Hợp chất SSH1 thu được dưới dạng tinh thể hình kim màu trắng từ dịch n-hexan, nóng chảy ở 135-136 C, điểm nóng chảy so với chất mẫu không thay đổi. Trong các phổ 1
H- và 13C-NMR đã chỉ ra sự có mặt của một nhóm hydroxyl (H tại 3,53ppm (proton của CH liên kết với OH), C tại 71,7ppm và một nối đôi H tại 5,35ppm (1H, d, J 5Hz) tín hiệu của proton liên kết với C-6 ở vị trí một nối đôi, C-5 tại 140,70ppm, s và C-6 tại 121,7ppm, d).
Trên cơ sở các số liệu phổ chuẩn của chúng, so sánh với số liệu phổ chuẩn của β-sitosterol trong tài liệu [4] chất SSH1 được xác định là β- sitosterol hay stigmast-5-en-24R-3-ol. Các số liệu phổ 13C NMR của hợp chất SSH1 xem bảng 3.1 và công thức cấu tạo xem hình 3.1.
3.2.2. Hợp chất β-sitosterol-3-O-β-D-glucopyranosit (SSE1)
Hợp chất SSE1 thu được dưới dạng chất rắn vô định hình từ dịch etylaxetat, nóng chảy ở 269-270C, điểm nóng chảy so với chất mẫu không thay đổi. Quan sát trên các phổ 13
C-NMR và DEPT thấy có 35 tín hiệu của nguyên tử cacbon, trong đó có 7 nguyên tử cacbon gắn với oxy đặc trưng cho phần đường (nằm trong vùng 61,20 đến 100,8 ppm), có 2 tín hiệu ở 140,6 và 121,3ppm thuộc về một liên kết olefin. Các phổ IR và 1
H-NMR đều thấy có mặt của một liên kết đôi (1640cm-1
, H-6 ở 5,30ppm) và hấp thụ của nhiều nhóm hyđroxyl (3390 cm-1). Trong phổ 1
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
đường xuất hiện ở dạng doublet tại 4,32ppm, có J=7,8Hz và C-1’ tương ứng là 100,9 ppm.
Số liệu các phổ IR, MS, 1
H- và 13C-NMR thu được cho phép nghĩ đến cấu trúc của một hợp chất glucosit có công thức C35H60O6. Những điểm trình bày ở trên và kết hợp so sánh điểm nóng chảy với -sitosterol glucosit chuẩn đã cho phép khẳng định SSE1 là -sitosterol-3-O--D-glucopyranosyl hay daucosterol. Số liệu phổ 13C NMR của hợp chất SSE1 xem bảng 3.1 và cấu trúc hóa học của nó xem hình 3.1.
1. β-Sitosterol R = H
2. β-Sitosterol-3-O-β-D-glucopyranosit R = Glu
Hình 3.1. Cấu trúc hóa học của SSH1 và SSE1
Bảng 3.1. Độ dịch chuyển hóa học13C NMR của SSH1 và SSE1 STT -sitosterol (1) Daucosterol (2) 1 37,3 t 37,6 t 2 31,7 t 28,5 t 3 71,8 t 79,5 d 4 42,3 t 39,1 d 5 140,8 s 140,8 s 6 121,7 d 122,3 d 7 31,9 t 32,2 t
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn 8 31,9 d 32,3 d 9 50,2 d 50,7 d 10 36,5 s 37,1 s 11 21,1 t 21,4 t 12 39,8 t 40,2 t 13 42,3 s 42,7 s 14 56,8 d 57,2 d 15 24,3 t 24,6 t 16 28,3 t 29,9 t 17 56,1 t 56,5 d 18 11,9 q 12,0 q 19 19,4 q 19,9 q 20 36,2 d 36,4 d 21 18,8 q 19,5 q 22 33,9 t 34,4 t 23 26,1 t 26,7 t 24 45,9 d 46,4 d 25 29,2 d 29,7 d 26 19,1 q 19,2 q 27 19,4 q 19,0 q 28 23,13 t 23,5 t 29 11,9 q 12,1 q 1’ 100,9 d 2’ 74,0 d 3’ 76,9 d 4’ 70,8 d 5’ 76,2 d 6’ 62,3 t
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
3.2.3. Hợp chất 1-linoleoylglycerol (SSH2)
Rửa giải cột bằng hệ dung môi n-hexan-etyl axetat (15:1), thu được chất vô định hình, kết tinh lại trong dung môi clorofom thu được chất bột màu trắng (57mg), điểm nóng chảy là 85-86 0
C.
Hợp chất SSH2 trong phổ IR của nó cho biết một số dao động liên kết ở các tần số (ν cm-1) đặc trưng như: 3435 (dao động hóa trị OH); 1684 (C=C); 1028 và 1227(C-O-C, este).
Các tín hiệu trên phổ 13
C-NMR và DEPT cho biết sự có mặt của một nhóm este cacbonyl tại C 174,34. Các số liệu phổ 1H và 13C-NMR lại cho biết trong phân tử có một nhóm metin cacbinol tại (C 70,31 / H 3,94), hai nhóm metylen liên kết với oxy tại (C 63,37 / H 3,69 và C 65,21 / H 4,20). Trên phổ này còn cho biết chỉ có tín hiệu của một nhóm methyl tại H
0,88ppm ứng với cacbon C 14,11ppm. Tín hiệu tại H 5,35ppm ứng với cacbon C 129,76-130,04 ppm đặc trưng cho hai nhóm metin. Tín hiệu tại H
1,28; 2,35; 1,64; 2,02ppm đặc trưng cho các proton thuộc sáu nhóm metylen. Việc phân tích các phổ HSQC và HMBC cho phép xác định cấu trúc của SSH2, cho phép khẳng định nó là một glycerit (glycerol este) với chỉ một axit béo không no mạch dài. Kết hợp phân tích các số liệu phổ của SSH2 với kết quả thủy phân este hóa của nó (mục 2.4.1.2 và hình 3.2.1) có thể khẳng
định hợp chất SSH2 là một glycerit với tên 1-linoleoylglycerol, cấu trúc hóa học của nó xem hình 3.2.
1-Linoleoylglycerol hay 1-(9E,12E-octadecadienoyl)glycerol Hình 3.2. Cấu trúc hóa học của SSH2
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn