Động vật thí nghiệm được sử dụng trong nghiên cứu này là chuột nhắt giống đực (Mus musculus var. albino) do Viện Pasteur Thành Phố Hồ Chí Minh cung cấp. Sau khi đưa về phịng thí nghiệm, chuột được ni thích nghi với mơi trường trong phịng thí nghiệm trong thời gian một tuần, cho đến khi trọng lượng đạt từ 30-35g/con. Mơi trường sống mới trong phịng thí nghiệm phải được trang bị đèn led tự động ngắt mở theo chu kỳ
Thành phần (g) Nhóm HF- H0 Nhóm LF- H0 Nhóm HF- H5A Nhóm LF- H5A Whey protein 20 14 20 14 Chất béo 30 4 30 4 Bột bắp (H0) 40 71,5 - - Tinh bột - - - - Bột bắp biến tính (H5A) - - 40 71,5 CMC (Carbxymethyl cellulose) 5 5 5 5 Vitamin và khoáng tổng hợp 4,5 5 4,5 5 Choline bitartrate 0,5 0,5 0,5 0,5 Tổng 100 100 100 100
28
12 giờ sáng và 12 giờ tối (thời gian đèn mở 06:00 – 18:00 giờ), độ ẩm 40 – 45%. Phòng được trang bị quạt hút và quạt điện để khơng khí được đối lưu, nhiệt độ phịng ln duy trì trong khoảng 29 ± 2 ℃.
Nước uống sử dụng là nước khoáng (Lavie), được cho vào các bình nước chuyên dụng. Để ngăn ngừa nguy cơ đuối nước do rò rỉ vào lồng đáy rắn, núm vú uống của hệ thống tưới nước tự động phải được đặt ngay bên ngoài lồng và kiểm tra núm vú thường xuyên.
Mức độ tin cậy của cỡ mẫu được tính theo cơng thức (Jaykaran Charan, 2013): E = Tổng số lượng động vật – Tổng số nhóm
Giá trị E nên nằm giữa 10 – 20. Nếu E < 10 thì cần tăng số lượng động vật nhằm thu được kết quả có độ tin cậy cao. Nếu E > 20 thì khơng cần tăng số lượng nữa, kết quả đạt có độ tin cậy cao. Phương pháp này áp dụng cho tất cả các thí nghiệm trên động vật (Jaykaran Charan, 2013). Trong thí nghiệm của chúng tơi, E = 35 - 5 = 30 >20 (tương đương 7 con/nhóm) nên kích cỡ mẫu đạt u cầu.
Ngoài ra, theo các nguyên tắc khi sử dụng động vật trong thử nghiệm được nêu ra bởi (Kolar, 2006), trong đó có nguyên tắc giảm số lượng động vật được sử dụng trong thí nghiệm nhưng vẫn có được thơng tin chính xác nhất định. Trong nghiên cứu của (Sousa, 2020) sử dụng mơ hình nghiên cứu sự ảnh hưởng của acid gallic trên tình trạng nhiễm mỡ gan và điều hịa các chuyển hóa lipid ở chuột béo phì với bốn nhóm chuột khảo sát mỗi nhóm (n= 6 con/nhóm). Do đó, việc xác định cỡ mẫu của chúng tơi trong nghiên cứu này là hoàn toàn phù hợp.