CHƯƠNG 2 : THỰC NGHIỆM
2.3. Thông tin mẫu và xử lý mẫu
- Phân tích hàm lượng moxifloxacin trong chế phẩm thuốc chứa moxifloxacin
hiện đang lưu hành trên thị trường Hà Nội gồm:
o Mẫu thuốc viên nén AVIFLOX.
Đặc điểm: dạng viên nén bao phim đóng vỉ, 10 viên/vỉ.
Xuất xứ: sản xuất bởi ATRA PHARMACEUTICALS LIMITED – Ấn Độ. Số lô sản xuất: A60201.
Thành phần: mỗi viên thuốc chứa 400 mg MOX còn lại là các tá dược khác.
o Mẫu thuốc viên nén FLOXSAFE.
Đặc điểm: dạng nén bao phim đóng vỉ, 5 viên/vỉ.
Xuất xứ: là sản phẩm của công ty MSN Laboratories Private Limited – Ấn Độ. Lô sản xuất: BT1609022A.
Thành phần: mỗi viên nén bao phim chứa 400 mg Mox còn lại là các tá dược khác.
o Mẫu thuốc viên nén AVELOX.
Đặc điểm: dạng nén bao phim đóng vỉ, 5 viên/vỉ.
Thành phần: mỗi viên thuốc chứa 400 mg MOX còn lại là các tá dược khác.
- Phân tích hàm lượng moxifloxacin trong mẫu huyết tương bệnh nhân tại Trung
tâm chống độc, Bệnh viện Bạch Mai. Mẫu huyết tương được lấy từ một bệnh nhân đang điều trị bằng thuốc Avelox 400mg/250ml theo cách thức tiêm truyền; mẫu lấy sau 1 giờ, 2 giờ và 3 giờ truyền.
- Phân tích hàm lượng moxifloxacin trong mẫu nước tiểu bệnh nhân tại Trung
tâm chống độc, Bệnh viện Bạch Mai. Mẫu nước tiểu trắng lấy từ người khỏe mạnh bình thường. Mẫu thử là mẫu nước tiểu được lấy từ một bệnh nhân uống thuốc Avelox 400mg; mẫu lấy sau 1 giờ uống.
2.3.2. Xử lý mẫu
2.3.2.1. Đối với mẫu thuốc
Cân 10 viên thuốc, xác định khối lượng trung bình của 1 viên, nghiền mịn bằng cối mã não, trộn đều.
Sau đó cân một lượng chính xác ~0,1 (g) mỗi mẫu thuốc trên cân phân tích, chuyển hết lượng thuốc vừa cân vào cốc, thêm nước cất, rung siêu âm trong 15 phút, lọc qua màng lọc 0,45𝜇l, tráng rửa màng lọc 3 lần bằng nước cất, cuối cùng tiến hành định mức tới vạch mức 25 ml bằng nước cất và lắc đều.
2.3.2.2. Đối với mẫu huyết tương
- Mẫu chuẩn:
Dung dịch chuẩn gốc: Hòa tan moxifloxacin trong methanol để thu được dung dịch có nồng độ chính xác 10-3 mol/lít.
Mẫu chuẩn: Lấy một thể tích xác định dung dịch chuẩn gốc, bốc hơi dung môi thu được cắn (nhiệt độ 50 ℃ , dưới luồng khí Nitơ). Hịa tan cắn trong huyết tương trắng bằng cách vortex 2500 vòng/phút trong vòng 10 phút. Dịch thu được là mẫu chuẩn có nồng độ xác định.
Mẫu thử: Mẫu huyết tương của người sử dụng thuốc chứa thành phần moxifloxacin.
- Xử lý mẫu
Lấy 1ml mẫu chuẩn/mẫu thử hoặc mẫu trắng loại protein bằng cách thêm 5 ml metanol, lắc xốy 2500 vịng/phút trong vịng 10 phút, ly tâm trong 15 phút ở 8000 vòng/phút. Lấy 4 ml dịch nổi, bốc hơi dung mơi bằng N2 ở 50 oC, hịa tan cắn thu được trong 1 ml nước cất 2 lần. Lọc mẫu qua màng 0,45µm thu được dịch để định lượng.
2.3.2.3. Đối với mẫu nước tiểu
- Mẫu chuẩn:
Dung dịch chuẩn gốc: Hòa tan moxifloxacin trong methanol để thu được dung dịch có nồng độ chính xác 10-3 mol/lít.
Mẫu chuẩn: Lấy một thể tích xác định dung dịch chuẩn gốc, bốc hơi dung môi thu được cắn (nhiệt độ 50 ℃, dưới luồng khí Nitơ). Hịa tan cắn trong nước tiểu trắng
bằng cách vortex 2500 vòng/phút trong vòng 10 phút. Dịch thu được là mẫu chuẩn có nồng độ xác định.
- Xử lý mẫu
Pha loãng mẫu chuẩn/mẫu thử hoặc mẫu trắng bằng nước cất 2 lần và lọc mẫu qua màng 0,45µm thu được dung dịch pha lỗng thích hợp để định lượng.