GIÁ TÁC DỤNG CỦA THUỐC VÀ HOẠT CHẤT CHỐNG LOÃNG XƢƠNG
Lỗng xƣơng là căn bệnh có diễn biến thầm lặng, khơng gây triệu chứng đặc hiệu cho đến khi xƣơng bị gãy [4]. Do đó, những đánh giá cận lâm sàng nhƣ việc
xác định mật độ xƣơng khống hóa sẽ cung cấp thơng tin để chẩn đốn lỗng xƣơng cũng nhƣ nguy cơ gãy xƣơng hoặc tiên lƣợng lƣợng thuốc điều trị gãy xƣơng do loãng xƣơng [5]. Trƣớc đây, loãng xƣơng đƣợc đánh giá trên sự thay đổi tổ chức của mô xƣơng (Bone Biopsy – Xét nghiệm sinh hóa) nhờ định lƣợng một số chất của quá trình tạo xƣơng và quá trình hủy xƣơng nhƣng độ nhạy thấp [49] hoặc dựa vào hình ảnh X quang quy ƣớc (thƣa các bè xƣơng, xẹp đốt sống, …), tuy nhiên các biểu hiện trên xƣơng X quang thƣờng muộn và lúc đó khối lƣợng xƣơng đã mất khoảng 30-50% [5, 81]. Ngày nay chẩn đốn lỗng xƣơng dựa trên phƣơng pháp đo mật độ xƣơng (bone mineral density – BMD) [55]. Có nhiều phƣơng pháp giúp xác định BMD hiệu quả nhƣ: đo hấp thụ photon đơn (Single photon absorptiometry – SPA), đo hấp thụ photon kép (Dual photon absorptiometry – DPA), đo độ hấp thụ tia X năng lƣợng kép (Dual energy X-ray absorptiometry – DEXA), chụp cắt lớp điện toán định lƣợng (Quantitative computed tomography – QCT), siêu âm định lƣợng (Quantitative ultrasonometry – QUS),…[44, 73] trong đó phƣơng pháp DEXA đƣợc coi là tiêu chuẩn vàng cho chẩn đốn lỗng xƣơng với nhiều ƣu điểm nhƣ độ chính xác cao, lƣợng tia X vào cơ thể thấp hơn nhiều so với các phƣơng pháp SPA, DPA, QCT,… [81].
Đối với những bệnh nhân có mật độ xƣơng thấp, nhất là phụ nữ sau mãn kinh thì các phƣơng pháp nhƣ DEXA, QCT sẽ đƣa ra giá trị BMD nhanh và chính xác để dự đốn khả năng mắc lỗng xƣơng,ví dụ nhƣ việc xác định BMD của xƣơng hơng để dự đốn nguy cơ gãy xƣơng [17]. Trong nghiên cứu lâm sàng về đánh giá hiệu quả chống loãng xƣơng của một số loại thuốc nhƣ Bisphosphonat [16, 46], Denosumab [61] thì giá trị về BMD ở các vị trí xƣơng khác nhau của mỗi bệnh nhân đƣợc xác định bằng phƣơng pháp DEXA là phổ biến nhất. Ngoài ra, trong một số nghiên cứu đánh giá hiệu quả điều trị lỗng xƣơng với Alendronat thì phƣơng pháp X-rays đƣợc dùng để quan sát sự thay đổi hay bị dị dạng của cấu trúc xƣơng cột sống [32, 46].
Trong nghiên cứu loãng xƣơng, phụ thuộc vào mơ hình động vật đƣợc lựa chọn mà phƣơng pháp đánh giá BMD trên các cấu trúc xƣơng phù hợp đƣợc sử dụng. Với mơ hình chuột bị cắt bỏ buồng trứng, để đánh giá hiệu quả tác dụng điều trị mất xƣơng khi kết hợp bisphosphonat và vitamin K2, BMD đƣợc đo bằng pQCT trên xƣơng đùi (femur) [6, 70], hay bằng DEXA trên xƣơng chày (tibia) [36], và kết hợp với micro-CT đƣa ra hình ảnh 2D, 3D về cấu trúc xƣơng này [35, 36]. Với cùng mục đích nghiên cứu đánh giá tác dụng của thuốc điều trị lỗng xƣơng trên mơ hình chó hay thỏ, BMD của cột sống đƣợc đo bằng DEXA [51], hoặc chụp X quang xƣơng sƣờn để phát hiện gãy xƣơng [50].
Đặc biệt, đối với mơ hình cá (medaka, zebrafish) thì việc xác định BMD là rất khó khăn khi dùng những phƣơng pháp nhƣ DEXA, QCT, QUS,…vì những phƣơng pháp này quá hiện đại, phức tạp, đắt tiền và độ phân giải không đủ cao để áp dụng với kích thƣớc cơ thể cá quá nhỏ [10]. Do đó, trên cá trƣởng thành, thay vì định lƣợng sự mất xƣơng, các phƣơng pháp chụp X quang [18, 87], micro-CT [18, 71], OPT (Optical projection tomography) [10] đƣợc sử dụng để quan sát phát hiện hiện tƣợng xƣơng dị dạng hay gãy xƣơng. Ngồi ra, cũng có thể quan sát hình ảnh xƣơng
in vivo trên cá sống chuyển gen hay, trên tiêu bản cá đƣợc nhuộm xƣơng bằng
Alizarin Red [10, 78]. Tuy nhiên, nghiên cứu của chúng tôi thực hiện chủ yếu trên ấu trùng cá với kích thƣớc chỉ khoảng 3-5 mm nên không thể áp dụng những phƣơng pháp đo BMD nhƣ DEXA, QCT hay ngay cả với micro-CT. Do vậy, việc xây dựng phƣơng pháp giúp định lƣợng tƣơng đối mức độ khống hóa qua đó đánh giá đƣợc mức độ mất xƣơng trên mơ hình cá, đặc biệt là mơ hình cá chuyển gen