CHƯƠNG 2 : THỰC NGHIỆM
2.4. Thiết bị, dụng cụ và hóa chất sử dụng
2.4.1. Thiết bị
Các thiết bị được sử dụng trong quá trình nghiên cứu gồm:
- Thiết bị quang phổ hấp thụ nguyên tử UV-Vis Agilent 8453.
- Thiết bị quang phổ huỳnh quang Brolight 6102.
- Thiết bị đo pH hãng HANNA Instruments.
- Thiết bị rung siêu âm, có gia nhiệt của hãng ULTRASONIC LC 30H.
- Cân phân tích của hãng Mettler Toledo, độ chính xác 0,0001g.
- Máy li tâm
- Vortex mixer
- Thiết bị cơ quay chân khơng
2.4.2. Dụng cụ
- Bình định mức: 5,00; 10,00; 25,00; 50,00; 100,0 và 500,0 ml (Merck).
- Pipet 1,00; 2,00; 5,00 và 10,00 ml.
- Micropipet 1-10 µl; 10-100 µl và 100-1000 µl.
- Cuvet huỳnh quang
- Cốc thủy tinh 100 ml, 200 ml và 500 ml.
- Phễu thủy tinh, đũa thủy tinh.
- Màng lọc 0,45µm.
- Khuấy từ.
- Đĩa cân, thìa cân, giấy lau.
2.4.3. Hóa chất và chuẩn bị các dung dịch
- Chất chuẩn Moxifloxacin HCl : C21H24FN3O4 HCl (94,36%)
- HCl 0,1M
- Tris(hydroxymethyl) aminomethane (Aldrich, 99,8%);
- Sodium dodecyl benzene sulfonate (SBDS) (Aldrich, 99,8%);
- Methanol
❖ Chuẩn bị các dung dịch
- Dung dịch chuẩn gốc: Cân chính xác 0,047g Moxifloxacin HCl trên cân phân tích, hịa tan bằng nước cất 2 lần trong cốc, rung siêu âm 15 phút, chuyển vào bình định mức 10,00 ml, định mức đến vạch bằng nước cất, thu được dung dịch chuẩn gốc nồng độ 10-2M moxifloxacin.
- Dung dịch Eu3+: Cân chính xác 0,018 g Eu2O3 trên cân phân tích, hịa tan trong HCl, rồi định mức đến 10 ml bằng nước cất 2 lần, được dung dịch Eu3+ nồng độ 10- 2M. Sau đó pha lỗng 10 lần bằng nước cất 2 lần thu được dung dịch Eu3+ nồng độ 10-3M .
- Dung dịch sodium dodecyl benzene sulfonate (SBDS): cân chính xác 0,2439g SBDS trên cân phân tích, hịa tan trong bình định mức 100 ml, siêu âm 30 phút rồi định mức tới vạch bằng nước cất 2 lần, được dung dịch SBDS có nồng độ 7.10-3M.
- Dung dịch đệm Tris-HCl: Cân chính xác 12,1g Tris-base C4H11NO3 trên cân phân tích, hịa tan bằng nước cất 2 lần trong cốc, siêu âm 15 phút, sau đó chuyển dung dịch vào bình định mức 1 lít, định mức tới vạch. Điều chỉnh pH bằng dung dịch HCl 0,1M để thu được các dung dịch đệm có pH cần thiết trong khoảng 7,0 – 10,0.
2.5. Khảo sát các điều kiện phân tích Moxifloxacin theo phương pháp phổ huỳnh quang
Moxifloxacin (MOX) tạo thành phức chất huỳnh quang với ion kim loại europi (Eu3+). Phân tử chất phân tích được kích thích một bước sóng nhất định (ex) và phát xạ ở bước sóng khác (em). Phổ phát xạ thu được của phức dùng để định lượng hàm lượng MOX. Cường độ tín hiệu huỳnh quang của phức Eu3+- MOX tỷ lệ với nồng độ MOX trong dung dịch cần phân tích. Tuy nhiên, cường độ tín hiệu huỳnh quang của
phức Eu3+- MOX phụ thuộc pH, khoảng thời gian ổn định phức, sự có mặt của chất hoạt động bề mặt (SDBS),… Vì vậy, các điều kiện cần khảo sát trước khi xây dựng quy trình phân tích là: - Bước sóng kích thích (ex) - Bước sóng phát xạ (em) - Thời gian ổn định phức - Ảnh hưởng của pH - Hàm lượng Eu3+
- Ảnh hưởng của chất hoạt động bề mặt (SDBS)