- Detector cộng kết điện tử (ECD)
2.10. Đánh giá hiệu suất chiết Mor, 6-MAM, Med
Để đánh giá hiệu suất chiết sau khi đã tìm đƣợc các điều kiện tối ƣu, chúng tôi tiến hành các bƣớc sau:
- Lấy 03 mẫu, mỗi mẫu 10 ml nƣớc tiểu trắng thêm vào các chất ma túy để đạt nồng độ Mor là 0,2 μg/ml; 6-MAM là 0,1 μg/ml; Med là 0,05 μg/ml.
- Chiết loại tạp một lần trong môi trƣờng axit pH=2÷3 bởi dung mơi chiêt (hệ dung mơi chloroform/isopropanol 9/1).
- Trung hịa dịch chiết bằng dung dịch NaOH 5%
- Tiến hành kiềm hóa tới pH = 8,5 bằng cách thêm NaHCO3 đến bão hòa. - Chiết các mẫu trên với hệ dung môi chloroform/isopropanol (9/1), mỗi mẫu chiết 1 lần bằng 10ml dung môi.
- Lấy dịch chiết lắc với Na2SO4 khan để loại nƣớc và cất quay chân không đến cặn khô.
- Lấy cặn chiết hịa tan chính xác với 0,1ml hệ dung mơi 9/1 có chứa chất nội chuẩn Octacosan (C28H58) với nồng độ 0,05mg/ml
- Bơm 1 μl vào thiết bị GC-FID và so sánh với mẫu chuẩn chứa các chất Mor , 6-MAM, Med để xác định hiệu suất.
- Mỗi thí nghiệm ở trên đƣợc lặp lại 3 lần và lấy kết quả trung bình. Tính hiệu suất chiết một lần bằng cách so sánh lƣợng mẫu tìm đƣợc trong mẫu so với lƣợng chất phân tích thêm vào ban đầu của mẫu. Cũng làm tƣơng tự trong trƣờng hợp chiết ba lần. Kết quả tính hiệu suất chiết các chất Mor, 6-MAM, Med đƣợc trình bày trong bảng 7:
Bảng 7: Kết quả hiệu suất chiết khi áp dụng các điều kiện tối ưu.
Hiệu suất chiết 1 lần(%) Hiệu suất chiết 3lần(%)
Lần 1 Mor 49,0 77,5 6-MAM 63,5 83,4 Med 76,8 94,6 Lần 2 Mor 52,6 78,4 6-MAM 60,3 81,2 Med 79,0 96,7 Lần 3 Mor 53,3 77,0 6-MAM 61,5 84,1 Med 78,2 95,4
Từ các kết quả trên, chúng tơi tiến hành tính tốn một số chỉ tiêu thống kê của phƣơng pháp, kết quả thể hiện trong bảng 8:
Bảng 8: Bảng kết quả các chỉ tiêu thống kê của phương pháp.
Chất Chiết 1 lần Chiết 3 lần H (%) SD RSD H (%) SD RSD Mor 51,63 2,3072 4,47 77,63 0,7095 0,91 6-MAM 61,77 1,6166 2,62 82,90 1,5133 1,83 Med 78,00 1,1135 1,43 95,57 1,0599 1,11 Trong đó:
H là hiệu suất chiết trung bình
SD là độ lệch chuẩn; RSD là độ lệch chuẩn tƣơng đối
Nhận xét: Từ kết quả các đại lƣợng thống kê của tập số liệu thu đƣợc chúng tôi thấy hiệu suất chiết của phƣơng pháp khi chiết một lần đạt ở mức cao đối với Med cịn với Mor thì hiệu suất chiết chỉ đạt trung bình khoảng 51,6%. Tuy nhiên khi tiến hành chiết 3 lần thì hiệu suất chiết đạt đƣợc cao hơn (Mor: 77,63%; 6-MAM: 82,90%; Med:95,57%) và độ sai lệch kết quả xác định hiêu suất giữa các lần chiết là không lớn. Mặt khác trong trƣờng hợp
này độ lệch chuẩn tƣơng đối chính là hệ số biến thiên (CV) kết quả thu đƣợc tƣơng ứng nằm trong giới hạn cho phép (<5%) nên phƣơng pháp này có độ lặp lại và độ tin cậy tốt.