Thành phần công thức Tỉ lệ mol Số mol Khối lượng cho 1 mẻ (g) Berberin 8 0,10 33,64 -tocopherol 2 0,25 10,76 HSPC 9 0,1125 85,70 Chất mang Manitol 70,80
3.2.2.2. Quy trình bào chế proliposome berberin quy mô 200 g/mẻ bằng phương
pháp bao tầng sơi
Từ kết quả mục 3.2.1, quy trình bào chế như sau:
Bước 1: Chuẩn bị dung dịch bao: Cân các thành phần ở mục 3.2.2.1. Phân tán
berberin, vitamin E và HSPC trong một lượng vừa đủ hỗn hợp đồng dung môi methanol và cloroform thích hợp với tỷ lệ (v/v) là 2,5:1. Siêu âm dịch thu được trong 10 phút thu được dung dịch bao đồng nhất.
Bước 2: Chuẩn bị chất mang: Manitol được sấy khô ở tủ sấy tĩnh ở 70o
C trong 1 giờ, sau đó rây qua rây 250 m. Cân lượng manitol theo công thức ở mục 3.2.2.1.
Bước 3: Tiến hành bao tầng sôi: Manitol được chuyển vào buồng bao của thiết bị
tầng sôi MiniGlatt và sấy trong 10 phút. Sau đó, tiến hành phun dung dịch bao lên chất mang theo các thông số như sau:
+ Lưu lượng khí vào 10 m3/giờ + Nhiệt độ khí vào 45oC + Tốc độ rũ 3 giây/lần + Tốc độ phun dịch 1,5 ml/phút + Áp suất khí nén 0,7 bar
Bước 4: Sấy khô: Sau khi phun hết dịch, tiếp tục thổi khí nóng trong 1 giờ để sấy
khơ proliposome.
Bước 5: Loại dung môi: Sản phẩm được sấy trong tủ sấy chân không ở 40o C với áp suất nhỏ hơn -0,06 mPa trong 24 giờ để loại bỏ lượng dung mơi cịn dư.
3.2.3. Đánh giá các đặc tính của proliposome berberin ở quy mơ 200 gam/mẻ
Tiến hành bào chế 3 mẻ PL BBR NC01, NC02, NC03 quy mô 200 g/mẻ với cơng thức và quy trình bào chế đã trình bày ở mục 3.3 thu được sản phẩm như hình 3.4.
Hình 7. Sơ đồ bào chế proliposome BBR bằng phương pháp bao tầng sôi
Manitol Sấy 70oC/1 giờ Rây 0,250 mm - Cân BBR -TP HSPC Cân MeOH Cloroform
Hòa tan trong bể siêu âm
Bao tầng sôi
Sấy tầng sôi
Sấy chân không
Rây 1,0mm
Sấy 10 phút trong buồng bao
V = 10 m3/h T = 45oC Vrũ = 3 giây/lần vphun= 1,5 ml/min P = 0,7 bar V = 10 m3/h T = 45oC Vrũ = 3 giây/lần t = 1h T = 40oC t = 24h
Hình 8. Hình thức proliposome berberin
3.2.3.1. Đánh giá đặc tính của proliposome berberin và liposome BBR
Kết quả đánh giá PL BBR và liposome BBR sau khi hydrat hố được trình bày ở bảng 3.5 dưới đây.
Bảng 3.5. Các đặc tính của proliposome berberin ( n=3, TB ± SD)
Mẻ NC01 NC02 NC03 HLDC (%) 14,46 ± 0,66 15,35 ± 1,37 14,67 ± 1,04 KLR biểu kiến (g/ml) 0,449 ± 0,004 0,458 ± 0,005 0,451 ± 0,008 Chỉ số nén Carr (%) 18,33 ± 0,58 17,00 ± 1,00 18,67 ± 0,58 Mất KL do làm khô (%) 1,38 ± 0,26 1,28 ± 0,37 1,69 ± 0,49 KTTP (d.nm) 209,0 ± 9,1 255,1 ± 2,0 234,3 ± 5,1 PDI 0,275 ± 0,033 0,257 ± 0,006 0,353 ± 0,019 EE (%) 81,65 ± 1,33 84,59 ± 1,43 77,42 ± 1,13
Nhận xét: Ở cả 3 mẻ, các kết quả thu được là tương đồng:
− Hàm lượng dược chất khoảng 15% − KLR biểu kiến > 0,40 g/ml
− Chỉ số Carr khoảng 17 – 19%, khả năng trơn chảy khá tốt. − Mất khối lượng do làm khô 2%
− KTTP nằm trong khoảng 200 – 300nm với PDI từ 0,200 đến 0,400 − Hiệu suất liposome hoá > 75%
3.2.3.2. Đánh giá khả năng giải phóng dược chất in vitro
Tiến hành đánh giá khả năng giải phóng dược chất của 3 mẻ NC01, NC02, NC03 trong môi trường đệm phosphat pH 6,8 theo phương pháp ở mục 2.3.2.5, thu
Hình 9. Mức độ giải phóng dược chất tại môi trường đệm phosphat pH 6,8 (n=3, TB ± SD)
Nhận xét: Kết quả cho thấy:
+ Sau 1 giờ, có khoảng dưới 40% dược chất giải phóng + Sau 4 giờ, có khoảng từ 50 – 65% dược chất giải phóng + Sau 10 giờ, có trên 75% dược chất giải phóng
3.2.4. Đề xuất tiêu chuẩn chất lượng của proliposome berberin
Từ các khảo sát ở mục 3.2.3, đề xuất tiêu chuẩn của proliposome như sau: