1.4.2.1. Xỏc định vitamin C nguyờn liệu
Phƣơng phỏp xỏc định hàm lƣợng vitamin C trong thực phẩm là sử dụng phƣơng phỏp oxi húa - khƣ̉. Phản ứng oxi húa khử tốt hơn phƣơng phỏp chuẩn độ axit-bazơ. Iốt tƣơng đối ít tan trong nƣớc, nhƣng tan trong dung dịch I- tạo thành triiođua:
-2 2
I +I I-3
Triiođua oxi húa vitamin C tạo axit dehydroascobic:
- - +
6 8 6 3 6 6 6
C H O +I C H O +3I +2H
Dựng dung dịch chuẩ n triiođua để chuẩn độ vitamin C. với chṍt chỉ thị là hồ tinh bột . Khi vitamin C đó bị oxi húa hờ́t thỡ 1 giọt dung dịch triiođua dƣ sẽ phản ứng với tinh bột tạo nờn một hỗn hợp màu xanh thì ngƣ̀ng chuõ̉n đụ̣ .
Quy trỡnh chuẩn độ này thích hợp trong viợ̀c kiểm tra hàm lƣợng vitamin C trong thuụ́c , nƣớc ộp quả và các loại trỏi cõy tƣơi, đụng lạnh hoặc rau quả đóng gói [1, 13].
1.4.2.2. Quy trình xỏc định vitamin C
Mục đích của thí nghiợ̀m này là xỏc định hàm lƣợng vitamin C trong cỏc mẫu thử, ví dụ nƣớc ộp quả.
Chuẩn bị dung dịch chuõ̉n
Dung dịch tinh bột 1% là chất chỉ thị
- Cho 0,5 gam tinh bột hũa tan vào 50 ml nƣớc cất núng gần sụi. Hũa tan hoàn toàn và để dung dịch nguội trƣớc khi sử dụng. Cú thể dựng dung dịch tinh bụ̣t 0,5%.
Dung dịch iốt
- Hũa tan 5 gam KI và 0,268 g KIO3 trong 200 ml nƣớc cất. Thờm 30 ml axit sunfuric 3 M. Cho dung dịch này vào ống đong 500 ml và pha loóng dung dịch bằng nƣớc cất đến vạch định mức 500 ml. Hũa tan dung dịch hoàn toàn. Cho dung dịch vào bỡnh 600 ml. Đõy là dung dịch chuõ̉n iụ t
( 5I- + IO3- + 6H+ 3I2 + 3H2O I2 + I- → I-3)
Dung dịch vitamin C chuẩn
- Hũa tan 0,250 gam vitamin C trong 100 ml nƣớc cất, pha loóng bằng nƣớc cṍt thành 250 ml dung dịch.
Tiờu chuẩn húa cỏc dung dịch
- Thờm 25,00 ml dung dịch chuẩn vitamin C vào bỡnh nún cú dung tích 125 ml. Thờm 10 giọt dung dịch hồ tinh bột 1 %. Rửa sạch buret, trỏng buret bằng một lƣợng nhỏ dung dịch iốt và sau đú cho dung dịch iốt vào buret. Ghi lại vạch thể tích dung dịch ban đầu trong buret. Chuẩn độ dung dịch cho đến điểm dừng phản ứng, thấy dấu hiợ̀u đầu tiờn của màu xanh dƣơng bền trong 20 giõy khi lắc đều dung dịch. Ghi nhận vạch thể tích dung dịch iốt trờn buret. Lƣợng iốt đó dựng cho chuẩn độ chính là thể tích dung dịch iốt ban đầu trừ đi dung dịch sau chuẩn độ. Làm lại thí nghiợ̀m chuẩn độ ít nhất 2 lần. Cỏc kết quả chấp nhận sai khỏc 0,1 ml.
Chuẩn độ vitamin C
Tiến hành chuẩn độ cỏc mẫu thí nghiợ̀m tƣơng tự quỏ trỡnh chuẩn độ dung dịch vitamin C chuẩn. Nhớ ghi nhận lại thể tích dung dịch iốt ban đầu và sau khi chuẩn độ cho đến khi xuất hiợ̀n điểm dừng làm thay đổi màu dung dịch.
Chuẩn độ cỏc mẫu nước quả ộp
- Cho 25,00 ml nƣớc quả ộp nhƣ nƣớc chanh hay viờn thuụ́c chƣ́a vitamin C vào bỡnh nún cú dung tích 125 ml.
- Chuẩn độ cho đến khi xuất hiợ̀n điểm dừng phản ứng. (Cho dung dịch iốt cho đến khi màu xanh xuất hiợ̀n bền trong 20 giõy)
Chƣơng 2
NỘI DUNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIấN CỨU