CHƯƠNG 3 THỰC NGHIỆM, KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN
3.3. Bàn luận
3.3.3. Đánh giá hoạt tính sinh học
3.3.3.1. Đánh giá độc tính trên tế bào ung thư
Sau khi được khẳng định cấu trúc, các hợp chất này được tiến hành đánh giá khả năng gây độc trên các dòng tế bào ung thư ở người bao gồm tế bào ung thư đại tràng (SW620), tế bào ung thư tuyến tiền liệt (PC3), và tế bào ung thư phổi không tế bào nhỏ (NCI-H23).
Hình 3.1. Kết quả thử đợc tính tế bào các dẫn chất Va-f
Kết quả từ bảng 3.7 và hình 3.1 cho thấy tất cả các chất đều thể hiện độc tính trên 3 dòng tế bào thử nghiệm với giá trị IC50 nằm trong khoảng từ 0,26-3,90 µM. Hợp chất
Va khơng có nhóm thế trên vịng quinazolin thể hiện khả năng gây độc tế bào thấp
nhất và thấp hơn so với PAC-1. Như vậy, việc gắn thêm nhóm thế hút (-Br) hoặc đẩy điện tử (-CH3, -OCH3) vào một trong hai vị trí 6 hoặc 7 trên hợp phần quinazolin có thể giúp làm tăng độc tính tế bào trên cả 3 dịng tế bào ung thư của các acylhydrazon từ 1,5-9 lần, và tất cả các dẫn chất này đều có độc tính cao hơn PAC-1 từ 1,7-7 lần.
47
So sánh khả năng gây độc tế bào giữa các nhóm thế hút và đẩy điện tử ở cùng một vị trí thế, nhóm thế hút electron (Vf) cho tác dụng tốt hợn so với nhóm thế đẩy electron (Vc, Vd) ở cùng vị trí thế số 7. Xét về vị trí khác nhau của cùng một nhóm thế, nhóm thế methyl ở vị trí 7 có khả năng gây độc tế bào tốt hơn 2,5-4 lần so với ở vị trí 6 (Vc so với Vb) trên cả 3 dòng tế bào. Và nếu cả 2 vị trí 6, 7 trên dị vòng
quinazolin đều được thế (Ve) thì khả năng kháng cả 3 dòng tế bào ung thư là mạnh nhất, gấp 8-12 lần so với chất chứng dương PAC-1.
Kết quả cũng cho thấy rằng, việc thay phần 4-benzylpiperazin-1-yl trên PAC-1 bằng khung quinazolin và gắn các nhóm thế phù hợp giúp tăng độc tính của các dẫn chất Vb-f trên cả 3 dòng tế bào thử nghiệm.
3.3.3.2. Đánh giá tác dụng hoạt hóa enzym caspase-3
Từ kết quả đánh giá độc tính trên 3 dịng tế bào, hợp chất Ve với độc tính cao
nhất được đưa vào đánh giá khả năng hoạt hóa caspase-3.
Hình 3.2. Kết quả đánh giá khả năng hoạt hóa caspase-3 của Ve
Kết quả cho thấy hợp chất Ve hầu như khơng có khả năng hoạt hóa do biểu đồ
theo thời gian của caspase-3 gần như trùng với các mẫu chỉ ủ dung mơi hoặc khơng ủ chất hoạt hóa. Như vậy, có thể khả năng gây độc trên 3 dịng tế bào thử nghiệm của Ve không đến từ khả năng hoạt hóa caspase-3, mà có thể đến từ các cơ chế dược lý khác của các phần cấu trúc có hoạt tính trong phân tử như khung quinazolin với đa dạng các vai trị đã được trình bày ở phần 1.4, hoặc những cơ chế khác chưa được khám phá của hợp phần acetohydrazid đến từ PAC-1. 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 0.12 30 60 90 120 150 180 210 240 270 300 M ật độ qu ang ( 45 0nm ) Thời gian (phút) PAC-1 UN VH Ve
48
3.3.3.3. Đánh giá ảnh hưởng lên chu kỳ tế bào
Từ kết quả đánh giá độc tính trên 3 dịng tế bào, hợp chất Ve với độc tính cao
nhất được đưa vào đánh giá ảnh hưởng lên chu kỳ tế bào.
Kết quả cho thấy hợp chất Ve hầu như không tạo ra ảnh hưởng do tỷ lệ phần trăm tế bào ở các pha khơng có sự khác biệt đáng kể so với các mẫu chỉ ủ với dung môi hoặc không ủ chất hoạt hóa. Như vậy, có thể chất Ve đã gây độc tế bào qua cơ chế
khơng liên quan đến chu kỳ tế bào.
Hình 3.3. Kết quả đánh giá ảnh hưởng lên chu kỳ tế bào của dẫn chất Ve
3.3.3.4. Đánh giá ảnh hưởng lên chu trình apoptosis
Từ kết quả đánh giá độc tính trên 3 dòng tế bào, hợp chất Ve với độc tính cao
nhất được đưa vào đánh giá ảnh hưởng lên quá trình chết tự nhiên của tế bào.
49
Kết quả cho thấy hợp chất Ve hầu như khơng tạo ra ảnh hưởng lên q trình chết rụng của tế bào. Như vậy, có thể chất Ve đã gây độc tế bào qua cơ chế không liên quan đến q trình chết rụng của tế bào, ví dụ như hoạt hóa hệ thống miễn dịch của cơ thể để tiêu diệt các tế bào ung thư, ức chế quá trình tăng sinh mạch máu ở xung quanh các tế bào ung thư…
50
KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ
KẾT LUẬN
Từ các kết quả nghiên cứu đã được trình bày ở trên, có thể đi đến kết luận rằng đề tài đã thực hiện được hai mục tiêu: