Trang thiết bị, vật liệu nghiên cứu

CHƢƠNG 1 : TỔNG QUAN TÀI LIỆU

2.2 Trang thiết bị, vật liệu nghiên cứu

2.2.1 Thiết bị

- Máy móc:

+ Tủ ấm 370C, tủ an tồn Sinh học cấp II, kính hiển vị

+ Máy Vortex (Biorad - Mỹ), máy ly tâm (Eppendorf - Đức), tủ tách chiết vô trùng (Anh), tủ đặt phản ứng PCR vô trùng (Anh), máy ủ nhiệt khô (Biorad - Mỹ), máy spin down (Labnet), máy Real – time PCR (Stratagene Mx3000P), máy nhiệt ủ lắc (Việt Á – Việt Nam).

+ Máy Laser CO2 45w model JZ3-30P LCD (Việt Nam) -Dụng cụ cho các xét nghiệm chẩn đoán STIs:

+ Bàn khám phụ khoa và đèn khám phụ khoa, mỏ vịt, kẹp, kéo mũi cong, bông, gạc vô trùng.

+ Que tăm bông, que gỗ Spatula, lam kính sạch, ống nghiệm vơ trùng, giá để mẫu, que cấy, đèn cồn.

+ Kim hút 16l, lọ hút, ống hút, phiến nhựa, micropipette các thể tích 10l, 25l, 75l, 190l, đĩa vi lƣợng có giếng đáy trịn.

- Dụng cụ dùng cho PCR:

+ Micropipettes (10μl, 200μl, 1000μl), đầu típ các loại, eppendorf các loại (Đức), hộp màng lai, nhíp y tế.

2.2.2 Hóa chất

- Hóa chất cho các xét nghiệm chẩn đoán STIs (nấm, trùng roi, vi khuẩn

Gardnerella vaginalis và các vi khuẩn kị khí khác, lậu cầu).

+ Nƣớc muối sinh lí + Bộ thuốc nhuộm Gram

- Sinh phẩm và hóa chất cho xét nghiệm huyết thanh giang mai

Kĩ thuật RPR (sử dụng bộ RPR 500 TEST KIT – Biorex Diagnostic Ltd – United Kingdom)

+ RPR Carbon antigen (Huyền dịch các hạt Carbon trung tính được bao phủ một phức hợp lipid, dịch có chứa Sodium azide 0,95gl)

+ Chứng dƣơng (Huyết thanh ngườicó chứa Sodium azide 0,95gl) + Chứng âm (Huyết thanh động vật có chứa Sodium azide 0,95gl) Các sinh phẩm đã đƣợc thử nghiệm cho kết quả âm tính với HBsAg và HIV, HCV, tuy nhiên trong quá trình thao tác cần thiết phải cẩn thận nhƣ các mẫu bệnh phẩm có khả năng lây nhiễm.

Hố chất bảo quản ở 2-8oC. Phiến nhựa và các ống hút bảo quản ở nhiệt độ phòng.

Kĩ thuật TPHA (sử dụng bộ TPHA 100 TEST KIT –

SPINREACT, S.ẠU – Tây Ban Nha)

+ TPHA Test cell (chứa hồng cầu có gắn kháng nguyên)

+ TPHA Control cell (chứa hồng cầu không gắn kháng nguyên) + Diluent (dung dịch pha loãng)

+ Chứng dƣơng, hiệu giá 1:2560 + Chứng âm

Các lọ sinh phẩm và hoá chất lƣu giữ ở nhiệt độ từ 2-8oC ở tƣ thể để đứng. Tất cả hoá chất sinh phẩm sử dụng ngay không phải pha chế. Test và

Control cell nên lắc trộn nhẹ nhàng và thật kỹ trƣớc khi sử dụng. Để ở nhiệt độ phòng trƣớc khi dùng.

- Sinh phẩm và hóa chất dùng cho PCR định tính HPV và định týp

* Dùng cho tách chiết DNA (iVApDNA Extraction Kit - VẠA92-002A -

50 tests/bộ và iVAbDNA Extraction Kit - VẠA92-002C - 50 tests/bộ do

công ty Cổ phần Công nghệ Việt Á sản xuất theo tiêu chuẩn ISO 9001:2008-ISO 13485:2003)

+ Dung dịch 1 (Trizol): phenol 38%, guanidium thyocianate 0,8M, glycerol 5%, chỉnh về pH 8.

+ Dung dịch 2: Chloroform

+ Dung dịch 3: Isopropanol tuyệt đối có chứa chất trợ tủa + Dung dịch 4: Ethanol 70%

+ Dung dịch 5: Dung dịch TE1X (tris 0,1 M – EDTA 0,001M)

Bộkit realtime PCR định tính HPV của cơng ty Cổ phần Công nghệ Việt Á (LightPower iVAHPV Genotype25 rPCR Kit (VẠA02-003M - 50 Tests/Bộ

(ISO 9001:2008 - ISO 13485:2003). Độ nhạy 102copy/ml, độ đặc hiệu 100%. Bộ mẫu đối chứng (Bảo quản nhiệt độ -200C) gồm:

- DNA chứng dƣơng : 100µl - Chứng âm : 1.5ml

- DNA chứng dƣơng, chứng âm có thể dùng cho bƣớc tách chiết hoặc PCR, mỗi lần dùng 5µl.

Bộ kit Reverse Dot Blot định kiểu gene HPV (LightPower iVAHPV

Genotype RDB Kit (VẠA02-003J - 20 Tests/Bộ) (Việt Á - ISO 9001:2008 -

ISO 13485:2003).

 Hoá chất dùng cho lai (Việt Á) (DB viết tắt của Dot Blot, đây chỉ là ký hiệu hóa chất trong kit) (ISO 9001:2008 - ISO 13485:2003).

+ ĐF: trộn DB2 và DB3 + Màng lai: nitrocellulose

2.2.3. Thuốc

Thuốc uống cimetidine (cimetidin STADA 400mg)

Thuốc đƣợc cấp phép lƣu hành tại Việt Nam số VISA: VD-9745-09)