Với các gà bị bệnh, sau khi mổ khám quan sát bệnh tắch, chúng tôi tiến hành lấy mẫu các cơ quan: dây thần kinh ngoại vi, tủy sống, não, mắt, gan, lách, thận, tim, phổi, ruột, tuyến tụy, dạ dày tuyến, dạ dày cơ, da, cơ, buồng trứng và túi Fabricius ngâm bảo quản trong dung dịch formalin 10%. Sau 15 ngày, chúng tôi tiến hành làm tiêu bản vi thể. Mỗi block bệnh phẩm chúng tôi cắt lấy 3 tiêu bản bằng máy cắt Microtom và nhuộm bằng Hematoxilin & Eosin.
Dưới kắnh hiển vi, các tổn thương vi thể ựược quan sát thấy như sau:
4.3.5.1. Não
Có sự thâm nhiễm chủ yếu là các tế bào lympho lớn. Sự xâm nhiễm của các tế bào lympho trong não giống với các thần kinh ngoại vi. Các khu vực bị ảnh hưởng thường thấy là khu vực lân cận của các rễ thần kinh, ựôi khi vùng giữa não và vùng hành tủy. Một số các tổn thương tăng sinh cũng ựược thấy ở màng não và vùng màng mạch. Hầu hết các tổn thương tăng sinh xuất hiện xung quanh các mạch quản và chúng mở rộng ựến các mô thần kinh xung quanh. Một số tổn thương ựược liên kết với sự tăng sinh các tế bào thần kinh ựệm và một số tế bào hình sao. Các tế bào ựang trong giai ựoạn gián phân. Mặt khác, các tế bào lympho tập trung xung quanh mạch quản của não (Hình 4.27).
4.3.5.2. Dây thần kinh và tủy sống
Sự tắch tụ tế bào thường thấy ở lối vào của rễ thần kinh. Các thành phần tế bào giống với các tế bào xâm nhiễm vào thần kinh ngoại vi. Sự tắch tụ các tế bào cục bộ bị giới hạn ựối với vùng gần các mạch quản nhỏ và xuất hiện thường xuyên trong khu vực dưới màng não và chất trắng. Các tế bào lan rộng ra mô thần kinh và tế bào thần kinh xung quanh, bên cạnh ựó là sự thoái hóa các tế bào. Một số vùng có hiện tượng phù và tăng sinh nhẹ của các tế bào thần kinh ựệm (Hình 4.38 và hình 4.39).
4.3.5.3. Mắt
Các dây thần kinh thị giác không có sự biến ựổi gì ựặc biệt, nhưng các sợi thần kinh chạy qua nhãn cầu có biểu hiện tăng sinh các tế bào lympho nhỏ. Các tế bào dạng lympho ựang trong giai ựoạn gián phân. Có sự tăng các tế bào lympho to, trung bình và nhỏ ở thể mi, màng cứng và màng mạch. Các tế bào dạng lympho tăng sinh trong các mô liên kết thưa xung quanh nhãn cầu. Sự thâm nhiễm của các tế bào lympho, tế bào tương bào và tế bào heterophils cũng ựược quan sát thấy ở màng mạch, con ngươi, mào và cơ mắt.
4..3.5.4. Da
Dưới da có sự thâm nhiễm và tự hủy của các tế bào dạng lympho ựa hình thái. Các tế bào khối u tự hủy có nhân ựông ựậm, tăng nguyên sinh chất vùng rìa nhân tế bào. Da bị loét nhiều ở vùng có sự thâm nhiễm tế bào lympho (Hình 4.35, hình 4.36 và hình 4.37).
Các tổn thương ở nội tạng
Mức ựộ của các tổn thương có thể phân thành 3 loại tùy theo kắch thước và số lượng ựám tế bào lympho, sự phá hủy cấu trúc bình thường, sự hiện diện của tế bào dạng gián phân và dạng tế bào xuất hiện.
- Nhẹ: các tổn thương vi thể có từ 2 hay 3 hoặc một số ựám tế bào dạng lympho ở mỗi lam kắnh. Cấu trúc bình thường gần như là nguyên vẹn. Những thay ựổi này có thể ựược coi như là một sự tăng sản bất thường của các mô lympho. Các ựám tế bào chủ yếu là các lympho nhỏ và một phần các tế bào lưới.
- Trung bình: các tổn thương vi thể là sự tăng sinh khối u của các tế bào dạng lympho. Kắch thước và số lượng các ựám tế bào thường lớn hơn loại nhẹ nhưng các tổn thương của chúng thường ựược hợp nhất thành một ựám. Sự phá hủy cấu trúc bình thường và sự gián phân dễ dàng ựược quan sát thấy. Thành phần các tế bào ựược quan sát thấy giống với với các tế bào xâm nhập vào dây thần kinh ngoại vi.
- Nặng: Các khối u dạng lympho có thể dễ dàng ựược nhận thấy bằng mắt thường. Dưới kắnh hiển vi quang học các tổn thương chủ yếu là sự thâm nhiễm tế bào và các tế bào ung thư.
4.3.5.5. Gan
Sự tắch tụ các tế bào thường thấy ở cục bộ ở các mô liên kết giữa các tiểu thùy ựặc biệt là xung quanh các mạch quản nhỏ. Có các ựám tế bào tăng sinh và sự lan rộng của các ựám tế bào này vào các vùng lân cận. Chúng thường hợp nhất thành một ựám và thường quan sát thấy có các kắch thước khác nhau. Các ựám này có dạng tăng sinh dạng nốt khó xác ựịnh. Sự thâm nhiễm tế bào lympho một phần thấy ở các mao mạch nan hoa (Hình 4.29, hình 4.30 và hình 4.31).
4.3.5.6. Lách
Sự tăng sinh các tế bào lưới và các tế bào dạng lympho thường ựược thấy rõ rệt xung quanh các ựộng mạch nhỏ. Ở một số lam kắnh, các tế bào khối u tăng sinh nhanh chóng ở lớp vỏ xơ và lan nhanh ựến dưới thanh mạc. Trong một số lam kắnh có sự tăng sinh tế bào lympho thấy rõ và phần trung tâm của lách và nhu mô lách ựược thay thế bởi các tế bào u.
4.3.5.7. Thận
Sự tăng sinh tế bào dạng lympho ở các mức ựộ khác nhau ựược thấy giữa các ống thận. Ở một số lam kắnh thấy có sự tăng sinh mạnh của các tế bào dạng lympho và các tế bào này ựã hoàn toàn thay thế nhu mô thận và chỉ còn nhìn thấy một phần nhỏ nhu mô thận. Sự thâm nhiễm tế bào dạng lympho ựược thấy ở trong và xung quanh lớp áo của niệu quản.
4.3.5.8. Phổi
Trong một số lam kắnh, nhu mô phổi hoàn toàn ựược thay thế bởi các tế bào khối u trừ các phế quản nhánh. Một số mẫu có sự tăng sinh của các tế bào dạng lympho lan tỏa hay cục bộ ở thành các phế nang và xung quanh các phế quản lớn và phế quản nhánh (Hình 4.28).
4.3.5.9. Tim
Phần lớn cơ tim ựược thay thế bởi các tế bào khối u trong một số mẫu. Sự tập hợp các tế bào khối u thường ựược quan sát thấy ở mô liên kết thưa, vùng dưới ngoại tâm mạc và mô mỡ xung quanh mạch vành tim. Trong một số tiêu bản, sự thâm nhiễm tế bào thường thấy là dạng lan tỏa hay cục bộ giữa các sợi cơ.
4.3.5.10. Buồng trứng
Nhiều mẫu buồng trứng ựã ựược thay thế bằng sự tăng sinh tế bào dạng lympho. đôi lúc ở một số slide, ựám rối màng treo trước, ựám rối bụng và các mô quanh tuyến thượng thận, vùng lân cận của buồng trứng ựược xâm chiếm bởi các tế bào ung thư trở nên khó xác ựịnh. Thành phần các tế bào giống với các tế bào ựã xâm nhập vào thần kinh ngoại vi.
4.3.5.11. Tuyến tụy
Một số lam kắnh cho thấy có sự tăng sinh nhiều ở cục bộ của các tế bào khối u trong nhu mô tuyến tụy và các dây thần kinh là giống nhau.
4.3.5.12. Dạ dày tuyến
Sự xâm nhiễm của các tế bào khối u ựược quan sát thấy ở lớp cơ niêm, thùy tuyến, lớp cơ và dưới thanh mạc và hậu quả là màng niêm mạc và tuyến dày lên.
4.3.5.13. Dạ dày cơ
Sự thâm nhiễm tế bào thường ắt và ở xung quanh mạch quản nhỏ, ở màng niêm mạc, lớp cơ và dưới thanh mạc.
4.3.5.14. Ruột
Có sự tăng sinh tế bào dạng lympho thường thấy ở lớp áo riêng, lớp cơ và dưới thanh mạc và sự dày lên của thành ruột thường ựược thấy rõ ở ruột non và ruột già. Các nang lympho của màng niêm mạc của manh tràng tăng sản và có ranh giới với các mô lân cận nhưng ựôi khi sự phân ranh giới không rõ ràng.
4.3.5.15. Túi Fabricius
Hầu hết các nang lympho có phân ranh giới rõ và hoại tử thường ựược quan sát thấy ở trung tâm các nang. Trong một số trường hợp, các nang lympho không phân ựịnh ranh giới rõ ràng với các mô xung quanh và ựã ựược thay thế do sự tăng sinh cao ựộ của các tế bào dạng lympho (Hình 4.33 và hình 4.34).
4.3.5.16. Cơ
Thường thấy các tế bào lympho tăng sinh tập hợp ở cục bộ xung quanh các mạch quản và lan rộng vào các mô xung quanh. Trong một số lam kắnh, một vùng lớn của các mô cơ ựược thay thế bởi các tế bào dạng lympho. đồng thời, sự thoái hóa kắnh và biến ựổi của các sợi cơ ựộc lập với các tổn thương tăng sinh. Teo cơ ựã ựược quan sát thấy trong trường hợp bại liệt (Hình 4.32).
MỘT SỐ HÌNH ẢNH TỔN THƯƠNG VI THỂ CỦA GÀ RI MẮC BỆNH MAREK
Hình 4.27. Hiện tượng viêm não. Các tế bào lympho tăng sinh và bao quanh mạch quản, x100, HE
Hình 4.28. Phổi. Sự thâm nhiễm lan tràn của các tế bào dạng lympho quanh phế quản, x100, HE
Hình 4.29. Gan. Sự thâm nhiễm sớm các tế bào dạng lympho xung quanh mạch quản, x100, HE
Hình 4.30. Gan. Các tế bào lympho ựa hình thái. Sự thay ựổi về hình thái của các tế bào lympho xảy ra giữa các mô khác nhau trên cùng một cá thể.
Thỉnh thoảng có các tế bào lympho non, x200, HE
Hình 4.31. Gan. Thâm nhiễm các tế bào lympho to, trung bình, nhỏ và một số tế bào lưới. Hầu hết các tế bào này là các tế bào khối u ác tắnh ựang chuyển dạng từ tế bào T, một số là tế bào B (do sự ựáp ứng của vật chủ ựối
Hình 4.32. Cơ vân. Tế bào Marek (to) ở giữa ựám tế bào thâm nhiễm. Tế bào này do sự thoái hóa của tế bào lymphoblast. x400, HE
Hình 4.33. Túi Fabricius. Các khối u trong mô kẽ của túi Fabricius, thâm nhiễm các tế bào dạng lympho trong các nang. Các nang lympho không
Hình 4.34. Túi Fabricius. Sự thâm nhiễm lan rộng của các tế bào lympho ựa hình thái ở giữa các nang. Lớp vỏ của 2 nang nhìn từ 2 phắa khác nhau.
x200, HE
Hình 4.35. Mô dưới da. Tổn thương tự hủy của mô dưới da. Các tế bào khối u tự hủy có nhân ựông ựậm, tăng nguyên sinh chất vùng rìa nhân tế bào.
Hình 4.36. Da. Sự thâm nhiễm tế bào lympho ở lớp bì và dưới da, da bị loét ở vùng có thâm nhiễm tế bào lympho. X100, HE
Hình 4.37. Da. Thâm nhiễm tế bào lympho ựa hình thái ở mô dưới da. X400, HE.
Hình 4.38. Thần kinh ựùi. Viêm dây thần kinh, có thâm nhiễm tế bào
lympho nhỏ và tế bào tương bào ở mạch quản trong mô thần kinh x 400, HE.
Hình 4.39. Thần kinh ựùi. Thâm nhiễm tế bào lympho và tế bào tương bào (ở giữa), phù tổ chức thần kinh ựặc biệt có sự bong lớp vỏ myeline của sợi
PHẦN V
KẾT LUẬN VÀ đỀ NGHỊ 5.1. KẾT LUẬN
Từ những kết quả nghiên cứu ựã thu ựược về tình hình mắc bệnh Marek của gà Ri, có thể rút ra một số kết luận như sau:
- Lứa tuổi mắc bệnh là từ 3,5 Ờ 10 tháng tuổi (14 Ờ 37 tuần tuổi) và cao ựiểm nhất vào 6 Ờ 7 tháng tuổi (20 Ờ 29 tuần tuổi).
- Bệnh Marek xảy ra trên ựàn gà Ri tại trại thực nghiệm gia cầm Liên Ninh năm 2012 Ờ 2013 với tỷ lệ mắc từ 0,56 Ờ 5,79% tắnh trên tổng ựàn và 33,33 Ờ 76,32% tắnh trên số xác mổ; tỷ lệ chết từ 0,37 Ờ 3,99% và tỷ lệ tử vong cao (40 Ờ 68,97%).
- Triệu chứng lâm sàng chủ yếu là xuất hiện các khối u trên da, mào tái, ủ rũ và xác gầy. Triệu chứng liệt xuất hiện ắt nhưng rất ựiển hình.
- Các tổn thương ựại thể chủ yếu ở gà Ri mắc bệnh Marek là sự xuất hiện các khối u ở 2 dạng: lan tỏa và kết hạt ở các cơ quan: gan (91,36%), lách (72,84%), thận (58,02%), dạ dày tuyến (49,38%), da (48,15%), ruột (27,16%), tim (18,52%), buồng trứng (9,88%), phổi (8,64%), cơ (3,70%), dây thần kinh (1,23%).
- Các tổn thương vi thể chủ yếu ở gà Ri mắc bệnh Marek là sự thâm nhiễm cao ựộ của các tế bào lympho ựa hình thái ở mô thần kinh, da và các cơ quan nội tạng: gan, lách, thận, phổi, tim, dạ dày tuyến, dạ dày cơ, buồng trứng, tuyến tụy, ruột, túi Fabricius và cơ.
5.2. đỀ NGHỊ
- Cần tiến hành nghiên cứu nhiều lần, trên cả các ựàn gà không dùng vacxin và các ựàn gà ựã dùng vacxin ựể có kiến thức hoàn chỉnh hơn về bệnh Marek ở nước ta.
- Tiến hành nghiên cứu chuyên sâu hơn về bệnh Marek như sử dụng phương pháp PCR ựể phân lập các chủng vius gây bệnh ở Việt Nam, từ ựó ựánh giá ựược hiệu lực các loại vacxin ựang lưu hành ở nước ta hiện nay.
TÀI LIỆU THAM KHẢO Tiếng Việt
Hồ đình Chúc (1983). ỘBước ựầu xác ựịnh bệnh Marek ở Việt NamỢ, Kết quả
nghiên cứu khoa học và kỹ thuật thú y (1979 Ờ 1984). NXB Nông Nghiệp,
Hà Nội, 21 Ờ 28.
Nguyễn Huy đạt, Vũ Thị Hưng và Hồ Xuân Tùng (2005). ỘNghiên cứu chọn lọc nâng cao năng suất gà Ri vàng rơmỢ, Báo cáo khoa học năm 2005 - Phần
nghiên cứu giống vật nuôi. Viện Chăn nuôi, 203 - 213.
Nguyễn Bá Hiên, Huỳnh Thị Mỹ Lệ, Lê Văn Lãnh và đỗ Ngọc Thúy (2011). Giáo
trình bệnh truyền nhiễm thú y. NXB Nông nghiệp, Hà Nội, 348 Ờ 356.
Nguyễn Bá Hiên, Trần Xuân Hạnh, Nguyễn Hữu Hưng, Phạm Sỹ Lăng, Huỳnh Thị Mỹ Lệ, Lê Ngọc Mỹ, Phạm Quang Thái, Phạm Ngọc Thạch, đỗ Ngọc Thúy, Nguyễn Văn Thọ (2011). Bệnh gia cầm ở Việt Nam. NXB Nông
nghiệp, Hà Nội, 126 Ờ 139.
Phan Văn Lục (2005). ỘMức ựộ nhiễm bệnh Marek và ứng dụng vacxin phòng bệnh cho ựàn gà giống tại trại thực nghiệm Liên NinhỢ, Tạp chắ Khoa học
Công nghệ Chăn nuôi, số 13. Viện Chăn Nuôi.
Lê Văn Năm (1983). ỘPhân lập virus ADN Herpes typ B nguyên nhân gây bệnh Marek ở gàỢ, Tuyển tập công trình nghiên cứu khoa học kỹ thuật gia cầm
và ựộng vật mới nhập. NXB Nông Nghiệp, Hà Nội, 576 Ờ 580.
Lê Văn Năm (1990). ỘXác ựịnh ựặc ựiểm và tần số biến ựổi khối u do bệnh Marek gây nên (1984 Ờ 1990)Ợ, Tuyển tập công trình nghiên cứu khoa học kỹ thuật
gia cầm và ựộng vật mới nhập. NXB Nông Nghiệp, Hà Nội, 581 Ờ 585.
Lê Văn Năm (1996; 2003). Bệnh Marek Ờ một mô hình khối u truyền nhiễm.
NXB Nông Nghiệp, Hà Nội.
Lê Văn Năm(2005). 100 câu hỏi và ựáp quan trọng dành cho cán bộ thú y và người chăn nuôi gà. NXB Lao ựộng Ờ xã hội, 246 - 268
Cao Xuân Ngọc (1993). ỘKết quả chẩn ựoán giải phẫu bệnh học bệnh Marek ở một số trại gà công nghiệp thuộc ngoại thành Hà NộiỢ, Kết quả nghiên cứu khoa học
Khoa chăn nuôi Ờ thú y (1991 Ờ 1993). NXB Nông Nghiệp, Hà Nội, 127 Ờ 131.
Viện Chăn nuôi (2004). Atlas các giống vật nuôi ở Việt Nam. Nhà xuất bản
Nông nghiệp, Hà Nội.
Tếng Anh
C. Balachandran, N. Pazhanivel, S. Vairamuthu and B. Murali Manohar (2009).
MarekỖs desease and lymphoid leucosis in checken Ờ a histopathological survey. Deparment of Veterinary Pathology, Madras Veterinary College,
Chennai Ờ 600 007.
Calnek, B.W. and witter, R.L. (1991). MarekỖs disease. In: Diseases of Poultry. Eds. Calnek, B.W., Barnes, H.J., Bearc, C.W., Reid, W.M. and Yoder Jrs, H.W. 9th Edn. Iowa state University Press, Ames, Iowa, pp: 342 Ờ 385.
OIE (2012). Chapter 2.3.13. MarekỖs disease . Trong: ỘTerrestrial Manual 2010Ợ (OIE. ed).
Payne., L. N., và Vemugopal., K.(2000). Neoplastic diseases: MarekỖs disease, avian leukosis and reticuloendotheliosis. Revue scientifique et technique
(International office of Epizoonties) 19(2),544 Ờ 564.
Schat., K.A., và Nair., V.(2008.) MarekỖs disease. Trong: Ộ Diseases of Poultry Ợ (Y. M. saif, ed.),pp. 452 -511.Blackwell publishing.
Witter, R. L., Gimeno, I. M., Pandiri, A. R., & Fadly, A. M. (2010). Tumor diagnosis manual: the differential diagnsis of lymphoid and myeloid tumors in the chicken. American Association of Avian pathologists, 1 - 84
Yutaka Fujimoto, Michio Nakagawa, Kosuke Okada, Masaaki Okada and Kiyoshi Matsukawa (1971). Pathological studies of MarekỖs disease I the
histopathology on field cases in Japan, Deparment of ComparatiỖue
Pathology, Faculty of Veterinary J, V!edicine, Hokkaido University, Sapporo, Japan.
Trực tuyến
Hỏi ựáp thông tin khoa học công nghệ: Bệnh Marek trên gà (http://www.cucthuy.gov.vn) (Truy cập ngày 25/9/2012 )
Gong Z, Zhang L, Wang J, Chen L, Shan H, Wang Z, Ma H.
(2012). Isolation and analysis of a very virulent Marek's disease virus strain in China. ( http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/23687964)
(Truy cập ngày 5/9/2013)
Fadly, A. M. (2012). MarekỖs disease in poulptry.
(http://www.merckmanuals.com/vet/poultry/neoplasms/mareks disease in