2. TỔNG QUAN TÀI LIỆU
3.6.5 Phương pháp nhuộm cố ựịnh mẫu và bảo quản mẫu
3.6.5.1. Ký sinh trùng ựơn bào:
Cố ựịnh bằng Shaudine hoặc ựể khô trong không khắ, bảo quản trong cồn 70%, nhuộm màu bằng Hematocxyline. Trùng bánh xe nhộm màu bạc nitrat 2% . Gắn tiêu bản bằng nhựa Canada.
- Phương pháp nhuộm bạc nitrat 2%: Các lamen có mẫu ựã giữ khô, xếp vào ựĩa peptri có chứa dung dịch AgNO3 2% có mặt trùng ngửa lên trên. ựậy nắp ựĩa peptri ựể tất cả vào buồng tối trong thời gian từ 10 Ờ 15 phút, lấy ra rửa qua nước cất 3 Ờ 4 lần. Tất cả các kắnh sau khi rửa chuyển sang ựĩa nước cất khác ựể mặt có trùng hướng lên trên, ựem phơi dưới ánh sáng mạnh của mặt trời trong thời gian từ 30-45 phút hoặc hơn phụ thuộc vào cường ựộ ánh sáng. Trong quá trình nhuộm phải kiểm tra sự bắt màu của tiêu bản nhuộm sau 10 phút kiểm tra 1 lần. Nếu quan sát thấy rõ các cơ quan của trùng thì ngừng phơi. Rửa lại mẫu trong nước cất, ựể khô tự nhiên trong không khắ, gắn tiêu bản bằng nhựa canada và ghi nhãn cho mỗi mẫu.
3.6.5.2. Sán lá ựơn chủ (Monogenea) và trùng bào tử có sợi tơ (Myxobolus, Thelohanellus, Henneguya)
Không cần nhuộm, có thể làm tiêu bản trực tiếp. Gắn tiêu bản bằng Gelatine Ờ Glycerine. Riêng sán lá ựơn chủ ựể quan sát các cấu tạo bằng kitin thỉ nhỏ thêm 1 Ờ 2 giọt dung dịch ammoniac 2%.
Trường đại học Nông Nghiệp Hà Nội Ờ Luận văn thạc sĩ khoa học nông nghiệp ẦẦẦẦẦẦẦẦẦ. 35
3.6.5.3. Sán lá Trematoda, sán dây Cestoida, Diplozoom, Benedenia, Giun ựầu móc (Acanthocephala).
Ép mỏng, cố ựịnh và bảo quản bằng cồn 70%. Nhuộm màu bằng Carmine, gắn tiêu bản bằng nhựa Canada.
3.6.5.4. Giun tròn Nematoda
Cố ựịnh trong dung dịch cồn etylic 70% ựun nóng, bảo quản trong dung dịch cồn etylic 70%. Quan sát trong dung dịch Acid Lactic hoặc Grycerine.
3.6.5.5. đỉa (Piscicola)
Cố ựịnh bằng Formaline 1-2%.
3.6.5.6. Giáp xác (Crustacea)
Cố ựịnh và bảo quản bằng cồn 70%. Gắn tiêu bản bằng nhựa Canada.