58
4.3.1.3. Lưu trữ hố chất và vật liệu sử dụng trong thí nghiệm
Tất cả vật liệu và hoá chất sử dụng trong thử nghiệm đều được lưu trữ trong tủ lạnh và tránh ánh sáng. Lưu ý trước khi sử dụng phải đưa nước ngọt tiêu chuẩn về nhiệt độ phòng
4.3.1.4. Làm thoáng nước sử dụng trong thử nghiệm
Nước ngọt tiêu chuẩn sử dụng trong thử nghiệm cần phải được làm thống bằng cách sục khí ít nhất là 15 phút trước khi sử dụng. Nước đã sục khí được sử dụng cho cho quá trình ấp trứng và pha lỗng nước thải (độc chất). Q trình sục khí có thể thực hiện bằng máy bơm khơng khí sử dụng cho hồ cá
4.3.1.5. Ấp sinh vật chỉ thị sử dụng trong thử nghiệm
Việc tiến hành ấp trứng cần phải thực hiện trước khi thực hiện thử nghiệm ít nhất 72 giờ Cách tiến hành:
- Chuyển toàn bộ trứng (ephippia) trong lọ trứng vào phễu lọc. - Rửa sạch trứng bằng nước máy để loại bỏ tất cả môi trường lưu trữ.
- Chuyển trứng đã rửa sạch vào đĩa petri 10 cm có chứa 50 ml nước ngọt tiêu chuẩn đã làm thoáng
- Đậy nắp hộp lồng petri và ủ 72h, ở nhiệt độ 20-22°C trong điều kiện chiếu sáng liên tục với cường độ sáng tối thiểu là 6000 lux (Nguồn sáng đặt phía trên hộp lồng petri).
Lưu ý:
Sự phát triển phôi mất khoảng 3 ngày (72 giờ) trong điều kiện tối ưu ánh sáng 6.000 lux và nhiệt độ 20-22°C. Trong điều kiện này các con non có thể nở trước 72h nhưng tỉ lệ nở lớn nhất sẽ xảy ra trong thời gian từ 72h đến 80h. Thử nghiệm cần tối thiểu 120 con non có tuổi khơng lớn hơn 24h sẽ cho kết quả chính xác nhất. Vì thế chúng ta nên tiến hành thử nghiệm (cho sinh vật thử nghiệm phơi nhiễm với độc tố) vào giờ thứ 90 kể từ lúc ủ.
59