CHƢƠNG 2 : ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.4. Chuẩn bị các dung dịch hóa chất
2.4.1. Pha dung dịch chuẩn gốc
Đƣờng hóa học (Aspartam, Saccarin, Acesulfam-K) đƣợc pha trong nƣớc. Chất bảo quản (Axit sorbic, Axit benzoic) hòa tan trong Acetonitril. Cụ thể:
- Đƣờng hóa học (Aspartam, Saccarin, Acesulfam-K): Cân chính xác 0,1 g mỗi loại chuẩn trên cho vào cốc có mỏ 50ml, hịa tan bằng nƣớc cất, chuyển vào bình định mức 100 ml, định mức bằng nƣớc cất tới vạch, sau đó đem rung siêu âm 30 phút thu đƣợc các dung dịch gốc có nồng độ 1000 µg/ml.
- Chất bảo quản (Axit sorbic, Axit benzoic): Cân chính xác 0,1 g mỗi loại chuẩn trên cho vào cốc có mỏ 50ml, hịa tan trong 10 ml acetonitril cho đến khi tan hồn tồn. Chuyển vào bình định mức 100ml, tráng rửa cốc và định mức bằng nƣớc cất tới vạch thu đƣợc các dung dịch gốc có nồng độ 1000 µg/ml.
Các dung dịch trên đƣợc bảo quản lạnh (nhiệt độ 2-40
C) trong 3 tháng.
Dung dịch chuẩn trƣớc khi sử dụng phải lắc đều và đem rung siêu âm trong vòng 15 phút. Tiến hành chạy lại dung dịch chuẩn trên máy sắc ký để xác định lại thời gian lƣu trƣớc mỗi ngày làm việc khác nhau.
2.4.2. Dung dịch chuẩn hỗn hợp làm việc của 5 chất phân tích 100 µg/ml
Hút chính xác 10 ml chuẩn gốc tƣơng ứng lần lƣợt của mỗi chất phân tích 1000 µg/ml cho vào bình định mức 100 ml và định mức đến vạch bằng nƣớc cất.
+ Các dung dịch chuẩn có nồng độ nhỏ hơn đƣợc pha từ dung dịch chuẩn làm việc, sử dụng trong ngày.
2.4.3. Pha thuốc thử
- Dung dịch NaOH 0,5M: Hòa tan 2,0 g NaOH trong 100 ml nƣớc cất
- Dung dịch K4Fe(CN)6 0,25M: Hòa tan 92 g K4Fe(CN)6 trong 1000 ml nƣớc
cất.
- Dung dịch (CH3COO)2Zn 0,25M: Cân 54,8g (CH3COO)2Zn.2H2O, thêm 32
2.4.4. Pha dung dịch đệm
* Dung dịch đệm Natri dihydrophotphat 5 mM có pH=7,5; pH=8,0; pH=8,2; pH=9,0; pH=9,5
- Cân 1 lƣợng tùy theo thể tích cần pha
- Pha trong khoảng 80% thể tích nƣớc; điều chỉnh về pH=7,5; pH=8,0; pH=8,2; pH=9,0; pH=9,5 bằng NaOH 0,5M trên máy đo pH rồi thêm nƣớc đủ đến vạch.
* Các dung dịch đệm Natri dihydrophosphat 1mM; 2,5mM; 7,5mM; 10mM (pH=8,2) cũng đƣợc pha tƣơng tự.
Tất cả các dung dịch đều đƣợc lọc qua màng lọc 0,2µm, rung siêu âm loại khí trƣớc khi sử dụng và đều đƣợc kiểm tra độ pH trƣớc khi sử dụng.