nói trên.

Việc phân lập các thành phần hóa học của cây Ngũ vị tử nam (Schisandra sphenanthera) đã thu được các hợp chất sạch gồm hai hợp chất steroit: β-sitosterol (SSH1) và β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranosit (SSE1), một hợp chất glycerit : 1-Linoleoylglycerol (SSH2), hai hợp chất lignan khung cyclolignan : (+)-gomisin M2 (SSH3) và (±)-gomisin M1 (SSH4), một hợp chất tritecpenoit khung lanostan: axit kadsuric (SSE2).

3.2.1. Hợp chất β-sitosterol hay stigmast-5-en-24R-3-ol (SSH1)

Hợp chất SSH1 thu được dưới dạng tinh thể hình kim màu trắng từ dịch n-hexan, nóng chảy ở 135-136 C, điểm nóng chảy so với chất mẫu không thay đổi. Trong các phổ 1

H- và 13C-NMR đã chỉ ra sự có mặt của một nhóm hydroxyl (H tại 3,53ppm (proton của CH liên kết với OH), C tại 71,7ppm và một nối đôi H tại 5,35ppm (1H, d, J 5Hz) tín hiệu của proton liên kết với C-6 ở vị trí một nối đôi, C-5 tại 140,70ppm, s và C-6 tại 121,7ppm, d).

Trên cơ sở các số liệu phổ chuẩn của chúng, so sánh với số liệu phổ chuẩn của β-sitosterol trong tài liệu [4] chất SSH1 được xác định là β- sitosterol hay stigmast-5-en-24R-3-ol. Các số liệu phổ 13C NMR của hợp chất SSH1 xem bảng 3.1 và công thức cấu tạo xem hình 3.1.

3.2.2. Hợp chất β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranosit (SSE1)

Hợp chất SSE1 thu được dưới dạng chất rắn vô định hình từ dịch etylaxetat, nóng chảy ở 269-270C, điểm nóng chảy so với chất mẫu không thay đổi. Quan sát trên các phổ 13

C-NMR và DEPT thấy có 35 tín hiệu của nguyên tử cacbon, trong đó có 7 nguyên tử cacbon gắn với oxy đặc trưng cho phần đường (nằm trong vùng 61,20 đến 100,8 ppm), có 2 tín hiệu ở 140,6 và 121,3ppm thuộc về một liên kết olefin. Các phổ IR và 1

H-NMR đều thấy có mặt của một liên kết đôi (1640cm-1

, H-6 ở 5,30ppm) và hấp thụ của nhiều nhóm hyđroxyl (3390 cm-1). Trong phổ 1

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

đường xuất hiện ở dạng doublet tại 4,32ppm, có J=7,8Hz và C-1’ tương ứng là 100,9 ppm.

Số liệu các phổ IR, MS, 1

H- và 13C-NMR thu được cho phép nghĩ đến cấu trúc của một hợp chất glucosit có công thức C35H60O6. Những điểm trình bày ở trên và kết hợp so sánh điểm nóng chảy với -sitosterol glucosit chuẩn đã cho phép khẳng định SSE1 là -sitosterol-3-O--D-glucopyranosyl hay daucosterol. Số liệu phổ 13C NMR của hợp chất SSE1 xem bảng 3.1 và cấu trúc hóa học của nó xem hình 3.1.

1. β-Sitosterol R = H

2. β-Sitosterol-3-O-β-D-glucopyranosit R = Glu

Hình 3.1. Cấu trúc hóa học của SSH1 và SSE1

Bảng 3.1. Độ dịch chuyển hóa học13C NMR của SSH1 và SSE1 STT -sitosterol (1) Daucosterol (2) 1 37,3 t 37,6 t 2 31,7 t 28,5 t 3 71,8 t 79,5 d 4 42,3 t 39,1 d 5 140,8 s 140,8 s 6 121,7 d 122,3 d 7 31,9 t 32,2 t

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 8 31,9 d 32,3 d 9 50,2 d 50,7 d 10 36,5 s 37,1 s 11 21,1 t 21,4 t 12 39,8 t 40,2 t 13 42,3 s 42,7 s 14 56,8 d 57,2 d 15 24,3 t 24,6 t 16 28,3 t 29,9 t 17 56,1 t 56,5 d 18 11,9 q 12,0 q 19 19,4 q 19,9 q 20 36,2 d 36,4 d 21 18,8 q 19,5 q 22 33,9 t 34,4 t 23 26,1 t 26,7 t 24 45,9 d 46,4 d 25 29,2 d 29,7 d 26 19,1 q 19,2 q 27 19,4 q 19,0 q 28 23,13 t 23,5 t 29 11,9 q 12,1 q 1’ 100,9 d 2’ 74,0 d 3’ 76,9 d 4’ 70,8 d 5’ 76,2 d 6’ 62,3 t

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

3.2.3. Hợp chất 1-linoleoylglycerol (SSH2)

Hợp chất SSH2 trong phổ IR của nó cho biết một số dao động liên kết ở các tần số (ν cm-1) đặc trưng như: 3435 (dao động hóa trị OH); 1684 (C=C); 1028 và 1227(C-O-C, este).

Các tín hiệu trên phổ 13

C-NMR và DEPT cho biết sự có mặt của một nhóm este cacbonyl tại C 174,34. Các số liệu phổ 1H và 13C-NMR lại cho biết trong phân tử có một nhóm metin cacbinol tại (C 70,31 / H 3,94), hai nhóm metylen liên kết với oxy tại (C 63,37 / H 3,69 và C 65,21 / H 4,20). Trên phổ này còn cho biết chỉ có tín hiệu của một nhóm methyl tại H

0,88ppm ứng với cacbon C 14,11ppm. Tín hiệu tại H 5,35ppm ứng với cacbon C 129,76-130,04 ppm đặc trưng cho hai nhóm metin. Tín hiệu tại H

1,28; 2,35; 1,64; 2,02ppm đặc trưng cho các proton thuộc sáu nhóm metylen. Việc phân tích các phổ HSQC và HMBC cho phép xác định cấu trúc của SSH2, cho phép khẳng định nó là một glycerit (glycerol este) với chỉ một axit béo không no mạch dài. Kết hợp phân tích các số liệu phổ của SSH2 với kết quả thủy phân este hóa của nó (mục 2.4.1.2 và hình 3.2.1) có thể khẳng

định hợp chất SSH2 là một glycerit với tên 1-linoleoylglycerol, cấu trúc hóa học của nó xem hình 3.2.

1-Linoleoylglycerol hay 1-(9E,12E-octadecadienoyl)glycerol Hình 3.2. Cấu trúc hóa học của SSH2

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

3.2.4. Hợp chất (+)-Gomisin M2 (SSH3)

Phổ khối lượng FT-ICR/MS của SSH3 cho thấy pic ion giả phân tử tại

m/z 387 [M+H]+, tương ứng với công thức C22H27O6 → M = 386 (C22H26O6). Trên phổ 1H NMR xuất hiện các tín hiệu của ba nhóm metoxy δH 3,56 (3H, s, 1-OCH3); 3,89 (3H, s, 3-OCH3) và 3,91 (3H, s, 2-OCH3); 2 tín hiệu của 2 proton nối đôi vòng thơm ở các độ dịch chuyển hóa học dưới dạng

doublet-doublet ở δH 2,57 (1H, dd, J = 7,5 và 13,5 Hz; Ha-6) và 2,46 (1H, dd,

J = 1,5 và 13,5 Hz; Hb-6); 2,17 (1H,dd, J = 1,0 và 13,5 Hz; Ha-9) và 2,06(1H, d, J = 13,5 Hz; Hb-9). Hai proton còn lại thuộc nhóm metin (CH) xuất hiện dưới dạng multiplet ở δH 1,93 (H-7) và 1,85 (H-8).

Phổ 1

H, 13C-NMR, DEPT và HSQC của SSH3 cho biết trong phân tử có tổng số 22 cacbon, gồm có 12 C thuộc các liên kết đôi vòng thơm (δC nằm trong khoảng 112,81 – 150,76), 3 nhóm metoxy ở các δC 61,74 (1-OCH3); 61,63 (2-OCH3) và 56,43 (3-OCH3), hai nhóm metyl khác xuất hiện tín hiệu ở các δC 21,81 (C-18); 13,13 (C-17). Trong phân tử SSH3, ngoài 2 cacbon metin thuộc vòng thơm còn thấy xuất hiện 2 cacbon metin no ở δC 33,68 (C- 7) và 41,05 (C-8). Ba nhóm metylen, một nhóm có C xuất hiện ở trường thấp δC 101,66 (C-19) đặc trưng cho liên kết metylendioxi (O-CH2-O), hai nhóm metylen còn lại ở các δC 39,46 (C-6); 36,02 (C-9). Phổ hai chiều HSQC cho phép gán các giá trị độ dịch chuyển hoá học của các proton với các cacbon tương ứng.

Phổ HMBC của SSH3 cho thấy các tương tác xa giữa proton H-4 (δH-4

6,64) với các cacbon C-1 (δC-1 150,76); C-2 (δC-2 140,83); C-3 (δC-3 152,46); C-5 (δC-5 1136,03); C-16 (δC-16 118,94) và với C-6 (δC-6 39,40). Tương tác giữa H-11 (δH-11 6,44) với C-12 (δC-12 148,83); C-10 (δC-10 138,35); C-13 (δC-13

133,69); C-14 (δC-14 137,27); C-15 (δC-15 121,94) và với C-9 (δC-9 36,02). Các tương tác xa của các proton thuộc các nhóm metoxy 1-OCH3 tại δH 3,56 với C-1 (δC-1 150,76); 2-OCH3 (δH 3,91) với C-2 (δC-2 140.83) và 3-OCH3 (δH

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

3,91) với C-3 (δC-3 152,46); các proton H-19 (δH-19 5,96 và 6,01) tương tác với C-12 (δC-12 148,83) và C-13 (δC-13 133,69). Các proton H-18 tại δH-18 0,98 tương tác với C-7 (δC-7 33,68); C-8 (δC-8 41,05) và C-9 (δC-9 36,02), còn các proton H-17 (δH-17 0,76) tương tác với C-7 (δC-7 33,68); C-8 (δC-8 41,05) và C- 6 (δC-6 39,40). Các proton H-6 (δH-6a,b 2,46 và 2,57) tương tác với C-7 (δC-7

33,68); C-8 (δC-8 41,05) C-17 (δC-17 13,13); C-5 (δC-5 136,03); C-4 (δC-4

112,81) và C-16 (δC-16 121,94). Các proton H-9 (δH-9a,b 2,06 và 2,17) tương tác với C-7 (δC-7 33,68); C-8 (δC-8 41,05); C-18 (δC-18 21,81); C-11 (δC-11 102,46); và C-15 (δC-15 118,94). Proton H-7 (δH-7 1,93) tương tác với C-8 (δC-8 41,05); C-9 (δC-9 36,02); C-6 (δC-6 39,40); proton H-8 (δH-8 1,85) tương tác với C-7 (δC-7 33,68); C-9 (δC-9 36,02).

Các số liệu phổ NMR của hợp chất SSH3 xem (bảng 3.2) và các phổ đồ (hình 3.3.1-3.3.7).

Qua phân tích các số liệu phổ của SSH3 như trên, kết hợp với so sánh các số liệu phổ của chất (+)-gomisin M2 trong tài liệu [60] có thể khẳng định hợp chất SSH3 thu được từ dịch n-hexan của thực vật Schisandra sphenanthera chính là (+)-gomisin M2, công thức cấu tạo của nó xem hình 3.3.

(+)-Gomisin M2

Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn

Bảng 3.2. Các số liệu NMR và các tƣơng tác xa trong SSH3

STT a,b SSH3 (+)-Gomisin M2 [60]

δC a,cδH H→C (HMBC) a,bδC a,cδH

1 150,76 150,4 2 140,83 140,4 3 152,46 152,1

Thu nhận các dịch chiết

Hợp chất (+)-Gomisin M2 (SSH3)