3. Phương pháp chẩn đoán và phát hiện bệnh trên cá, tôm
1.7. Bệnh dovi khuẩn Flavobacte rở cá
a. Tác nhân gây bệnh
Gây bệnh này ở cá là do giống vi khuẩn Flavobacter spp, thuộc họ
Cytophagacae. Vi khuẩn có dạng hình que, dài khoảng 0,3-0,7 x 4-8 m, bắt màu gram (-). Đây là những vi khuẩn chỉ ký sinh trên bề mặt cơ thể cá, có phương thức vận động đặc biệt, đó là phương thức trượt.
Vi khuẩn phát triển trên môi trường Cytophaga agar. Khuẩn lạc màu vàng, bằng đầu, mép khơng đều và dính chặt vào mơi trường như khuẩn lạc của nấm. Dưới kính soi nổi (40 lần), mép khuẩn lạc có dạng dễ cây. Trong mơi trường lỏng (Cytophaga Broth) vi khuẩn mọc thành đám hoặc màng mỏng trên bề mặt của môi truờng. Khi lắc nhẹ chúng phát triển đồng nhất
Gây bệnh ở cá nuôi thường gặp 2 loài:
Flavobacterium columnaris gây bệnh ở cá nước ngọt F. maritimus gây bệnh ở cá nước lợ mặn
Vi khuẩn Flavobacterium columnare có một số đặc điểm sinh vật hóa học
như sau: phản ứng Catalase và Cytocrome oxidae dương tính, phản ứng Nitrat và sinh khí H2S dương tính. Khơng sử dụng các acid amin trong mơi trường, phản ứng Decacboxylase âm tính.
Vi khuẩn F. maritimus không phát triển trên môi trường Cytophaga + 2% NaCl giống như các vi khuẩn phân bố ở vùng nước mặn khác. Muốn ni cấy
được nó cần pha mơi trường Cytophaga agar trong nươớc biển hoặc có ít nhất 30% nước biển, bởi vi khuẩn này khơng phải chỉ có nhu cầu về muối NaCl mà cịn cả các loại muối khác. Vi khuẩn F. maritimus có đặc điểm Catalase, Cytochrome oxidase dương, thuỷ phân Casein, Gelatin, Tributyrin và Tyrosin. Vi khuẩn không sản sinh H2S và Indol. Vi khuẩn dùng nguồn Carbon và Nitrogen để sinh trưởng như Tryptone, nấm men, acid Casamin. Vi khuẩn có thể thuỷ phân Agar, Cellulose, kitin, tinh bột và Aessulin, khử Nitrite thành Nitrate. Không sinh acid trong các đường Glucose, Galactose, Fructose, Mantose, Lactose, Sucrose, Sorbose, Maltose, Cellobiose, Trehalose, Xylose (Wakabayashi và ctv, 1986).
b. Dấu hiệu bệnh lý
Dấu hiệu đầu tiên xuất hiện các đốm trắng trên thân, đầu, vây, mang. Các đốm lan rộng thành các vết loét, xung quanh có viền màu đỏ, ở phần giữa màu vàng hoặc xám, da và vẩy cá cá có thể bị lột rồi rụng đi, tạo ra vết loét lan rộng. Các mép vây sơ, mòn cụt. Trên mang xuất hiện các vết loét, tơ mang bị phá huỷ làm cá ngạt thở. Bệnh không gây thương tích trong các cơ quan nội tạng, nhưng độc lực của vi khuẩn vẫn có thể làm chết cá. Bệnh thường xảy ra khi cá nhốt với mật độ dày, môi trường nghèo dinh dưỡng., thường gặp trong các hình thức ni cá lồng bè.
c. Phân bố và lan truyền bệnh
Bệnh Flavobacter phân bố rộng khắp nơi trên thế giới, đã gặp ở châu Mỹ, châu Âu, châu Á. Nhiều loài cá nước ngọt đã nhiễm: cá chình- (Anguilla japonica,
A. anguilla, cá Misgurnus anguillicaudatus); cá diếc (Carassius auratus); cá chép
(Cyprinus carpio); cá trắm cỏ (Ctenopharyngodon idellus); cá rô phi (Oreochromis mossambicus). Ở đông nam Á bệnh đã gây ra ở cá trê vàng Clarias
macrocephalus giết chết 90% cá trê giống trong ao ni trong vịng 24 h (kabata,
1985).
Ở nước ngọt, bệnh thường xuất hiện gây cá chết ở nhiệt độ 20-350C, dưới 150C bệnh này ít khi xuất hiện bệnh. Theo Wakabayashi và Egusa, 1972 đã thí nghiệm trên cá Misgurnus anguillicaudatus về sự ảnh hưởng của nhiệt độ đến bệnh Flavobacter. Các tác giả này đã nuôi cá trong môi trường có mật độ vi khuẩn
F. columnaris là 106 tế bào/ml ở các thang nhiệt độ 5-350C (khoảng cách mỗi lô
là 50C). Kết quả cho thấy các lô từ 5-100C cá khơng chết; 150C có 25% cá đã chết bị bệnh; ở 20-350C cá chết 100%. Thời gian cá chết bệnh là 7,0; 3,0; 1,8; 1,0 ngày ở các lô nhiệt độ tương ứng là 15; 20; 25 và 350C.
Hình 4.15: Cá bống tượng bị tuột nhớt
Hình 4.16: Dấu hiệu bệnh lý của cá bị nhiễm Flavobacterium. Cá tra bị “Thối đuôi” do nhiễm Flavobacterium columnare; cá điêu hồng bị thối mang, mịn đi và tuột
Hình 4.17: Dấu hiệu bệnh lý của cá biển nhiễm Flavobacterium maritimus: Cá hồi bị lở loét; Cá chẽm bị mịn đi, tróc vẩy, thối mang
Ở nước mặn bệnh, bệnh này đã dược phát hiện xảy ra ở một số lồi cá biển ni như cá chẽm (Lates calcarifer), cá hồng (Lutjanus spp) và cá mú (Epinephelus spp). Bệnh thường xuất hiện vào mùa xuân, khi đưa cá từ bể ương ra lồng lưới sau 1-2 tuần, cỡ cá 6 cm. Mặc dù nhiệt độ nước tăng, vi khuẩn cũng phát triển, nhưng không phát hiện thấy bệnh vào mùa hè và thu.
Flavobacter thường là các tác nhân cơ hội, cá thường bị cảm nhiễm từ các
vết thương tổn cơ học trên cơ thể. Sự bùng phát của bệnh liên quan chặt chẽ với các nhân tố như nhiệt độ, độ mặn và điều kiện gây sốc của môi trường. Trong môi trường giàu các ion Ca, K và Mg có thể kích thích sự phát triển của vi khuẩn
Ở Việt nam, trong nghề nuôi cá lồng trên biển, bệnh Flexibacter đã xảy ra ở một số lồi cá biển có giá trị kinh như cá mú, cá chẽm, vào mùa xuân và mùa thu ở miền Bắc, vào mùa mưa ở miền Nam.
d. Phương pháp chẩn đoán bệnh
Dựa vào dấu hiệu bệnh lý và quan sát trực tiếp bệnh phẩm lấy từ các vết thương tổn ở mang, da, mắt cá hoặc nhuộm mẫu bằng các loại thuốc nhuộm để quan sát bằng kính hiển vi có thể phát hiện ra các tế bào dài, mảnh và cong, vận động bằng phương thức trượt.
Để chẩn đốn chính xác, có thể phân lập vi khuẩn trên mơi trường chọn lọc của Flavobacter là Cytophaga agar và thử các phản ứng sinh hố để phân loại.
e. Phịng trị bệnh
Áp dụng biện pháp phịng bệnh tổng hợp: chú ý cải thiện mơi trường nuôi tốt, thả cá mật độ vừa phải, cho cá ăn thức ăn đủ lượng và chất, tránh các thương tổn trên bề mặt cơ thể do vận chuyển, đánh bắt và do ký sinh trùng ký sinh. Có thể phịng bệnh bằng phương pháp nhiệt độ hoặc cho thêm vào mơi trường các vi khuẩn có lợi. Sát trùng cá bằng các loại hóa chất trước khi thả vào lồng bè, ao như: CuSO4 40ppm trong 10-20 phút, Thuốc tím 10-20 ppm trong 4-10 phút, formol 50-100 ppm trong 10-20 phút. Với cá biển có thể tắm bằng nước ngọt trong 5-10 phút. Áp dụng cơng nghệ vaccine để phịng bệnh này ở cá ni rất có hiệu quả.
Để trị bệnh có thẻ dùng một số kháng sinh trộn vào thức ăn cho cá: Oxytetracyline 50-75 mg/ kg cá/1 ngày; Sulphonamid 220 mg/kg cá/1 ngày và cho cá ăn 10 ngày liên tục. Cũng có thể dùng kháng sinh tắm cho cá bênh: Dùng oxolinic acid 1ppm tắm trong 24 h