Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2. Thực trạng kháng kháng kháng sinh của vi khuẩn gây bệnh tại 2 bệnh viện
2.2.2. Địa điểm nghiên cứu
Tại 2 khoa Xét nghiệm vi sinh của 2 bệnh viện đa khoa tuyến tỉnh đƣợc lựa chọn: Nuôi cấy, phân lập, định danh vi khuẩn.
Tại khoa Vi sinh bệnh viện Bạch Mai: Định danh lại và làm kháng sinh đồ.
2.2.3. Thời gian nghiên cứu:từ tháng 10/2012 đến tháng 10/2014.
Kết quảđịnh danh và kháng sinh đồ vi khuẩn là một phần số liệu của đề tài nhánh 1 thuộc đề tài cấp Nhà nƣớc “Nghiên cứu ứng dụng kỹ thuật sinh học phân tử xác định mức độ kháng kháng sinh của một số chủng vi khuẩn gây bệnh thƣờng gặp ở Việt Nam”. Mã số KC.10.18/11-15, thuộc chƣơng trình khoa học và cơng nghệ trọng điểm cấp Nhà nƣớc KC.10/11-15. Thời gian nghiên cứu từ tháng 10/2012 đến tháng 12/2015.
2.2.4. Phương pháp nghiên cứu
2.2.4.1. Thiết kế nghiên cứu:Nghiên cứu mô tả cắt ngang. Sơ đồ nghiên cứu:
2.2.4.2. Cỡ mẫu nghiên cứu và chọn mẫu
Cỡ mẫu nghiên cứu tỷ lệ kháng kháng sinh đƣợc tính theo cơng thức xác định mẫu cho một tỷ lệ [86]:
Trong đó:
n: Cỡ mẫu tối thiểu
Z2(1-/2): Hệ số tin cậy(ở mức 95%) = 1,96
d: Sai số tuyệt đối (d = 5%)
p: Tỷ lệ kháng kháng sinh ƣớc đoán cho nghiên cứu = 50% (Tỷ lệ
kháng kháng sinh của mỗi loại vi khuẩn là khác nhau và mỗi loại vi khuẩn cũng có tỷ lệ kháng khác nhau đối với mỗi loại kháng sinh). Theo tính tốn, cỡ mẫu nghiên cứu tối thiểu cho 2 bệnh viện là 385 chủng vi khuẩn thuộc 6 loài vi khuẩn đƣợc lựa chọn.
n = Z2(1-/2).p(1- p) d2 Chủng VK đã đƣợc định danh thu thập từ 2 BV đƣợc lựa chọn nghiên cứu
Khoa Vi sinh BV Bạch Mai định danh lại và làm KSĐ bằng máy tự
Chọn mẫu: Trong 2 năm, tại 2 bệnh viện đã định danh đƣợc 503 chủng vi khuẩn thuộc 6 loài vi khuẩn đƣợc chuyển an toàn đến bệnh viện Bạch Mai để định danh lại và làm kháng sinh đồ. Vậy cỡ mẫu nghiên cứu thực tế là 503 chủng vi khuẩn.
2.2.4.3. Phương pháp thu thập số liệu
- Tại 2 bệnh viện đƣợc lựa chọn nghiên cứu: Các mẫu bẹ nh phẩm đu ợc nuôi cấy thuờng quy trên các mơi truờng thích hợp, để tủ ấm 350C - 370C có
hoặc khơng có CO2 (tùy theo các căn nguyên nghi ngờ gây bệnh). Định danh vi khuẩn dựa vào hình thể, kích thƣớc, tính chất bắt màu gram, cách sắp xếp của vi khuẩn; dựa vào hình thái khuẩn lạc và các tính chất sinh vật hóa học.
- Các chủng vi khuẩn gây bệnh thƣờng gặp sau khi đƣợc các bệnh viện nghiên cứu định danh sẽ đƣợc bảo quản, vận chuyển tới khoa Vi sinh bệnh viện Bạch Mai để định danh lại và làm kháng sinh đồ trên máy định danh và kháng sinh đồ tự động VITEK 2 Compact.