CHƢƠNG 1 : TỔNG QUAN
3.2. Tổng hợp một số dẫn xuất của zerumbone và khảo sát hoạt tính chống ung
3.2.1. Tổng hợp 3-amino và 10 aminoZerumbone
Khi cho amoniac (NH3) tác dụng với Zerumbone theo đúng tài liệu [25] nhƣng thực hiện ở 25- 280C trong thời gian 7 ngày, sau khi tinh chế sản phẩm chúng tôi đã đƣợc một hỗn hợp 2 chất: 3- amino- 2,6,9,9 tetramethyl- (E,E)-
6,10- cycloundecadien -1- one (A) và 10- amino- 2,6,9,9- tetramethyl- (E,E)- 2,6- cycloundecadien- 1- one (B)
B A
Hình 3.2: Phƣơng trình phản ứng của zerumbone và amoniac
Sắc ký lớp mỏng sản phẩm với hệ dung môi n-hexan/EtOAc 5/1 v/v cho 2 vệt chất .
Vệt 1 có Rf = 0,65 màu nâu sậm với Vanillin/ H2SO4 Vệt 2 có Rf = 0,58 màu nâu hồng với Vanillin/ H2SO4
Cấu trúc phân tử của các sản phẩm A và B đƣợc chứng minh bằng các loại quang phổ:
+ Phổ IR của chúng (phụ lục 10 trang 71) cho thấy nhóm amin bậc 1 có NH2 = 3488 cm-1, nhóm cacbonyl có C=O = 1728 cm-1, liên kết đơi dạng E có hai nhóm thế có C=C = 1677cm-1 và CH = 917 cm-1 , liên kết đơi dạng E có ba nhóm thế có C=C = 1629 cm-1 và CH = 872 cm-1.
+ Khối phổ của sản phẩm chỉ cho một pic phân tử lƣợng có [M+] = 237 (phụ lục 11 trang 72)
+ Nhƣng phổ 13C- NMR thì cho 30 cacbon trong đó có 2 nhóm C=O có C= 202,26 ppm và 201,48 ppm, 8 cacbon olefin có độ chuyển dịch hóa học từ 120- 160 ppm, số cacbon còn lại (20C) nằm trong vùng trƣờng mạnh từ 0 47ppm (phụ lục 13 trang 74).
Trên phổ DEPT (phụ lục 14 trang 75) cho thấy rõ 7 nhóm CH trong đó có 5 nhóm CH của olefin trong vùng 120- 155ppm và 2 nhóm CH của cacbon liên kết với nhóm amino nằm trong vùng 40-47 ppm, có 7 nhóm CH2 và 8 nhóm CH3 ở vùng trƣờng mạnh. Đáng chú ý là nhóm CH3 dạng dublet có C= 8,2 ppm, H= 1,50ppm và nhóm CH3 dạng singlet có C= 16,30ppm , H= 1,60ppm.
Kết hợp các loại phổ chúng tôi nhận đƣợc hợp chất A trong sản phẩm nhờ dublet của 2 nhóm methyl ở vị trí 2, triblet của proton ở vị trí 3 có C= 40,02 ppm H= 2,08 ppm và 2 proton olefin ở vị trí 10 và 11 dạng E có C=155,4ppm, H= 6,7ppm; 1H,t,J = 16,2 và C= 126,10ppm, H = 6,00ppm 1H,t,J= 16,2. Điều này đƣợc khẳng định ở phổ COSYGP (phụ lục 15 trang 76).
Hình 3.4: Cơng thức cấu tạo của hợp chất A
Bảng 3.3 : Dữ liệu phổ NMR của hợp chất A Số C 13C 1H C ppm C* ppm H ppm Độ bội Số H J.Hz 1 202.3 202.0 2 42.1 55.3 2.51 qd 1H 7.3;1.6 3 40.2 53.1 2.08-2.02 m 1H 4 37.7 30.6 2.11-2.19 m 2H
5 38.4 38.0 2.32-2.43 m 2H 6 135.6 138.0 7 126.1 122.0 5.89 dd 1H 16.0;2.9 8 40.1 41.3 2.52-2.59 m 2H 9 40.1 39.9 10 155.5 151.7 6.76 d 1H 16.2 11 126.2 128.1 6.00 d 1H 16.2 12 8.2 6.0 1.54 d 3H 5.5 13 16.6 16.5 1.10 s 3H 14 26.2 22.9 1.06 s 3H 15 26.1 29.0 1.04 S 3H
(C*ppm : độ chuyển dịch của cacbon 13C của hợp chất A trong phổ 13C- NMR theo tài liệu của Takashi Kitsayama et al.,Tetrahedron 59(2003))
Hợp chất B trong hỗn hợp ZerNH2 đƣợc xác định căn cứ vào tín hiệu singlet gây ra bởi CH3 và triblet của proton ở C10: H = 2,16ppm, J=2,4Hz và triblet của proton ở C3 có C= 126,1ppm và H= 6,00ppm; J= 3,3Hz
Các dữ liệu quang phổ 1
H-NMR và 13C-NMR của hợp chất B đƣợc thể hiện trong bảng 3.4. Trong phổ NOEISY đã thể hiện rằng có tồn tại sự tƣơng tác giữa proton ở C10 và các proton ở C14, điều đó có nghĩa B là cấu hình R. Nhƣ vậy, có thể kết luận rằng tên của hợp chất B là: (R)- (2E, 6E)- 10- amino-2,6,9,9- tetramethylcycloundeca-2,6-dien-1-one.
Hình 3.5: Cơng thức cấu tạo của hợp chất B
Bảng 3.4: Số liệu phổ NMR của hợp chất B Số C 13C 1H-NMR C ppm H ppm Độ bội Số H J.Hz 1 201.5 2 121.5 3 126.1 6.00 t 1H 3.3 4 32.1 2.34 m 2H 5 33.5 2.89 m 2H 6 121.2 7 120.8 5.12 dd 1H 6.6; 6.3 8 33.4 2.55; 2.59 m 2H 9 33.3 10 37.5 2.16 t 1H 7.3 11 33.5 2.57 d 2H 7.4 12 16.3 1.60 s 3H 13 27.4 1.04 s 3H 14 26.2 1.06 s 3H 15 26.1 1.04 s 3H
Hàm lƣợng các chất A và B trong hỗn hợp đƣợc xác định bằng tỷ lệ điện tích pic của proton H3 trong hợp chất A và H10 trong hợp chất B trên tổng điện tích pic của 2 proton này. Kết quả tính tốn cho thấy A chiếm 39,43% hỗn hợp và B chiếm 60,67% hỗn hợp. Cơ chế phản ứng cộng hợp NH3 vào Zerumbone tạo ra hợp chất A đã đƣợc Takashi Kitayama và cộng sự đề cập đến năm 2003[38] và cấu hình của sản phẩm này đã đƣợc tác giả xác định bằng tia X.
X: -NH2; - NMe2
Hình 3.3: Phƣơng trình phản ứng của amin và zerumbone
Trong phổ NOESY của sản phẩm (phụ lục 18 trang 79) không thấy có sự tƣơng tác của proton ở vị trí 3 với các proton của nhóm methyl C12- điều này có nghĩa là H3 anti với nhóm CH3 và nhóm amin(X) và proton ở C2 là syn với nhau nhƣ chỉ ra trên hình 3.4.