Kỹ thuật làm việc với hệ thống sắc ký khí [11]

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu xây dựng phương pháp xác định đồng thời morphine, 6 monoacetyl morphine, methadone trong nước tiểu bằng sắc ký khí (Trang 36 - 38)

- Tác dụng của methadone đối với cơ thể [25]

 Áp dụng phương pháp chiết lỏng-lỏng với nhóm ma tuý Opiat

1.6.3. Kỹ thuật làm việc với hệ thống sắc ký khí [11]

1.6.3.1.Khí mang

Các khí mang thƣờng đƣợc sử dụng trong sắc ký khí gồm: hêli, nitơ, hyđro, argon… Việc lựa chọn phải đảm bảo các yêu cầu sau:

- Độ tinh khiết phải phù hợp với hoạt động của detector và yêu cầu tách. - Không đƣợc tƣơng tác với mẫu mà chỉ mang mẫu qua cột.

- Không thay đổi trạng thái lý học khi đi qua cột, an toàn khi sử dụng.

Các điểm cần chú ý khi sử dụng khí mang cho các detector khác nhau: - Với detector độ dẫn (TCD: Thermal conductivity detector) cần phải sử dụng khí mang có độ dẫn cao nhƣ hidrơ, hêli. Trong đó khí heli có ƣu điểm là không nguy hiểm nhƣng giá thành cao.

- Detector ion hóa ngọn lửa (FID: Flame ionization detector) có thể vận hành với tất cả các khí vơ cơ làm khí mang trừ oxy. Do giá thành rẻ, khơng nguy hiểm nên khí nitơ thƣờng đƣợc sử dụng. Nhƣng khi kết hợp với thiết bị khác, ví dụ, kết hợp sắc ký khí-khối phổ (GC- MS: Gas chromatography – mass spectrometry) thì phải sử dụng heli làm khí mang. Với detector FID khi vận hành phải dùng thêm hidrovà khơng khí để đốt cháy ngọn lửa.

- Detector cộng kết điện tử (ECD: Electron capture detector) có thể vận hành với các khí mang khác nhau, làm việc theo kiểu dịng 1 chiều có thể dùng nitơ, vận hành theo kiểu xung có thể dùng argon bổ sung 5% metan cho kết quả tốt hơn.

1.6.3.2. Bộ phận bơm mẫu

Mẫu phân tích đƣợc đƣa vào hệ thống bằng xilanh bơm mẫu, có thể sử dụng dạng bơm tự động hay bơm mẫu bằng tay. Mẫu đƣợc chuẩn bị ở dạng lỏng hay có thể ở dạng khí. Đối với mẫu lỏng thể tích bơm mẫu khoảng 1-3µl, đối với mẫu khí thể tích mẫu có thể lớn hơn nhiều.

Bơm mẫu tự động có hai dạng bơm mẫu: Bơm mẫu tự động và bơm mẫu dạng hóa hơi. Trong chƣơng trình phần mềm điều khiển hệ thống có quy định chế độ cho bơm mẫu tự động làm việc: chế độ rửa trƣớc và sau khi bơm

Bơm mẫu bằng tay có rất nhiều kiểu bơm mẫu: tuy nhiên có hai dạng cơ bản đƣợc sử dụng nhiều: bơm mẫu trực tiếp và bơm mẫu đẩy dung môi.

1.6.3.3. Buồng hóa hơi mẫu (Injector)

Mẫu đƣợc đƣa vào một buồng mẫu kín, tại đây mẫu đƣợc hóa hơi và đƣợc khí mang đƣa vào cột tách. Có nhiều dạng buồng bơm mẫu, nhƣng thơng dụng và đƣợc sử dụng nhiều nhất là bơm mẫu chia dịng và khơng chia dịng.

Chế độ chia dòng: chế độ đƣợc điều khiển chuẩn hóa bằng phần mềm điều khiển của hãng sản xuất, để đảm bảo một phần tỷ lệ chính xác của mẫu đƣợc đƣa vào cột phân tích, cịn phần dƣ sẽ đi ra ngồi theo dịng khí làm sạch. Kỹ thuật này đƣợc áp dụng phổ biến trong phân tích giám định các chất ma túy. Khi phân tích dựa vào kinh nghiệm thực tiễn và kết quả khảo sát cán bộ phân tích chọn tỷ lệ chia thích hợp để có kết quả phân tích đƣợc tối ƣu.

Chế độ không chia dịng: lƣợng mẫu đƣợc đƣa vào cột hồn tồn, áp dụng đối với lƣợng mẫu lỗng hay phục vụ mục đích nghiên cứu.

1.6.3.4. Cột tách

Cột tách sắc ký đƣợc xem nhƣ là trái tim của hệ thống sắc ký. Tại đây

mẫu phân tích đƣợc tách riêng rẽ các cấu tử thành phần. Cột tách đƣợc đặt trong buồng nhiệt. Có chế độ nhiệt đẳng nhiệt và chƣơng trình nhiệt độ.

Việc lựa chọn pha tĩnh phù hợp với các cấu tử cần tách là rất quan trọng, các nhà sản xuất luôn cung cấp đầy đủ các dạng cột tách khi có yêu cầu, có thể phân loại theo độ phân cực tăng dần của pha tĩnh.

Nhiều loại cột tách khác nhau đã đƣợc sử để phục vụ cho mục đích nghiên cứu và chúng phải thoả mãn các yêu cầu sau:

- Đảm bảo tốt quá trình trao đổi chất giữa pha động và pha tĩnh.

- Có độ thấm cao, độ giảm áp suất nhỏ với tốc độ dịng khí mang nhất định. - Có dung lƣợng nạp cao, có khoảng nhiệt độ làm việc lớn và làm việc đƣợc ở nhiệt độ cao.

- Khả năng tải trọng cao của cột phụ thuộc vào kiểu cột tách, khả năng hòa tan của cấu tử trong pha tĩnh đƣợc chọn.

Có 2 loại cột: Cột nhồi và cột mao quản, các thông số cơ bản của các loại cột đƣợc trình bày trong bảng sau:

Bảng 1: Các thông số cơ bản của cột nhồi và cột mao quản.

Thông số Cột nhồi Cột mao quản

Chiều dài cột (m) đƣờng kính trong (mm) Độ phân giải Tốc độ dịng khí (ml/ phút) Lƣợng mẫu dung nạp 0.5-10 2-4 Thấp 10-60 Nhiều 5-100 0.05-1.2 cao 0.5-15 ít 1.6.3.5. Bộ phận phát hiện (Detector)

Mẫu sau khi đƣợc tách ra khỏi cột sẽ đi vào bộ phận phát hiện. Nhiệm vụ của detector là chuyển các tín hiệu khơng điện thành tín hiệu điện. Tuỳ thuộc vào đối tƣọng phân tích mà ngƣời ta sử dụng các detector khác nhau. Các detector thƣờng dùng hiện nay là: dẫn nhiệt(TCD), ion hoá ngọn lửa (FID), cộng kết điện tử (ECD), khối phổ (MS)…

Ion hóa ngọn lửa: Cho phép phát hiện các chất hữu cơ hydrocacbon. Đây là detector đa năng dùng trong phân tích sắc ký khí nhiều nhất.

Cộng kết điện tử: Cho phép phát hiện nhậy đối với các cấu tử trong phân tử có nguyên tố nhóm halogel (nhóm thuốc trừ sâu cơ clo, nhóm benzodizepin).

Khối phổ: Phát hiện chất dựa vào khối lƣợng phân tử các chất.

Một phần của tài liệu (LUẬN văn THẠC sĩ) nghiên cứu xây dựng phương pháp xác định đồng thời morphine, 6 monoacetyl morphine, methadone trong nước tiểu bằng sắc ký khí (Trang 36 - 38)

Tải bản đầy đủ (PDF)

(73 trang)