3.3 Phƣơng pháp nghiên cứu
3.3.11 Nghiên cứu các biến động trong quá trình lên men rƣợu
Chúng tôi đã sử dụng môi trƣờng Hansen đƣợc xem là môi trƣờng truyền thống của nấm men S. cerevisae để nghiên cứu các biến động trong quá trình lên men rƣợu. Tiến hành khảo sát các chỉ tiêu tại thời điểm sau 6 ngày lên men:
- Độ Brix - Chỉ số pH - Đƣờng sót - Độ rƣợu
- Acid tổng
+ Xác định sự khác nhau biến động giữa lên men của tế bào tự do và của tế bào cố định ở các lần tái sử dụng.
+ Xác định sự khác biệt của chế phẩm nấm men cố định ở các lần tái sử dụng. + Xác định số lần tái sử dụng của chế phẩm nấm men cố định.
Chƣơng 4 – KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.1 Một số đặc điểm sinh học của chủng Acetobacter xylinum BC16 khảo sát
trong đề tài
Từ chủng A. xylinum BC16 phịng thí nghiệm cung cấp, chúng tôi tiến hành kiểm tra một số đặc điểm sau:
4.1.1 Kiểm tra vi thể
Thông qua nhuộm Gram và quan sát dƣới kính hiển vi quang học với độ phóng đại 1000 lần chúng tơi nhận thấy vi khuẩn A. xylinum BC16 Gram âm, có dạng hình que, tế bào đứng riêng lẻ (hình 4.1).
Hình 4.1. Hình ảnh vi thể của A. xylinum BC16 (x1000 lần).
4.1.2 Kiểm tra đại thể
- Đặc điểm sinh trưởng của A. xylinum trên môi trường đặc:
Khuẩn lạc A. xylinum BC16 dạng tròn nhầy, bề mặt khuẩn lạc trơn bóng, rìa mép nhẵn, màu trắng đục và cấu trúc khuẩn lạc đồng nhất. Sau 5 ngày nuôi cấy, kích thƣớc trung bình của khuẩn lạc đạt từ 3-4 mm (hình 4.2).
Hình 4.2. Hình ảnh đại thể A. xylinum BC16 trên môi trƣờng đặc.
- Đặc điểm sinh trưởng của A. xylinum trên môi trường lỏng:
Khi nuôi cấy tĩnh, chủng A. xylinum BC16 tạo màng dày, bề mặt của màng phẳng, nhầy ƣớt và nổi trên mơi trƣờng lỏng (hình 4.3). Trong khi đó, dịch của mơi trƣờng lỏng này trong, khơng có khả năng tạo huyền phù.
4.1.3 Đặc điểm sinh hóa
Sau khi quan sát đại thể và vi thể chúng tôi tiến hành 7 bƣớc kiểm tra đặc điểm của Acetobacter xylinum. Kiểm tra các đặc điểm sinh hóa thể hiện đặc điểm định
danh loài Acetobacter xylinum. Kết quả kiểm tra các đặc điểm sinh hóa (Bảng 4.1). Bảng 4.1. Kết quả kiểm tra các đặc điểm sinh hóa.
STT Đặc điểm Hiện tƣợng Kết quả (+/-)
1 Oxy hóa ethanol thành acetic acid.
Môi trƣờng chuyển màu vàng
sau đó chuyển thành xanh lục. +
2 Catalase. Sủi bọt khí. +
3 Sinh trƣởng trên môi
trƣờng Hoyer. Sinh khối không phát triển -
4 Chuyển hóa glucose thành acid.
Vịng sáng xung quanh khuẩn
lạc. +
5 Chuyển hóa glycerol thành dihydroxy acetone.
Vịng CuO xuất hiện quanh
khuẩn lạc. +
6 Kiểm tra khả năng sinh
sắc tố nâu. Khơng có sắc tố nâu. -
7 Kiểm tra khả năng tổng hợp cellulose.
Váng vi khuẩn xuất hiện màu
lam. +
Chúng tôi tiến hành thực hiện lần lƣợt những khảo sát trên vì đây là khâu ban đầu nhằm mục đích kiểm tra và khẳng định giống Acetobacter xylinum.