CHƯƠNG 2 : NGUYÊN VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4. Phương pháp nghiên cứu
2.4.2. Phương pháp phân tích sử dụng trong nghiên cứu
2.4.2.1. Xác định tỷ lệ thu hồi vỏ quả
Xác định tỷ lệ thu hồi vỏ quả (%) theo cơng thức: H (%) = m1/m2 ×100
Trong đó: H: tỷ lệ thu hồi vỏ quả (%)
m1: Khối lượng vỏ quả thu được sau khi lấy phần thịt quả (g)
m2: Khối lượng nguyên liệu ban đầu (khối lượng quả thanh long) (g)
2.4.2.2. Xác định tỷ lệ thu hồi sau khi cắt tai vỏ (%)
Khảo sát tỷ lệ vỏ thanh long sau khi cắt bỏ tai vỏ, qua đó đánh giá được tiềm năng sử dụng vỏ quả thanh long làm nguồn nguyên liệu chiết tách pectin. Tiến hành xác định phần trăm khối lượng từng thành phần của quả thanh long như tỷ lệ thu hồi sau khi cắt bỏ tai vỏ (%).
Tỷ lệ thu hồi vỏ quả sau khi cắt bỏ tai vỏ (%) được tính như sau:
𝐻% = 𝑚1
𝑚2 x 100
Trong đó: H: Hiệu suất thu hồi vỏ quả sau khi cắt bỏ tai vỏ (%) m1: Khối lượng vỏ quả thu được sau khi cắt bỏ tai vỏ (g)
2.4.2.3. Xác định tỷ lệ thu hồi bột vỏ thanh long
Sau khi thu hồi được vỏ thanh long sau khi cắt bỏ tai vỏ. Vỏ thanh long được cắt và sấy khô để xác định tỷ lệ thu hồi bột vỏ thanh long (%).
Tỷ lệ thu hồi vỏ quả sau khi cắt bỏ tai vỏ (%) được tính như sau:
𝐻% = 𝑚1
𝑚2 x 100
Trong đó: H: Hiệu suất thu hồi bột vỏ thanh long sau khi vỏ đã được sấy khô (%) m1: Khối lượng bột vỏ thanh long sau khi vỏ đã được sấy khô (g) m2: Khối lượng nguyên liệu trước khi sấy (g)
2.4.2.4. Xác định hiệu suất thu hồi pectin
Hiệu suất thu hồi pectin được xác định theo phương pháp được mô tả bởi Shan Qin Liew và cộng sự, (2014). Pectin thu được sau khi được sấy cho đến khi đạt trọng lượng không đổi. Hiệu suất phần trăm của pectin vỏ quả được xác định bằng số gam sản phẩm (pectin) thu được trên 10 g bột vỏ quả được sử dụng:
𝐻% = 𝑘ℎố𝑖 𝑙ượ𝑛𝑔 𝑝𝑒𝑐𝑡𝑖𝑛 𝑡ℎ𝑢 đượ𝑐 (𝑔)
10𝑔 𝑏ộ𝑡 𝑣ỏ 𝑡ℎ𝑎𝑛ℎ 𝑙𝑜𝑛𝑔 x 100
2.4.2.5. Xác định mức độ ester hóa DE
Phương pháp chuẩn độ acid – ba zơ (Food chemical Codex, FCC, 1981; trích dẫn bởi Lin et al., 1990). Sau khi tính tốn được giá trị DE thì xác định DE lớn hơn hay nhỏ hơn 50% để kết luận là HMP hay LMP tương ứng. Các bước như sau:
Cân 0,1g pectin thành phẩm và làm ướt bằng cồn 70% v/v. Thêm 20 ml nước cất, khuấy đều và ủ ở 450C trong bể điều nhiệt cho đến khi pectin hịa tan hồn tồn. Thêm vào 3 giọt phenolphthalein vào. Chuẩn độ bằng NaOH 0,1N đến khi màu hồng xuất hiện thì dừng. Ghi lại kết quả chuẩn độ Vd.
Sau đó thêm 10ml NaOH 0,1N vào để trung hòa acid polygalacturonic. Mẫu được đậy nắp và lắc mạnh, sau đó để ở nhiệt độ phịng trong 2 giờ để khử ester pectin. Thêm 10ml HCl 0,1N vào để trung hòa NaOH và lắc mẫu đến khi màu hồng biến mất. Thêm 3 giọt phenolphthalein và chuẩn độ với NaOH 0,1N cho đến khi màu hồng xuất hiện. Ghi lại kết quả Vs.
Cơng thức:
𝐷𝐸 (%) = 𝑉𝑠
𝑉𝑑+𝑉𝑠x 100
Trong đó: Vd: thể tích NaOH 0,1N chuẩn độ ban đầu (ml) Vs: thể tích NaOH 0,1N chuẩn độ lúc sau (ml)
2.4.2.6. Xác định độ ẩm
Xác định độ ẩm bằng phương pháp sấy khô đến khối lượng không đổi bằng máy sấy KERN DBS 60 – 3.
2.4.2.7. Xác định pH
Xác định pH của dịch trích ly bằng máy đo pH hiệu WalkLab, model: TL 9000.
2.4.2.8. Xác định hình thái học bề mặt dưới kính hiển vi điện tử quét (SEM)
Xác định hình thái học bề mặt dưới kính hiển vi điện tử quét (Scanning Electron Microscope). Là một loại kính hiển vi điện tử có thể tạo ra ảnh với độ phân giải cao của bề mặt mẫu vật bằng cách sử dụng một chùm điện tử (chùm các electron) hẹp quét trên bề mặt mẫu. Việc tạo ảnh của mẫu vật được thực hiện thông qua việc ghi nhận và phân tích các bức xạ phát ra từ tương tác của chùm điện tử với bề mặt mẫu vật. Sử dụng phương pháp này để đánh giá ảnh hưởng của điều kiện trích ly đến cấu trúc pectin thu được. Mẫu được xác định bằng thiết bị SEM S-4800.