Chƣơng 2 ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.8.Một số kỹ thuật xét nghiệm áp dụng trong nghiên cứu
2.2. Phương pháp nghiên cứu
2.2.8.Một số kỹ thuật xét nghiệm áp dụng trong nghiên cứu
Kỹ thuật ngưng kết cột gel sàng lọc, định danh KTBT [139],[140],[141].
- Kỹ thuật ngưng kết cột gel trên hệ thống máy bán tự động Matrix;
- Kỹ thuật ngưng kết cột gel trên hệ thống máy tự động Magister.
Nguyên lý của kỹ thuật ngưng kết cột gel:
Kỹ thuật ngưng kết cột gel dựa trên sự kết hợp của cả hai nguyên lý ngưng kết và lọc, đọc kết quả phản ứng sau khi cột gel được ly tâm bằng máy ly tâm chuyên dụng, cột gel này chứa đựng hạt gel và dung dịch NaCl 0,9% (cột gel nước muối 0,9%) hoặc cột gel có chứa các hạt gel, dung dịch liss và thuốc thử AHG (cột gel AHG) (Hình 2.6, 2.7 và 2.8).
Dung dịch hồng cầu được phân bố trong mỗi cột gel cùng với huyết thanh hoặc huyết tương. Cột gel được ủ hoặc ly tâm trực tiếp theo phương thức đã được định sẵn. Những tế bào hồng cầu không ngưng kết lọt qua các hạt gel và tập trung ở dưới đáy của cột gel sau khi ly tâm, trong khi những đám ngưng kết sẽ phân bố dọc theo chiều dài của cột gel tùy thuộc vào mức độ ngưng kết (Hình 2.8).
Hình 2.8. Nguyên lý của kỹ thuật ngưng kết cột gel
Hình 2.9. Các mức độ ngưng kết của kỹ thuật ngưng kết cột gel
Hạt gel
KT HC
Đánh giá các mức độ ngưng kết của kỹ thuật ngưng kết cột gel (Hình 2.9) [139]:
Không ngưng kết : Hồng cầu tự do l ng xuống đáy cột gel;
Ngưng kết 1+: Các đám hồng cầu ngưng kết tập trung chủ yếu ở 1/3 dưới của cột gel, nhiều hồng cầu tự do ở đáy cột gel;
Ngưng kết 2+: Các đám hồng cầu ngưng kết trải theo chiều dài 1/2 trên của cột gel, có khá nhiều hồng cầu tự do ở đáy cột gel; Ngưng kết 3+: Các đám hồng cầu ngưng kết tập trung chủ yếu ở
1/3 trên của cột gel, rất ít hồng cầu tự do ở đáy cột gel;
Ngưng kết 4+: Ngưng kết là một đám lớn tập trung trên bề mặt của cột gel, khơng cịn hồng cầu tự do ở đáy cột gel.
Kỹ thuật phản ứng hòa hợp ở 22°C, 37°C và AHG bằng phương pháp
ngưng kết cột gel [139],[140],[141],[142];
Kỹ thuật định lượng LDH và bilirubin gián tiếp trên hệ thống máy
phân tích sinh hóa tự động AU480, của Backman couter, Mỹ;
Kỹ thuật xét nghiệm tổng phân tích tế bào máu trên hệ thống máy
phân tích huyết học tự động 26 thông số DxH800 của Backman couter,
Mỹ;
Kỹ thuật ống nghiệm xác định các KN nhóm máu [140];
Kỹ thuật ngưng kết cột gel xác định các KN nhóm máu [140];