CHƯƠNG 3 THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
2. Thử hoạt tính sinh học
Đã thử tác dụng gây độc của 6 dẫn chất tổng hợp được trên 3 dòng tế bào ung thư ở người (ung thư đại tràng SW620, ung thư tuyến tiền liệt PC-3, ung thư phổi không tế bào nhỏ NCI-H23), kết quả cho thấy:
+ Cả 6 dẫn chất đều có hoạt tính ức chế với cả 3 dòng tế bào ung thư.
+ Có 5/6 dẫn chất cho kết quả khả quan về khả năng gây độc tế bào khi có IC50 thấp hơn so với chất chứng PAC-1 và 5-FU, bao gồm Vb-f; trong đó tác dụng gây độc tế bào tốt nhất thuộc về Ve trên cả 3 dòng tế bào thử nghiệm.
+ Dẫn chất Ve được thử khả năng hoạt hóa caspase-3, khả năng ảnh hưởng lên
chu kỳ tế bào và quá trình chết tự nhiên của tế bào, tuy nhiên khơng thể hiện tác động trên cả 3 thử nghiệm này.
KIẾN NGHỊ
Tiếp tục tiến hành thử hoạt tính kháng tế bào ung thư in vitro của các dẫn chất tổng hợp được trên các enzym khác cũng liên quan đến cơ chế bệnh sinh ung thư hoặc những dòng tế bào ung thư khác nhằm sàng lọc được các dẫn chất có tác dụng mạnh, làm cơ sở cho việc thử tác dụng in vivo.
51
Thử nghiệm tác dụng của các dẫn chất tổng hợp được trên các đích khác, ví dụ như vi khuẩn, ký sinh trùng sốt rét [13] [55].
Tiến hành thay đổi các nhóm thế trên vịng quinazolin bằng các nhóm thế khác, hoặc thay đổi hợp phần (3-allyl-2-hydroxy)phenyl bằng các hợp phần có tác dụng dược lý khác để sàng lọc thêm các hợp chất tiềm năng, đồng thời xây dựng thư viện các hợp chất hóa dược phục vụ cho các nghiên cứu trên các đích khác.
TÀI LIỆU THAM KHẢO
1. Andreini, Claudia, et al. (2006), "Counting the Zinc-Proteins Encoded in the Human Genome", J. Proteome Res. 5(1), pp. 196-201.
2. Brenner, Dirk and Mak, Tak W. (2009), "Mitochondrial cell death effectors",
Curr. Opin. Cell Biol. 21(6), pp. 871-877.
3. Georgey, Hanan, Abdel-Gawad, Nagwa, and Abbas, Safinaz (2008), "Synthesis and Anticonvulsant Activity of Some Quinazolin-4-(3H)-one Derivatives",
Molecules. 13(10), pp. 2557-2569.
4. Ho, Lien H., Ratnaike, Ranjit N., and Zalewski, Peter D. (2000), "Involvement of Intracellular Labile Zinc in Suppression of DEVD-Caspase Activity in Human Neuroblastoma Cells", Biochem. Biophys. Res. Commun. 268(1), pp.
148-154.
5. Huan, Le Cong, et al. (2020), "New Acetohydrazides Incorporating 2- Oxoindoline and 4-Oxoquinazoline: Synthesis and Evaluation of Cytotoxicity and Caspase Activation Activity", Chem. Biodivers. 17(3), p. e1900670.
6. Kerr, J. F. R. (1965), "A histochemical study of hypertrophy and ischaemic injury of rat liver with special reference to changes in lysosomes", J. Pathol. Bacteriol. 90(2), pp. 419-435.
7. Lockshin, Richard A. and Beaulaton, Jacques (1974), "Programmed cell death",
Life Sci. 15(9), pp. 1549-1565.
8. Nicholson, D. W. (1999), "Caspase structure, proteolytic substrates, and function during apoptotic cell death", Cell Death Differ. 6(11), pp. 1028-1042. 9. Panneerselvam, Perumal, et al. (2009), "Synthesis and anti-microbial screening
of some Schiff bases of 3-amino-6,8-dibromo-2-phenylquinazolin-4(3H)-ones",
Eur. J. Med. Chem. 44(5), pp. 2328-2333.
10. Peng, Xiaohong, et al. (2011), "Aroylhydrazone derivative as fluorescent sensor for highly selective recognition of Zn2+ ions: syntheses, characterization, crystal structures and spectroscopic properties", Dalton Trans. 40(19), pp.
5271-5277.
11. Peterson, Quinn P., et al. (2009), "PAC-1 Activates Procaspase-3 in Vitro through Relief of Zinc-Mediated Inhibition", J. Mol. Bio. 388(1), pp. 144-158. 12. Pfeffer, Claire M. and Singh, Amareshwar T. K. (2018), "Apoptosis: A Target
for Anticancer Therapy", Int. J. Mol. Sci. 19(2), p. 448.
13. Raghavendra, Nulgulmnalli Manjunathiah, et al. (2007), "Synthesis and Antimicrobial Activities of Some Novel Substituted 2-Imidazolyl-<i>N</i>-(4- oxo-quinazolin-3(4<i>H</i>)-yl)-acetamides", Chem. Pharm. Bull. 55(11), pp.
14. Rock, Kenneth L. and Kono, Hajime (2008), "The Inflammatory Response to Cell Death", Annu. Rev. Pathol.: Mech. Dis. 3(1), pp. 99-126.
15. Shagufta and Ahmad, Irshad (2017), "An insight into the therapeutic potential of quinazoline derivatives as anticancer agents", MedChemComm. 8(5), pp.
871-885.
16. Smits, Rogier A., et al. (2010), "Synthesis and QSAR of Quinazoline Sulfonamides As Highly Potent Human Histamine H4 Receptor Inverse Agonists", J. Med. Chem. 53(6), pp. 2390-2400.
17. Vousden, Karen H. and Lu, Xin (2002), "Live or let die: the cell's response to p53", Nat. Rev. Cancer. 2(8), pp. 594-604.
18. Aiuchi, T., et al. (1998), "Zinc ions prevent processing of caspase-3 during apoptosis induced by geranylgeraniol in HL-60 cells", J Biochem. 124(2), pp. 300-3.
19. Alnemri, E. S., et al. (1996), "Human ICE/CED-3 protease nomenclature", Cell. 87(2), p. 171.
20. Burke, T. G. and Mi, Z. (1994), "The structural basis of camptothecin interactions with human serum albumin: impact on drug stability", J Med Chem. 37(1), pp. 40-6.
21. Cain, K., Bratton, S. B., and Cohen, G. M. (2002), "The Apaf-1 apoptosome: a large caspase-activating complex", Biochimie. 84(2-3), pp. 203-14.
22. Carmi, C., et al. (2012), "Clinical perspectives for irreversible tyrosine kinase inhibitors in cancer", Biochem Pharmacol. 84(11), pp. 1388-99.
23. Devarajan, E., et al. (2002), "Down-regulation of caspase 3 in breast cancer: a possible mechanism for chemoresistance", Oncogene. 21(57), pp. 8843-51. 24. Elmore, S. (2007), "Apoptosis: a review of programmed cell death", Toxicol
Pathol. 35(4), pp. 495-516.
25. Eron, S. J., et al. (2018), "Multiple Mechanisms of Zinc-Mediated Inhibition for the Apoptotic Caspases-3, -6, -7, and -8", ACS Chem Biol. 13(5), pp. 1279-
1290.
26. Fantl, W. J., Johnson, D. E., and Williams, L. T. (1993), "Signalling by receptor tyrosine kinases", Annu Rev Biochem. 62, pp. 453-81.
27. Fink, D., et al. (2001), "Elevated procaspase levels in human melanoma",
Melanoma Res. 11(4), pp. 385-93.
28. Galluzzi, L., et al. (2016), "Caspases Connect Cell-Death Signaling to Organismal Homeostasis", Immunity. 44(2), pp. 221-31.
29. Geyer, C. E., et al. (2006), "Lapatinib plus capecitabine for HER2-positive advanced breast cancer", N Engl J Med. 355(26), pp. 2733-43.
30. Ghavami, S., et al. (2009), "Apoptosis and cancer: mutations within caspase genes", J Med Genet. 46(8), pp. 497-510.
31. Gotink, K. J. and Verheul, H. M. (2010), "Anti-angiogenic tyrosine kinase inhibitors: what is their mechanism of action?", Angiogenesis. 13(1), pp. 1-14. 32. Gyrd-Hansen, M. and Meier, P. (2010), "IAPs: from caspase inhibitors to
modulators of NF-kappaB, inflammation and cancer", Nat Rev Cancer. 10(8),
pp. 561-74.
33. Hei, Y. Y., et al. (2016), "Synthesis and antitumor activity evaluation of 4,6- disubstituted quinazoline derivatives as novel PI3K inhibitors", Bioorg Med Chem Lett. 26(18), pp. 4408-4413.
34. Huan, L. C., et al. (2019), "(E)-N'-Arylidene-2-(4-oxoquinazolin-4(3H)-yl) acetohydrazides: Synthesis and evaluation of antitumor cytotoxicity and caspase activation activity", J Enzyme Inhib Med Chem. 34(1), pp. 465-478. 35. Karamouzis, M. V., Grandis, J. R., and Argiris, A. (2007), "Therapies directed
against epidermal growth factor receptor in aerodigestive carcinomas", Jama.
298(1), pp. 70-82.
36. Kassab, A. E. and Hassan, R. A. (2018), "Novel benzotriazole N- acylarylhydrazone hybrids: Design, synthesis, anticancer activity, effects on cell cycle profile, caspase-3 mediated apoptosis and FAK inhibition", Bioorg Chem. 80, pp. 531-544.
37. Kerr, J. F., Wyllie, A. H., and Currie, A. R. (1972), "Apoptosis: a basic biological phenomenon with wide-ranging implications in tissue kinetics", Br J
Cancer. 26(4), pp. 239-57.
38. Khazaei, S., et al. (2016), "Global Incidence and Mortality Rates of Stomach Cancer and the Human Development Index: an Ecological Study", Asian Pac J
Cancer Prev. 17(4), pp. 1701-4.
39. Kim, J. H., et al. (2004), "Methyl jasmonate induces apoptosis through induction of Bax/Bcl-XS and activation of caspase-3 via ROS production in A549 cells", Oncol Rep. 12(6), pp. 1233-8.
40. Krepela, E., et al. (2004), "Increased expression of Apaf-1 and procaspase-3 and the functionality of intrinsic apoptosis apparatus in non-small cell lung carcinoma", Biol Chem. 385(2), pp. 153-68.
41. Kubicek, S., et al. (2007), "Reversal of H3K9me2 by a small-molecule inhibitor for the G9a histone methyltransferase", Mol Cell. 25(3), pp. 473-81.
42. Kurosaka, K., et al. (2003), "Silent cleanup of very early apoptotic cells by macrophages", J Immunol. 171(9), pp. 4672-9.
43. Liu, F., et al. (2011), "Optimization of cellular activity of G9a inhibitors 7- aminoalkoxy-quinazolines", J Med Chem. 54(17), pp. 6139-50.
44. Liu, F., et al. (2009), "Discovery of a 2,4-diamino-7-aminoalkoxyquinazoline as a potent and selective inhibitor of histone lysine methyltransferase G9a", J Med
Chem. 52(24), pp. 7950-3.
45. Liu, F., et al. (2010), "Protein lysine methyltransferase G9a inhibitors: design, synthesis, and structure activity relationships of 2,4-diamino-7-aminoalkoxy- quinazolines", J Med Chem. 53(15), pp. 5844-57.
46. McGarvey, K. M., et al. (2006), "Silenced tumor suppressor genes reactivated by DNA demethylation do not return to a fully euchromatic chromatin state",
Cancer Res. 66(7), pp. 3541-9.
47. Nishimura, N., et al. (2011), "Phospshoinositide 3-kinase (PI3K)/mammalian target of rapamycin (mTOR) dual inhibitors: discovery and structure-activity relationships of a series of quinoline and quinoxaline derivatives", J Med Chem. 54(13), pp. 4735-51.
48. O'Donovan, N., et al. (2003), "Caspase 3 in breast cancer", Clin Cancer Res.
9(2), pp. 738-42.
49. Persad, R., et al. (2004), "Overexpression of caspase-3 in hepatocellular carcinomas", Mod Pathol. 17(7), pp. 861-7.
50. Pommier, Y. (2006), "Topoisomerase I inhibitors: camptothecins and beyond",
Nat Rev Cancer. 6(10), pp. 789-802.
51. Putt, K. S., et al. (2006), "Small-molecule activation of procaspase-3 to caspase-3 as a personalized anticancer strategy", Nat Chem Biol. 2(10), pp. 543- 50.
52. Savill, J. and Fadok, V. (2000), "Corpse clearance defines the meaning of cell death", Nature. 407(6805), pp. 784-8.
53. Siemann, D. W. (2011), "The unique characteristics of tumor vasculature and preclinical evidence for its selective disruption by Tumor-Vascular Disrupting Agents", Cancer Treat Rev. 37(1), pp. 63-74.
54. Taliani, S., et al. (2013), "Phenylpyrazolo[1,5-a]quinazolin-5(4H)-one: a suitable scaffold for the development of noncamptothecin topoisomerase I (Top1) inhibitors", J Med Chem. 56(18), pp. 7458-62.
55. Verhaeghe, P., et al. (2008), "Synthesis and antiplasmodial activity of new 4- aryl-2-trichloromethylquinazolines", Bioorg Med Chem Lett. 18(1), pp. 396-
56. Wang, F., et al. (2015), "Targeting procaspase-3 with WF-208, a novel PAC-1 derivative, causes selective cancer cell apoptosis", J Cell Mol Med. 19(8), pp.
1916-28.
57. Wang, J. C. (2002), "Cellular roles of DNA topoisomerases: a molecular perspective", Nat Rev Mol Cell Biol. 3(6), pp. 430-40.
58. Wang, X. F., et al. (2014), "Optimization of 4-(N- cycloamino)phenylquinazolines as a novel class of tubulin-polymerization inhibitors targeting the colchicine site", J Med Chem. 57(4), pp. 1390-402. 59. Wang, X. F., et al. (2013), "N-aryl-6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydroquinolines: a
novel class of antitumor agents targeting the colchicine site on tubulin", Eur J
Med Chem. 67, pp. 196-207.
60. Wu, X., et al. (2010), "Design and synthesis of novel Gefitinib analogues with improved anti-tumor activity", Bioorg Med Chem. 18(11), pp. 3812-22.
61. Wu, X., et al. (2011), "Design, synthesis, and in vitro antitumor activity evaluation of novel 4-pyrrylamino quinazoline derivatives", Chem Biol Drug Des. 78(6), pp. 932-40.
62. Yao, H., et al. (2015), "Discovery of 1-substituted benzyl-quinazoline- 2,4(1H,3H)-dione derivatives as novel poly(ADP-ribose)polymerase-1 inhibitors", Bioorg Med Chem. 23(4), pp. 681-93.
63. Zahedifard, M., et al. (2015), "Synthesis, characterization and apoptotic activity of quinazolinone Schiff base derivatives toward MCF-7 cells via intrinsic and extrinsic apoptosis pathways", Sci Rep. 5, p. 11544.
64. Zaman, S., Wang, R., and Gandhi, V. (2014), "Targeting the apoptosis pathway in hematologic malignancies", Leuk Lymphoma. 55(9), pp. 1980-92.
PHỤ LỤC Phụ lục 1: Phổ IR của hợp chất Va Phụ lục 2: Phổ IR của hợp chất Vb Phụ lục 3: Phổ IR của hợp chất Vc Phụ lục 4: Phổ IR của hợp chất Vd Phụ lục 5: Phổ IR của hợp chất Ve Phụ lục 6: Phổ IR của hợp chất Vf Phụ lục 7: Phổ HRMS âm của hợp chất Va Phụ lục 8: Phổ HRMS dương của hợp chất Vb Phụ lục 9: Phổ HRMS dương của hợp chất Vc Phụ lục 10: Phổ HRMS dương của hợp chất Vd Phụ lục 11: Phổ HRMS dương của hợp chất Ve Phụ lục 12: Phổ HRMS dương của hợp chất Vf Phụ lục 13: Phổ 1H-NMR của hợp chất Va Phụ lục 14: Phổ 1H-NMR của hợp chất Vb Phụ lục 15: Phổ 1H-NMR của hợp chất Vc Phụ lục 16: Phổ 1H-NMR của hợp chất Vd Phụ lục 17: Phổ 1H-NMR của hợp chất Ve Phụ lục 18: Phổ 1H-NMR của hợp chất Vf Phụ lục 19: Phổ 13C-NMR của hợp chất Va Phụ lục 20: Phổ 13C-NMR của hợp chất Vb Phụ lục 21: Phổ 13C-NMR của hợp chất Vc Phụ lục 22: Phổ 13C-NMR của hợp chất Vd Phụ lục 23: Phổ 13C-NMR của hợp chất Ve Phụ lục 24: Phổ 13C-NMR của hợp chất Vf
\ Phụ lục 8: Phổ HRMS dương của hợp chất Vb