4. Phương pháp tính toán và xử lý sô lieơu
1.2. Chuaơn bị beơ ương
1.2.1. Veơ sinh beơ ương
Các beơ trước khi đưa vào ương nuođi được chà rửa sách baỉng xà phòng, sau đó đeơ khođ roăi quét dung dịch Extrachlor + Virkon-A 10.000 ppm (hoà 100 gam moêi lối vào 10 lít nước). Đeơ như vaơy trong 24 giờ roăi chà rửa lái cho sách.
1.2.1. Chuaơn bị nước và phúc hoăi mođi trường
Sau khi đã chuaơn bị beơ xong tiên hành câp nước vào beơ khoạng 80cm, nước dùng đeơ ương nuođi âu trùng là nước đã xử lý và được lĩc qua túi sieđu lĩc.
Nước khi đã câp đụ được cho theđm EDTA lieău lượng 4 ppm, Iot 1 ppm, Mazo 5 ppm đeơ phúc hoăi lái mođi trường.
Trước khi thạ âu trùng vào beơ kieơm tra các yêu tô mođi trường: đoơ maịn, nhieơt đoơ, pH, đoơ kieăm.
1.3. Các yêu tô mođi trường trong quá trình ương nuođi
Các yêu tô mođi trường có ạnh hưởng rât lớn đên sự sinh trưởng và phát trieơn cụa thụy sinh vaơt, đaịc bieơt là hai yêu tô nhieơt đoơ và đoơ maịn. Nhieơt đoơ ạnh hưởng đên tôc đoơ cụa hai quá trình hâp thú thức aín và trao đoơi chât, còn đoơ maịn ạnh hưởng đên khạ naíng trao đoơi chât đaịc bieơt là áp suât thaơm thâu. Trong quá trình ương nuođi chúng tođi đã tiên hành đo moơt sô yêu tô mođi trường: nhieơt đoơ đo hàng ngày (vào lúc 7h sáng và 14 giờ chieău ), các yêu tô pH, đoơ kieăm, NH3 đo trước và sau khi xiphon thay nước (8 giờ sáng và 14 giờ chieău). Kêt quạ theo dõi được theơ hieơn trong bạng 2.
Từ các kêt quạ ở bạng 2 có theơ thây các yêu tô mođi trường trong quá trình ương nuođi đeău naỉm trong giới hán thích hợp cho sự sinh trưởng và phát trieơn cụa âu trùng. Các beơ được đaịt trong nhà có mái che neđn nhieơt đoơ luođn oơn định trong khoạng 26.5÷28.5 và pH 7.9÷8.3. Heasman (1983) nhaơn thây âu trùng Zoea thích hợp ở nhieơt đoơ 27oC, pH 8.0÷8.3, khi nhieơt đoơ giạm xuông dưới 20oC thì tỷ leơ baĩt được moăi cụa âu trùng giạm, ở nhieơt đoơ 19÷23oC tât cạ các âu trùng đeău chêt ở giai đốn Zoea 3 [9]. Theo Nguyeên Cơ Thách (2000) âu trùng Zoea thích hợp với đieău kieơn nhieơt đoơ 28÷30oC, đoơ maịn 30÷35‰, pH 8.0÷8.6 [2].
Trong quá trình ương nuođi oxy được cung câp đaăy đụ thođng qua vieơc súc khí lieđn túc. Hàm lượng NH3 thực tê tương đôi cao, có khi leđn đên 0.15 mg/lít, nguyeđn nhađn là do sô lượng âu trùng chêt nhieău, lượng thức aín dư thừa phađn huỷ. Tuy nhieđn âu trùng Zoea có khạ naíng chịu dựng tương đôi với mức đoơ nitơ khođng thích hợp khá cao. Theo Trương Trĩng Nghĩa ở Vieơt Nam âu trùng Zoea loài S. paramamosain sông khá tôt ở
noăng đoơ NH3-N 5mg/lít trong những heơ thông nuođi tuaăn hoàn [13].
1.4. Maơt đoơ ương nuođi
Maơt đoơ âu trùng Zoea ương nuođi là 200÷250 con/lít.
AÂu trùng Zoea sau khi nở khoạng 30 phút tiên hành taĩt súc khí 3÷5 phút roăi dùng vợt vớt những âu trùng khỏe noơi tređn maịt.
1.5. Các lối thức aín và chê đoơ cho aín 1.5.1. Các lối thức aín 1.5.1. Các lối thức aín
Trong quá trình ương nuođi âu trùng sử dúng các lối thức aín: - Thức aín toơng hợp, thành phaăn goăm:
Yêu tô mođi
trường Nhieơt đoơ oC Đoơ maịn ‰ PH Đoơ kieăm NHmg/lít 3 thực tê Giá trị 26.5÷28.5 29÷31 7.9÷8.3 130÷150 0.03÷0.15
+ Lansy ZM: 30% + APo: 20% + Frippark 1: 40% + Nutrimix: 5% + Immuzin: 5%
Thức aín toơng hợp khi sử dúng cà qua vợt gas 100
- Ez-larva: thức aín dáng lỏng (cođng ty ZEIGLE Hoa Kì).
- Artemia bung dù và Nauplius cụa Artemia: được âp từ trứng bào xác cụa Artemia Vĩnh Chađu-Sóc Traíng ( có kích cỡ nhỏ).
+ Artemia bung dù âp trong thời gian 12 giờ, nhieơt đoơ 26÷28.5oC, đoơ maịn 31±1‰.
+ Nauplius cụa Artemia âp trong thời gian 20 giờ.
1.5.2. Chê đoơ cho aín
Thức aín được cho aín theo giạn đoă:
Giai đốn phát trieơn cụa âu trùng Lối thức aín
Z1 Z2 Z3 Z4 Z5 M
Thức aín toơng hợp+Ez-larva
Artemia bung dù
Nauplius cụa Artemia
- Thời gian cho aín: hàng ngày cho âu trùng aín 4 laăn với các lối thức aín tương ứng như sau: 6 giờ, 18 giờ: cho aín Artemia
- Lieău lượng thức aín sử dúng:
+ Artemia cho aín 3 gam (trứng bào xác)/beơ/ngày, duy trì maơt đoơ
từ 10÷15 con/ml
+ Ez-larva cho aín 0,5ml/beơ/ngày sau đó taíng leđn 1 ml + Thức aín toơng hợp cho 12g/beơ/ngày
Nhaơn xét: ƠÛ trái trong quá trình ương nuođi âu trùng do khođng chuaơn bị được Luađn trùng (Brachionus) neđn đã thử nghieơm thay thê Luađn trùng baỉng thức aín toơng hợp và Ez-larva, đađy là những lối thức aín có saün và chụ đoơng hơn so với Luađn trùng. Tuy nhieđn hieơu quạ cụa vieơc sử dúng các lối thức aín này thâp, âu trùng haău như khođng aín hoaịc ít aín. ƠÛ giai đốn Zoea 1 và đaău giai đốn Zoea 2
Artemia có kích thước lớn vì vaơy làm hán chê khạ naíng baĩt moăi cụa âu trùng
Zoea.
Ong (1964) chư sử dúng Artemia làm thức aín cho âu trùng trong suôt thời gian ương nuođi, ođng nhaơn thây âu trùng Artemia dường như là quá to và bơi loơi quá nhanh đôi với âu trùng cua neđn âu trùng khó baĩt được moăi [9].
Theo Nguyeên Cơ Thách và ctv (2000) trong cùng moơt giai đốn phát trieơn cụa âu trùng các lối thức aín khác nhau có ạnh hưởng đên tỷ leơ sông cụa âu trùng. Luađn trùng là lối thức aín rât phù hợp ở giai đốn Zoea 1 và đaău giai đốn Zoea 2, nhưng khođng phù hợp ở các giai đốn kê tiêp. Nauplius cụa Artemia cho aín ở giai đốn Zoea 2 đên đaău Zoea 4, Artemia cho aín từ đaău Zoea 4 đên hêt Zoea 5, tạo cho aín từ đaău đên
cuôi giai đốn Zoea 2. Sự phôi hợp 3 lối thức aín: Luađn trùng, Artemia, tạo cho tỷ leơ
sông cao nhât [2].
1.6. Quạn lý và chaím sóc
Vào những ngày đaău cụa giai đốn Zoea 1 âu trùng chêt rât nhieău (khoạng 90%) vì vaơy phại xiphon lối bỏ những con chêt tránh ođ nhieêm mođi trường nuođi. Cuôi giai đốn Zoea 1 tiên hành xiphon đáy.
Từ giai đốn Zoea 2 trở đi cứ hai ngày xiphon đáy 1 laăn đeơ lối bỏ xác âu trùng và thức aín thừa. Trong giai đốn Zoea khođng thay nước, sau moêi laăn xiphon câp theđm nước mới cho baỉng lượng nước ban đaău đoăng thời giạm bớt đoơ maịn.
Thường xuyeđn theo dõi các yêu tô mođi trường đeơ có bieơn pháp xử lý kịp thời khi mođi trường có những biên đoơng xâu.
1.7. Kêt quạ
Bạng 3: Tỷ leơ sông cụa âu trùng ở các beơ ương
Bạng 4: Thời gian loơt xác chuyeơn giai đốn cụa âu trùng ở các beơ ương
Từ hai bạng 3 và 4 có theơ thây tỷ leơ sông cụa âu trùng trong các beơ ương thâp (đên giai đốn Zoea 4 cao nhât là 3,5%) thời gian loơt xác chuyeơn giai đốn tương đôi dài (đên giai đốn Zoea 4 mât 373 giờ (15.5 ngày)), tât cạ âu trùng ở các beơ ương đeău khođng chuyeơn qua giai đốn Zoea 5. Nguyeđn nhađn có theơ là do vieơc sử dúng thức aín toơng hợp và Ez-larva ở giai đốn Zoea1 và đaău giai đốn Zoea 2 là chưa phù hợp, đoăng thời vieơc duy trì đúng maơt đoơ Artemia (10÷15 con/lít) là rât khó đeơ thực hieơn chính xác.
ƠÛ giai đốn Zoea 1 và đaău giai đốn Zoea 2 theo moơt sô tác giạ như: Nguyeên Cơ Thách, 2000; Trương Trĩng Nghĩa,2004; Li et al., 1999; Mainn et al., 1999;
Các giai đốn phát trieơn cụa âu trùng Beơ TL sông Z1 Z2 Z3 Z4 Z5 1 2 3 4 TLS% TLS% TLS% TLS% 100 100 100 100 11.5 8.5 6 9 5.7 4.6 4 5 3.5 3 2.5 3.2 0 0 0 0
Các giai đốn phát trieơn cụa âu trùng
Z1 Z2 Z3 Z4
Thời gian
(giờ) 150 115 108 Khođng chuyeơn
(Brachionus). Trong khi ở trái đã thay thê Luađn trùng baỉng thức aín toơng hợp và Ez- larva.
Nguyeên Cơ Thách và ctv (2000) cho raỉng âu trùng khođng loơt xác chuyeơn tiêp giai đốn có theơ là do cơ theơ quy náp thức aín từ beđn ngoài khođng đụ dăn đên khođng tích luỹ đụ chât dinh dưỡng caăn thiêt cho quá trình hình thành neđn vỏ giáp, làm ngừng treơ quá trình sinh trưởng phát trieơn, ạnh hưởng đên tỷ leơ sông.
2. Ạnh hưởng cụa đoơ maịn đên tỷ leơ sông cụa âu trùng Zoea
Đoơ maịn là moơt trong những yêu tô mođi trường ạnh hưởng đên sự phađn bô và hốt đoơng cụa các giai đốn âu trùng cua. Tuy nhieđn tuỳ từng giai đốn mà ạnh hưởng cụa đoơ maịn leđn sinh trưởng, phát trieơn cũng như tỷ leơ sông cụa âu trùng là khác nhau. Đeơ theo dõi ạnh hưởng cụa đoơ maịn leđn tỷ leơ sông cụa âu trùng Zoea cua Xanh chúng tođi bô trí ở 4 thang đoơ maịn: 20, 25, 30 và 35‰.
AÂu trùng Zoea mới nở được đưa vào các xođ thí nghieơm có theơ tích 50 lít, chứa 40 lít nước bieơn có đoơ maịn theo yeđu caău, maơt đoơ âu trùng Zoea thí nghieơm là 100 con/lít.
Thức aín sử dúng cho âu trùng Zoea là Luađn trùng (Brachionus plicatilis),
Artemia bung dù và Nauplius cụa Artemia, tạo Nannochloropsis oculata được sử dúng
theo giạn đoă như sau:
Các lối thức aín được duy trì với maơt đoơ như sau:
Lối thức aín Maơt đoơ
Giai đốn phát trieơn cụa âu trùng Lối thức aín
Z1 Z2 Z3 Z4 Z5 M
Luađn trùng (Brachionus)
Artemia bung dù
Nauplius cụa Artemia Tạo Nannochloropsis
Luađn trùng
Artemia bung dù và Nauplius cụa Artemia
Tạo Nannochloropsis oculata
15÷20 con/ml 10÷15 con/ml 104 tb/ml Hàng ngày cho âu trùng aín 2 laăn vào 6 giờ sáng và 18 giờ chieău.
Lượng thức aín thay đoơi tuỳ theo maơt đoơ và nhu caău cụa âu trùng. Cuôi giai đốn Zoea 1 xiphon thay 20% lượng nước, từ giai đốn Zoea 2 trở đi cứ 2 ngày xiphon 1 laăn cho đên hêt giai đốn Zoea.
Đoơ maịn được đieău chưnh theo yeđu caău trong suôt thời gian thí nghieơm. Moơt sô yêu tô mođi trường khác trong quá trình thí nghieơm như sau:
Bạng 5: Moơt sô yêu tô mođi trường trong các xođ thí nghieơm
Kêt quạ tređn cho thây các thođng sô chât lượng nước giao đoơng khođng quá lớn và phù hợp với sự sinh trưởng cụa âu trùng. Maịc dù đã thực hieơn khá đaăy đụ các khađu quạn lý và chaím sóc nhưng ở cạ 3 lođ thí nghieơm tỷ leơ sông cụa âu trùng tương đôi thâp, ở hai lođ thí nghieơm sau âu trùng khođng phát trieơn đên giai đốn Megalops được. Kêt quạ thu được veă tỷ leơ sông cụa âu trùng được theơ hieơn qua bạng 6.
Bạng 6: Tỷ leơ sông cụa âu trùng Zoae ở các đoơ maịn khác nhau. (Sô lieơu trình bày là giá trị trung bình ± sai sô chuaơn (S.E.)).
Yêu tô mođi trường
Nhieơt đoơ
oC
pH Đoơ kieăm NH3 thực tê mg/l Giá trị 26÷28.5 8.0÷8.4 135÷150 0.02÷0.1
Các giai đốn phát trieơn cụa âu trùng Đoơ maịn ‰ Tỷ leơ sông % Z1 Z2 Z3 Z4 Z5 M 20 25 30 35 % % % % 100±0 100±0 100±0 100±0 18.04±2.61 22.93±2.28 34.43±2.1 28.23±2.61 4.13±0.37 6±0.44 13.83±1.17 10.63±0.52 0 2.1±1.05 6.87±1.09 4.4±0.42 0 0 1.53±0.77 0.27±0.27 0 0 0.2÷0.2 0
Từ kêt quạ thu được ở bạng 6 có theơ thây ở cạ 4 thang đoơ maịn tỷ leơ sông cụa âu trùng thâp và giạm nhanh theo các giai đốn phát trieơn nguyeđn nhađn có theơ là do vieơc chưa cung câp đúng maơt đoơ Luađn trùng (15÷20 con/lít) và Artemia (10÷15 con/lít). Ngoài ra có theơ do ở giai đốn Zoea 1 và đaău Zoea 2 cho âu trùng aín Luađn trùng chưa được làm giàu vì vaơy chưa cung câp đụ nhu caău dinh dưỡng cho âu trùng. ƠÛ Vieơt Nam, theo Trương Trĩng Nghĩa làm giàu thức aín (Luađn trùng và Artemia) baỉng nhũ tương có chứa 30% n-3 HUFA ( EPA: Eicosapentaenoic acid 20:5n-3 (taíng tỷ leơ sông), DHA: Docosahexaenoic acid 22:6n-3 (cại thieơn chât lượng và sự phát trieơn)) sẽ có tác dúng làm taíng tỷ leơ sông cụa âu trùng Zoea cua Xanh Scylla paramamosain [13].
ƠÛ 2 thang đoơ maịn 20‰ và 25‰ tỷ leơ sông rât thâp và mức đoơ giạm theo giai đốn càng rõ reơt. ƠÛ đoơ maịn 20‰ tỷ leơ sông giạm từ 18.04% ở giai đốn Zoea 2 xuông còn 4.13% ở giai đốn Zoea 3 và khođng chuyeơn qua giai đốn Zoae 4. ƠÛ đoơ maịn 25‰ tỷ leơ sông cụa âu trùng ở giai đốn Zoae 2 là 22.93% sang đên giai đốn Zoea 4 chư còn 0.73% và khođng chuyeơn qua giai đốn Zoae 5. Đieău này cho thây đoơ maịn 20‰ và 25‰ khođng thích hợp cho âu trùng Zoae. Kêt quạ này cũng tương đôi phù hợp với kêt luaơn cụa Hill (1974) âu trùng Zoea khođng thích hợp với đieău kieơn mođi trường ở vùng cửa sođng [9]. Theo Nguyeên Cơ Thách âu trùng Zoea khođng phát trieơn được ở đoơ maịn dưới 20‰, hieơn tượng chêt cụa âu trùng Zoae ở đoơ maịn khođng thích hợp có theơ do cơ theơ khođng có khạ naíng tự đieău khieơn áp suât thaơm thâu giữa mođi trường trong và ngoài tê bào gađy neđn hieơn tượng ưu trương hoaịc nhược trương làm teo hoaịc vỡ màng tê bào [2].
ƠÛ đoơ maịn 30‰ trong cạ 3 lođ thí nghieơm âu trùng có tỷ leơ sông cao nhât, trung bình là 34.43% ở giai đốn Zoea 2. Đaịc bieơt ở đoơ maịn này âu trùng Zoea đã loơt xác và chuyeơn sang giai đốn Megalops được, đieău này chứng tỏ đoơ maịn 30‰ là thích hợp cho âu trùng Zoea sinh trưởng và phát trieơn.
ƠÛ đoơ maịn 35‰ âu trùng có tỷ leơ sông khá cao, trong thí nghieơm ở giai đốn Zoae 2 là 28.23% tuy nhieđn âu trùng khođng loơt xác chuyeơn sang giai đốn Megalops. Vì
vaơy có theơ đoơ maịn này chư thích hợp với các giai đốn đaău cụa âu trùng Zoea, đên cuôi giai đốn Zoea thì đoơ maịn này khođng còn thích hợp.
0 20 40 60 80 100 120 1 2 3 4 5 6 20‰ 25‰ 30‰ 35‰
Hình 2: Đoă thị tỷ leơ sông cụa âu trùng Zoea ở các đoơ maịn khác nhau
Từ đoă thị có theơ thây tỷ leơ sông cụa âu trùng giạm rât nhanh từ giai đốn Zoea 1 sang Zoea 2 và từ giai đốn Zoea 2 sang Zoea 3 ở cạ 4 thang đoơ maịn. ƠÛ đoơ maịn 30‰ đường tỷ leơ sông là cao nhât và kéo dài đên giai đốn Megalops, nghĩa là âu trùng có tỷ leơ sông cao nhât và phát trieơn được đên giai đốn Megalops. Khi so sánh tỷ leơ sông cụa âu trùng Zoae theo các thang đoơ maịn ta được thứ tự: 30‰ > 35‰ > 25‰ > 20‰, đieău này cho thây sự phù hợp với vòng đời phát trieơn cụa cua bieơn ngoài tự nhieđn âu trùng Zoea sông trođi noơi ở vùng ven bờ nhờ dòng nước đưa daăn vào phía trong. Theo Chao Shu Zeng sự chịu đựng veă đoơ maịn cụa âu trùng Zoea có sự thay đoơi, từ giai đốn Zoea 1 đên Zoea 3 là 27÷35‰, từ giai đốn Zoea 4 đên Megalops là 25÷31‰.
Đoơ maịn có ạnh hưởng rât lớn đên tỷ leơ sông cụa âu trùng, ngoài ra nó còn ạnh hưởng đên thời gian loơt xác chuyeơn giai đốn. Trong khi nghieđn cứu ạnh hưởng cụa đoơ
Z1 Z2 Z3 Z4 Z5 M Giai đốn âu trùng Tỷ leơ sông %
Trong thí nghieơm thời gian loơt xác chuyeơn giai đốn cụa âu trùng ở các thang đoơ maịn khác nhau được theơ hieơn trong bạng 7.
Bạng 7: Thời gian loơt xác chuyeơn giai đốn cụa âu trùng Zoea ở các đoơ maịn khác nhau
Thời gian loơt xác chuyeơn giai đốn có vai trò rât quan trĩng, trong sạn xuât vieơc rút ngaĩn thời gian chuyeơn giai đốn sẽ góp phaăn giạm lượng thức aín, tránh âu trùng tiêp xúc với maăm beơnh.
Từ bạng 7 có theơ thây ở đoơ maịn 20, 25‰ âu trùng chư phát trieơn được trong vài ngày đaău, sau đó sẽ chêt toàn boơ ở giai đốn Zoea 3 và Zoea 4. ƠÛ đoơ maịn 35‰ âu trùng chư phát trieơn đên giai đốn Zoea 5 mà khođng loơt xác chuyeơn sang giai đốn Megalops được. ƠÛ đoơ maịn 30‰ âu trùng phát trieơn tôt, sau 503 giờ (19.7 ngày) thì âu trùng chuyeơn sang Megalops.
Như vaơy ở khoạng đoơ muôi 30‰ là thích hợp nhât cho sự sinh trưởng và phát trieơn cụa âu trùng Zoea cua bieơn. ƠÛ khoạng đoơ muôi này âu trùng có tỷ leơ sông cao nhât và thời gian loơt xác chuyeơn giai đốn ngaĩn nhât.
3. Ạnh hưởng cụa maơt đoơ ương nuođi đên tỷ leơ sông cụa âu trùng Zoea
Đoơ maịn (‰) Giai đốn âu trùng Thời gian (giờ) 20‰ 25‰ 30‰ 35‰ Z1