CHƯƠNG 3 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.2. Khảo sát một số hoạt tính sinh học của nấm Ophiocordyceps sobolifera
3.2.1. Hoạt tính chống oxy hóa invitro trong các mơ hình hóa học
Tiến hành tách chiết theo sơ đồ ở mục 2.5.2, thu được cao nước và cao ethanol với tỉ lệ 6,20 ± 0,07% và 4,27 ± 0,04% so với khối lượng mẫu nấm ban đầu.
Các chất chống oxy hoá trong thiên nhiên thường là hỗn hợp của nhiều cấu tử có cấu trúc hóa học và nhóm chức khác nhau, vì vậy chúng thường chống oxy hóa theo nhiều chức năng và phương thức khác nhau. Do đó, một phương pháp đánh giá theo một mơ hình khảo sát chỉ mơ tả một khía cạnh nào đó của khả năng chống oxy hóa [7]. Luận án khảo sát hoạt tính chống oxy hóa theo 2 mơ hình khác nhau.
3.2.1.1. Hoạt tính chống oxy hóa theo mơ hình phosphor molybdenum
Kết quả xác định lực chống oxy hóa tổng của cao nước và cao ethanol chiết xuất từ mẫu nấm O. sobolifera so sánh với mẫu G. lucidum trồng ở Thừa Thiên Huế được khảo sát trong cùng phịng thí nghiệm và cùng điều kiện thí nghiệm, để so sánh kết quả, được thể hiện ở hình 3.11.
Hình 3.11. Lực chống oxy hóa tổng của cao nước và cao ethanol
trong mẫu nghiên cứu và G. lucidum
Kết quả trên cho thấy lực chống oxy hóa tổng của các mẫu xác định ở cùng nồng độ đều biến thiên tăng theo chiều tăng nồng độ, tuy nhiên tốc độ biến thiên khác nhau. Lực chống oxy hóa tổng của cao nước và cao ethanol của O. sobolifera gần bằng
nhau, cao hơn cao nước nhưng thấp hơn cao ethanol của G. lucidum.
Trên cơ sở kết quả này, quy về tương đương tổng hàm lượng chất chống oxy hóa có trong mẫu nghiên cứu về mg gallic acid/1g mẫu hay mg ascorbic acid/1g. Xây dựng đường chuẩn cho phản ứng phosphor molybdenum với chất chuẩn là gallic acid và ascorbic acid trong khoảng nồng độ từ 0,1 đến 0,5 mg/mL (phụ lục: Hình P8 và Hình P9). Kết quả, thu được phương trình hồi quy tuyến tính tương ứng:
Gallic acid: Abs = 1,9343CGA + 0,2435; R2 = 0,9987 Ascorbic acid: Abs = 4,7727 CAS - 0,0055; R2 = 0,9999
Lực chống oxy hóa của các mẫu thể hiện cao nhất ở nồng độ 0,5 mg/mL, hàm lượng chất chống oxy hóa như sau:
- Trong cao nước: 7,87 ± 0,11 mg ascorbic acid/g mẫu (n=3) Hoặc 12,72 ± 0,29 mg gallic acid/g mẫu (n=3) - Trong cao ethanol: 3,55 ± 0,37 mg ascorbic acid/g mẫu (n=3)
Hoặc 5,37 ± 0,91 mg gallic /g mẫu (n=3) 0 0,05 0,1 0,15 0,2 0,25 0,3 0,2 0,3 0,4 0,5 Mật độ q uan g Nồng độ (mg/mL)
Cao ethanol O.sobolifera Cao nước O.sobolifera Cao ethanol G.lucidum Cao nước G.lucidum
Hàm lượng chất chống oxy hóa trong cao nước O. sobolifera cao gấp 2 lần so với cao ethanol O. sobolifera cho thấy tiềm năng chống oxy hóa của cao nước cao hơn so với cao ethanol trong mơ hình khảo sát.
Qua tổng quan tài liệu, chưa tìm thấy cơng trình nghiên cứu nào khác về đánh giá hoạt tính chống oxy hóa của các lồi thuộc chi Cordyceps trong mơ hình phosphor molybdenum nên khơng có cơ sở để so sánh.
3.2.1.2. Hoạt tính chống oxy hóa theo mơ hình bắt gốc tự do DPPH
Kết quả đánh giá hoạt tính chống oxy hóa của các cao chiết từ O. sobolifera trong mơ hình bắt gốc tự do DPPH được thể hiện trong Bảng 3.9.
Bảng 3.9. Tỉ lệ bắt gốc tự do DPPH (%) của cao nước và cao ethanol từ nấm O. sobolifera
Nồng độ (mg/mL) Tỉ lệ bắt gốc tự do DPPH (%)
Cao nước Cao ethanol
2,0 72,73 72,43 1,5 67,12 67,12 1,0 52,02 58,15 0,8 43,92 55,49 0,6 33,38 44,27 0,4 19,31 14,29 IC50 (mg/mL) 0,95 0,70
Qua bảng 3.9, nhận thấy rằng, khả năng bắt gốc tự do của các mẫu khảo sát đều tăng theo nồng độ. Giá trị IC50 cho thấy cao ethanol có hoạt tính cao hơn cao nước nhưng khơng nhiều. Ở nồng độ 2 mg/mL, các cao chiết đều bắt trên 70% gốc tư do DPPH, chứng tỏ mẫu nghiên cứu có hoạt tính chống oxy hóa cao hơn lồi Cordyceps
sinensis trong nghiên cứu [26] (bắt được 60% gốc tự do DPPH). Thực nghiệm trên
cũng cho thấy cao ethanol O. sobolifera được ni cấy có hoạt tính cao hơn nấm Linh chi Ganoderma lucidum trong công bố [99]: ở nồng độ 1 mg/mL tỉ lệ bắt gốc tự do DPPH là 54,14%.
Như vậy, cao nước và cao ethanol từ nấm O. sobolifera đều có hoạt tính chống oxy hóa xấp xỉ nhau trong cả 2 mơ hình khảo sát. Hoạt tính chống oxy hóa của mẫu cao hơn so với loài Cordyceps sinesis cũng như G. lucidum trong các nghiên cứu trước đây.
Cao nước cung cấp lượng chất chống oxy hóa lớn hơn gấp 2 lần so với cao ethanol, vì vậy được chọn để khảo sát hoạt tính bảo vệ thận in vivo trên chuột nhắt trắng.