Các thông số đƣợc cài đặt cho máy:
Nhiệt độ sấy: 1050 C
Thời gian sấy: 0.0 min (ở chế độ mặc định, máy sẽ cho kết quả khi khối lƣợng mẫu khơng đổi trong 60 giây)
Thí nghiệm đƣợc thực hiện 2 - 3 lần. Độ ẩm trung bình đƣợc xác định bằng cách lấy kết quả trung bình của các lần thí nghiệm.
n w w n i i 1
2.2.1.3 Nhận danh các nhóm họat chất theo phương pháp phân tích sơ bộ thành phần hóa thực vật (dùng phản ứng màu)
a, Nguyên tắc
Tách các hợp chất hữu cơ thành các nhóm khác nhau dựa vào độ hòa tan khác nhau của chúng trong các dung mơi hữu cơ có tính phân cực khác nhau, sau đó mỗi nhóm sẽ đƣợc phát hiện bằng các thuốc thử hoặc phản ứng đặc trƣng của từng hợp chất
b, Nguyên liệu
Nguyên liệu khảo sát ở đây là cánh hoa hồng vàng, cam, trắng, hồng và đỏ đƣợc cắt nhỏ.
c, Hóa chất
Diethyl ether, NaOH, H2SO4, HCl, cồn 960
, NaCOOCH3, FeCl3, NH4OH. d, Cách thức tiến hành
Cánh hoa hồng đƣợc đem chiết tách với diethyl ether. Dịch Et2O thu đƣợc cho vào phễu chiết, dùng NaOH để phân bố thành 2 lớp: lớp Et2O và lớp kiềm.
Lớp Et2O: rửa nƣớc và trung hòa bằng H2SO4. Nhỏ vài giọt H2SO4 đđ vào, nếu dịch thu đƣợc có màu vàng => có Carotenoid
Lớp kiềm: trung hịa bằng HCl, sau đó khử hóa với bột Mg và HClđđ, nếu thu đƣợc dịch màu nâu => có Flavonol
Bã hoa sau khi chiết diethyl ether đem chiết nóng với cồn 960. Dịch thu đƣợc chia làm 3 phần:
Phần 1: pha lỗng với nƣớc, kiềm hóa bằng NH4OH, sau đó khử hóa bằng HCl và bột Mg, thu đƣợc dịch màu nâu => có Flavonol
Phần 2: pha lỗng với nƣớc, chia làm 2 phần. Phần 1: acid hóa với HCl => dịch màu đỏ Phần 2: kiềm hóa với NaOH => dịch màu lục
Phần 3: trung tính với NaCOOCH3, thêm FeCl3 thu đƣợc dịch xanh đen => có Tannin.
Bã hoa sau khi chiết cồn đƣợc chiết nóng với H2SO4 2%. Dịch sau chiết đƣợc trung tính bằng NaCOOCH3, nhỏ vài giọt FeCl3 thu đƣợc dịch xanh đen => có Tannin
2.2.2 Tách chiết, nhận danh các nhóm hoạt chất trong cánh hoa hồng và đánh giá hoạt tính kháng oxi hóa của cao tƣơng ứng với dịch chiết giá hoạt tính kháng oxi hóa của cao tƣơng ứng với dịch chiết
2.2.2.1 Quy trình tách riêng các họ chất trong hoa hồng để đánh giá hoạt tính kháng oxi hóa
a, Nguyên liệu
Nguyên liệu đƣợc sử dụng là cánh hoa hồng cam, vàng, trắng, hồng đỏ đƣợc cắt nhỏ.
b, Hóa chất và thiết bị Hóa chất
Petrol ether 60 – 90, diethyl ether, cồn 960 Thiết bị