Nhóm máu được xác định Huyết thanh mẫu + hồng cầu cần định nhóm Hồng cầu mẫu + huyết thanh cần định nhóm Chống A Chống B Chống AB Hồng cầu A Hồng cầu B A + (-) + (-) + B (-) + + + (-) AB + + + (-) (-) O (-) (-) (-) + + Với , + : xảy ra phản ứng ngưng kết. - : không xảy ra phản ứng ngưng kết.
Nguyên nhân sai lầm trong định nhóm máu hệ ABO: Huyết thanh mẫu, hồng cầu mẫu hỏng, biến chất, nhiễm trùng, quá hạn sử dụng; Mẫu máu cần định nhóm bị nhiễm trùng; Mẫu máu định nhóm khơng lấy đúng quy cách; Dụng cụ bẩn; Tay nghề và trình độ của người làm kỹ thuật.
14
Quy trình định danh nhóm máu hệ Rh trên phiến đá men
Máu con người được chia làm nhiều nhóm dựa trên sự có mặt của kháng nguyên trên hồng cầu. Nhóm máu Rh là nhóm máu quan trọng thứ 2 sau hệ ABO trong truyền máu. Hệ Rh gồm 5 kháng ngun chính: D, C, c, E, e. Trong đó kháng
nguyên “D” là quan trọng nhất.
- Người có kháng nguyên D trên bề mặt hồng cầu là người có nhóm RH(D)
dương.
- Người ko có kháng nguyên D trên bề mặt hồng cầu là ng có nhóm RH(D) âm.
Nguyên lý áp dụng: Huyết thanh mẫu dùng huyết thanh đã biết trước kháng thể, cho phản ứng với hồng cầu của bệnh nhân để xác định kháng nguyên trên bề mặt hồng cầu, từđó xác định nhóm máu.
Vật tư sử dụng gồm:
- Trang thiết bị: Máy ly tâm, Tủ lạnh.
- Vật tư: Dụng cụ gồm Gạch men trắng, Pipet, Lam kính, Kính hiển vi; Hóa chất gồm Huyết thanh mẫu Anti D; Nước muối 0,9 %.
- Mẫu bệnh phẩm: Lấy đúng theo quy trình.
Thực hiện:
- Nhỏlên đá men 1 giọt anti D.
- Thêm vào mỗi vị trí 1 giọt hồng cầu cần định nhóm (10% được pha trong
nước muối 0,9%).
- Trộn đều huyết thanh mẫu với hồng cầu của bệnh nhân cần định nhóm bằng một lam kính thành một vịng trịn có đường kính 2-3 cm. Lắc nhẹ
liên tục trong vòng 2 phút rồi đọc kết quả.
Kết quả: Hồng cầu bệnh nhân ngưng kết với huyết thanh mẫu: Rh(+); hồng cầu bệnh nhân không ngưng kết với huyết thanh mẫu: Rh(-).
Nguyên nhân sai lầm trong định nhóm máu hệ Rh: Huyết thanh mẫu, hồng cầu mẫu hỏng, biến chất, nhiễm trùng, quá hạn sử dụng; Mẫu máu cần định nhóm bị
nhiễm trùng; Mẫu máu định nhóm khơng lấy đúng quy cách; Dụng cụ bẩn; Tay nghềvà trình độ của người làm kỹ thuật.
15
Định danh nhóm máu bằng phương pháp ống nghiệm
Quy trình định danh nhóm máu hệ ABO bằng ống nghiệm
Nguyên lý của phương pháp định danh nhóm máu hệ ABO sử dụng ống nghiệm dựa vào nguyên lý là nguyên lý huyết thanh mẫu, nguyên lý hồng cầu mẫu, nguyên lý của xét nghiệm: phản ứng ngưng kết.
Vật tư sử dụng gồm:
- Thiết bị: Máy ly tâm, kính hiển vi.
- Vật tư: Dụng cụ gồm Pipet, Ống nghiệm, Lam kính, Giá đựng xét nghiệm, Khay inox; Hóa chất gồm Nước muối 9 %. Huyết thanh mẫu anti-A, anti- B, anti- AB, Hồng cầu mẫu: Hồng cầu A, Hồng cầu B.
- Mẫu bệnh phẩm: Ống máu chống đông bằng EDTA: 1.5 – 2ml.
Thực hiện:
- Bước 1: Chuẩn bịđầy đủ dụng cụ, hóa chất, sinh phẩm trước khi tiến hành xét nghiệm.
- Bước 2: Kiểm tra mẫu bệnh phẩm và phiếu chỉđịnh xét nghiệm về thông tin bệnh nhân (họvà tên, năm sinh, sốgiường, khoa lâm sàng), nội dung xét nghiệm.
- Bước 3: Chuẩn bị mẫu của bệnh nhân: ly tâm ống máu của bệnh nhân với tốc độ 3000 vòng / phút, trong vòng 1 phút.
- Bước 4: Pha hồng cầu cần định nhóm thành 5%( 1 thể tích hồng cầu trong 19 thểtích nước muối 0,9%).
- Bước 5: Chuẩn bị 5 ống nghiệm sạch, khô ghi nhãn lần lượt CA, CB. CAB, HC A, HC B và ghi tên bệnh nhân, số giường khoa lâm sàng trên ống nghiệm. Nếu đánh số trên ống máu của bệnh nhân thì ghi số tương ứng trên ống nghiệm.
- Bước 6: Nhỏ 1 giọt anti- A vào ống nghiệm đã ghi nhãn CA, 1 giọt anti-B vào ống đã ghi nhãn CB và 1 giọt anti AB vào ống nghiệm đã ghi nhãn
CAB.
16 - Bước 7: Nhỏ 2 giọt huyết thanh của bệnh nhân vào 2 ống HC A và HC B - Cho 1 giọt hồng cầu mẫu A vào ống nghiệm ghi HC A - Cho 1 giọt hồng cầu mẫu B vào ống nghiệm ghi HC B.
- Bước 8: Trộn đều bệnh phẩm và sinh phẩm một cách nhẹ nhàng.
- Bước 9: Ly tâm các ống nghiệm trên với tốc độ 1000 vòng / 1 phút trong vòng 20 giây.
- Bước 10: Đọc và ghi kết quả - Nhóm máu được xác định khi có sựtương đồng cả2 phương pháp huyết thanh mẫu và hồng cầu mẫu.
Kết quảcác trường hợp có thể xảy ra khi định danh nhóm máu hệ ABO bằng
phương pháp ống nghiệm được mô tả tại Bảng 1.3.