2.4. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4.2. Cỡ mẫu và phương pháp chọn mẫu
2.4.2.1. Điều tra sàng lọc
*Cỡ mẫu cho điều tra sàng lọc:
Cỡ mẫu nghiên cứu dựa theo công thức sau đây [9]:
n = z
2 p (1 − p )
e
2
N: cỡ mẫu (học sinh tiểu học 7-10 tuổi cần điều tra) Với độ tin cậy 95% thì Z = 1,96 (Z ≈ 2)
p: tỉ lệ thiếu máu ở lứa tuổi này ở vùng nông thôn là 30% . e: sai số phép đo 0,04 (4%)
Thay vào cơng thức trên ta có:
0,3 x 0,7 N = 4 x ------------- = 525
0,042
Vì lấy mẫu chùm nên cỡ mẫu được nhân với 1,5 để kết quả nghiên cứu được tin cậy hơn. Như vậy, tổng số trẻ cần nghiên cứu là: 800 học sinh tiểu học 7-10 tuổi.
*Phương pháp chọn mẫu cho điều tra sàng lọc
Huyện Phổ Yên, tỉnh Thái Nguyên có 15 xã và 03 thị trấn, trong đó có 6 xã miền núi. Các xã miền núi là những xã có điều kiện kinh tế thấp hơn so với các xã còn lại trong huyện. Do khuôn khổ của nghiên cứu và khả năng nguồn lực có hạn, tiến hành bắt thăm chọn ra 2 trong số 6 xã miền núi để đưa vào nghiên cứu. Trong 2 xã được chọn, mỗi xã có 3 trường tiểu học. Tại mỗi xã, tiến hành bắt thăm chọn ra 2 trong số 3 trường tiểu học để đưa vào nghiên cứu. Tại các trường đã được chọn, tất cả các học sinh đủ điều kiện được lựa chọn vào điều tra sàng lọc.
2.4.2.2. Nghiên cứu can thiệp
*Cỡ mẫu cho nghiên cứu can thiệp
Áp dụng công thức của Hassard, 1991 [50]:
⎡ (Z + 2Z )σ ⎤n = 2 x ⎢ ⎢ ⎣ α β ⎥ μ 1 −μ 2 ⎥ ⎦ Trong đó :Z α
: với độ tin cậy của nghiên cứu đạt được 95%, α=0,05 thì Z
α
=1,96
Zβ: Với lực nghiên cứu là 90% thì Zβ = 1,28
δ: Độ lệch chuẩn ước lượng dựa vào nghiên cứu trước
μ1-μ2: Chênh lệch trung bình mong muốn theo các chỉ số giữa hai nhóm nghiên cứu sau can thiệp.
- Cỡ mẫu ước tính theo nồng độ Hb:
cỡ mẫu được ước tính dựa vào sự khác biệt về
nồng độ Hb giữa các nhóm tại thời điểm sau can thiệp:
- Với các chỉ số như sau:
μ1-μ2: chênh lệch Hb trung bình mong muốn sau và trước can thiệp (ước tính
4,6 g/L).
δ độ lệch chuẩn trước và sau can thiệp: 8 g/L [12].
- Theo cơng thức nêu trên ta có cỡ mẫu như sau:
2 ⎡ (1, 96 +1, 28) x8, 0 ⎤ n = 2 x ⎢ ⎥ ⎣ 4, 6 ⎦ n = 64 Cỡ mẫu ước tính là 64 + (15% dự
phịng bỏ cuộc) = 75 học sinh tiểu học 7-10 tuổi /
một nhóm.
Cỡ mẫu ước tính theo nồng độ selen huyết thanh: Với mong muốn sự khác biệt cho 2
giá trị trung bình. Dựa vào các nghiên cứu trước đây [15] và ước tính sự khác biệt cuối can thiệp về nồng độ selen huyết thanh giữa nhóm can thiệp và nhóm chứng
là 10 μg/L, với SD = 13,6 μg/L số trẻ cho
mỗi nhóm là n=39 trẻ/nhóm; dự phòng 15%
trẻ bỏ cuộc trong thời gian can thiệp, 45
trẻ/nhóm.
Cỡ mẫu cho các chỉ số nhân trắc: Khi
ước tính cỡ mẫu cho khác biệt của giá trị HAZ (Heigh for Age Z-Score) giữa nhóm can thiệp và nhóm chứng với mong muốn sự khác biệt cho 2 giá trị trung bình. Với chọn lựa dựa vào nghiên cứu trước đây [28]:
μ 1
-μ 2 =
0,34, SD=0,22 tính được n=50 trẻ/nhóm; dự phịng 15% trẻ bỏ cuộc trong thời
gian can thiệp, 58 trẻ/nhóm.
Kết hợp các chỉ số trên: nghiên cứu này có 4 nhóm: nhóm chứng, nhóm sắt, nhóm selen và sắt - selen. Chọn 75 trẻ/nhóm thử nghiệm can thiệp x 04 nhóm = 300 trẻ em bị thiếu máu tham gia vào nghiên cứu can thiệp này.
*Phương pháp chọn mẫu cho nghiên cứu can thiệp
Tại 4 trường tiểu học, tiến hành chọn các trẻ em bị thiếu máu (Hb<115 g/L) đã được xác định từ điều tra sàng lọc, thoả mãn các điều kiện theo tiêu chí lựa chọn tại mục 2.1 để tham gia vào nghiên cứu can thiệp. Trường tiểu học được chọn ngẫu nhiên vào 1 trong 4 nhóm, kết quả sau khi bắt thăm phân nhóm như sau:
- Nhóm bổ sung sắt: gồm các học sinh 7-10 tuổi thiếu máu của trường tiểu học
Phúc Thuận 1 (gọi là nhóm sắt).
- Nhóm bổ sung selen: gồm các học sinh 7-10 tuổi thiếu máu của trường tiểu học Thành Cơng 1(gọi là nhóm selen).
- Nhóm bổ sung kết hợp sắt với selen: gồm các học sinh 7-10 tuổi thiếu máu của trường tiểu học Thành Cơng 2 (gọi là nhóm sắt - selen).
- Nhóm chứng: sử dụng viên placebo (không chứa sắt và selen): gồm các học sinh
7-10 tuổi thiếu máu của trường tiểu học Phúc Thuận 2 (gọi là nhóm chứng).
Nhóm bổ sung sắt: bổ sung 10 mg sắt nguyên tố dạng FeNaEDTA/ngày; Nhóm bổ sung selen: bổ sung 40 µg selen ngun tố dạng selenomethionine/ngày; Nhóm bổ sung sắt - selen: bổ sung 10 mg sắt và 40 µg selen/ngày; Nhóm chứng (Placebo) sử
dụng viên placebo khơng chứa sắt và selen; được trình bày như sau:
Thành phần Nhóm chứng Nhóm sắt Nhóm selen Nhóm sắt - selen Iron (mg) 0 1 0 0 10 Selen (μg) 0 0 4 0 40
Thời gian bổ sung là 5 ngày/tuần trong 6 tháng.
Sản xuất các chế phẩm bổ sung phục vụ nghiên cứu
Các loại chế phẩm bổ sung vi chất dinh dưỡng và placebo nói trên được sản xuất dưới dạng viên nang theo đơn đặt hàng của nhóm nghiên cứu bởi Công ty cổ phần
hỗ trợ phát triển công nghệ Detech (Detech Technology Development Supporting Joint Stock Company - Detech, JSC) - 8 Tơn Thất Thuyết, Mỹ Đình, Từ Liêm, Hà Nội. Các chế phẩm bổ sung có hình thức tương tự nhau, được đóng gói dưới dạng viên nang, nhưng có những màu sắc khác nhau để dễ phân biệt và tránh nhầm lẫn. Sau khi sản xuất được đóng gói vào lọ, mỗi lọ chứa 60 viên khác nhau về nhãn mác trên lọ đánh dấu theo A, B, C, D. Việc sản xuất thực phẩm bổ sung sẽ được tiến hành dưới sự giám sát của cán bộ nghiên cứu.
Các loại chế phẩm bổ sung sau khi sản xuất được kiểm nghiệm hàm lượng vi chất và tính an tồn tại Labo của Viện Kiểm nghiệm an toàn vệ sinh thực phẩm quốc gia (Phụ lục kèm theo).