CHƢƠNG 2 : THỰC NGHIỆM
2.4. Phƣơng pháp phân tích
2.4.1. Phương pháp xử lý mẫu.
Mẫu phân tích trƣớc khi xử lý đƣợc làm sạch bằng nƣớc cất và cắt nhỏ cỡ 2 mm2 bằng dao cạo.
Mẫu đƣợc cân với khối lƣợng khoảng 0,05 g chính xác tới 0,0001g trên cân phân tích, chuyển mẫu vào ống thủy tinh 20ml. Thêm 5 ml THF rung siêu âm từ 30 phút đến 2 giờ ở 40oC cho tới khi mẫu tan hoàn toàn. Tiếp theo cho 5ml n-hexan để kết tủa polyme kết hợp làm mát, khi kết tủa ổn định thì lọc bỏ kết tủa, dịch lọc đem
cô quay chân không ở 40oC để loại THF và n-hexan còn dƣ. Dịch thu đƣợc đƣợc hòa tan trong 1 ml ACN, pha lỗng các nồng độ thích hợp, lọc qua màng lọc 0,45 µm và tiến hành phân tích HPLC. Mẫu thêm chuẩn cũng đƣợc thực hiện với cùng quá trình trên để xác định hiệu suất thu hồi của quá trình xử lý mẫu.
2.4.2. Phương pháp phân tích.
Phép phân tích các phtalat đƣợc thực hiện trên hệ sắc ký lỏng hiệu năng cao HPLC của Shimadzu, kết nối với hệ bơm gồm 4 kênh, bộ điều khiển, lò cột, bộ trộn dung mơi và detector photo-diode-array (PDA) đặt ở bƣớc sóng 224 nm. Các điều kiện chạy máy đƣợc tóm tắt nhƣ sau:
- Nhiệt độ cột 300C - Van bơm mẫu 25 µl
- Hệ pha động gồm 2 kênh. Kênh A là nƣớc. Kênh B là ACN.
- Chế độ gradient tỉ lệ thành phần pha động: từ 0 – 8 phút chạy hệ pha động ACN/H2O với tỉ lệ 70/30, tiếp đó tăng tỉ lệ ACN lên 100% trong 2 phút từ phút thứ 8 đến phút thứ 10 và giữ tỉ lệ này trong 12 phút. Sau đó giảm tỉ lệ pha động xuống 70/30 nhƣ ban đầu trong 2 phút và giữ tỉ lệ này trong 6 phút. Tổng thời gian chạy 1 mẫu là 30 phút. Tốc độ pha động đƣợc giữ trong suốt quá trình chạy mẫu là 0,5 ml/phút .