Vị trí #δC δCa,b DEPT δHa,cđợ bợi, (J= Hz) HMBC 1 65,5 66,7 CH2 2,97 ddd (5,0; 4,5; 13,0)/ 3,74 m 2, 3, 5, 9 2 22,8 23,5 CH2 1,77 m 3 23,2 24,2 CH2 1,60 m/1,88 m 2, 4 4 27,5 28,5 CH2 1,72 m/2,20 ddd (4,0; 4,5; 13,0) 5, 6 5 73,8 75,5 CH 3,30 m 6 33,6 34,7 CH2 1,40 m/ 2,30 ddd (5,0; 5,0; 13,5) 4, 5, 7, 10 7 24,7 25,6 CH 1,91 m 8 36,8 37,9 CH2 1,50 m/1,76 m 11 9 57,7 59,1 CH 3,88 m 7, 8 10 21,3 21,8 CH3 0,94 d (6,5) 6, 7, 8 11 13,9 14,2 CH3 1,20 d (6,5) 8, 9
#δC của cermizine C N-oxide [69] đo trong chloroform-d1,
amethanol-d4, b125 MHz, c500 MHz
Như vậy, từ toàn bộ thân của loài Thông đất đã phân lập được 20 hợp chất trong đó có 3 hợp chất mới là: lycocernuside E (LC1), lycernuic B (LC6) và lycernuic
ketone F (LC7) và 18 hợp chất đã biết là:
+ Lignan: Lycocernuaside A (LC2), bombasin 4-O-β-D-glucopyranoside (LC3), dihydrodehydrodiconiferyl alcohol 4-O-β-D-glucopyranoside (LC4), cedrusin (LC5).
+ Triterpenoid khung serratane: Lycernuic ketone C (LC8), lycernuic ketone B (LC9), lycoclavanol (LC10), 3-epi-lycoclavanol (LC11) methyl lycernuate B (LC12), lycernuic acid B (LC13), 3β,21β,24-trihydroxyserrat-14-en-16-one (LC14).
+ Flavonoid: Apigenin-4′-O-(2′′-O-p-coumaroyl)- β-D-glucopyranoside (LC15), apigenin-4′-O-(6′′-O-p-coumaroyl)- β-D-glucopyranoside (LC16), apigenin-4′-O- (2′′,6′′-di-O-trans-p-coumaroyl)- β-D-glucopyranoside (LC17).
+ Alkaloid khung cernuane: Cernuine (LC18), lycocernuine (LC19), cermizine C N-Oxide (LC20).
Các hợp chất cũ đều là những chất đã từng được phân lập trong các loài thưc vật thuộc chi Lycopodiella.
Hình 4.1.21. Cấu trúc các chất phân lập từ lồi Thơng đất (L. cernua)
Từ thân và lá của loài Na rừng đã phân lập được 15 hợp chất sạch, trong đó có 3 hợp chất mới. Cấu trúc của các hợp chất được xác định như sau:
4.2.1. Hợp chất KC1: Kadnanolactone H
Hình 4.2.1: Cấu trúc hóa học và các tương tác HMBC chính của KC1
Hợp chất KC1 thu được ở dạng bột màu trắng. Dữ liệu 1H-NMR của KC1 cho thấy tín hiệu của ba nhóm methyl bậc ba tại δH 1,13 (s; H-18); 1,43 (s; H-30) và
1,88 (s; H-27) và mợt nhóm methyl bậc 2 tại δH 1,34 (d; J = 8,0 Hz). Hai proton olefinic tại δH 7,50 (s; H-24) và 5,75 (d; J = 4,0 Hz; H-12) và hệ spin ABX [δH 4,41 (1H; d; J = 4.0 Hz); 2,70 (1H; d; J = 16.0 Hz) và 2,95 (1H; dd; J = 4,0; 16,0 Hz)] được quan sát với hằng số ghép đôi đặc trưng được gán tương ứng với H-1, H-2α và H-2β dưa vào các tương tác trên phổ HMQC.
Dữ liệu 13C-NMR của KC1 cho thấy tín hiệu của 29 carbon bao gồm: 2 nhóm carbonyl este tại δC 176,2 (C-3) và 175,0 (C-26); 4 nguyên tử carbon không bão hòa tại δC 149,4; 148,0; 130,7 và 121,1 được gán lần lượt cho H-24; H-13; H-25 và H- 12: 4 carbon không liên kết với proton bao gồm tín hiệu tại δC 52,9 (C-14) và ba carbon liên kết với oxy tại δC 99,9 (C-10); 89,0 (C-4) và 70,9 (C-9); 4 nhóm oxymethine tại δC 83,0 (C-1, C-23); 77,2 (C-15) và 75,5 (C-22); 4 nhóm methine tại
δC 58,8 (C-8); 55,0 (C-5); 44,8 (C-20) và 42,9 (C-11); 7 nhóm methylene và 4 nhóm
methyl.
Các dữ kiện phổ trên cho thấy KC1 có cấu trúc của mợt nortriterpenoid dilactone [70].
Vị trí của các nhóm methyl được xác định dưa vào các tương tác trên phổ HMBC. Các pic giao giữa H-30 (δH 1,43) và H-29 (δH 3,85) với C-4 (δC 89,0) cho thấy nhóm 30-CH3 và nhóm hydroxymethylene (C-29) gắn vào C-4. Giữa H-27 (δH 1,88) với C-24 (δC 149,4)/C-25 (δC 130,7)/C-26 (δC 1750,0) khẳng định nhóm 27- CH3 gắn vào C-25. Tương tư là các tương tác của H-18 với C-8/C-14/C-15 và H-21 với C-17/C-20/C-22.
So sánh dữ kiện phổ của KC1 với hợp chất kadnanolactone H đã được công bố [71] nhận thấy có sư phù hợp các tín hiệu phổ tại các vị trí tương ứng (bảng 4.2.1). Kết hợp với dữ kiện phổ HMQC và HMBC cho phép khẳng định hợp chất KC1 là
kadnanolacotne H (chi tiết phổ xem phụ lục 21).