Trong thí nghiệm này, chúng tôi thử khả năng kháng khuẩn của ricin tinh sạch thu được lên 4 chúng vi khuẩn (2 chủng gram âm và 2 chủng gram dương) đã tiến hành khảo sát độc tính của dịch chiết hạt thầu dầu thơ trước đó. Bốn chủng vi khuẩn E.coli,Staphylococcus aureus, Bacilus cereus và Vibrio vulnificus được ni cấy trong mơi trường LB lỏng có hoặc khơng bổ sung dịch chiết từ hạt thầu dầu tại các nồng độ khác nhau là 5µg/ml, 20µg/ml và 100µg/ml và ceftriaxon 3µg/ml (như là đối chứng dương). Sau đó 24 giờ,tế bào vi khuẩn được cấy ra đĩa thạch với tỉ lệ pha loãng 1:10 000 (v/v). Độc tính của dịch chiết được xác định dựa vào số lượng/độ sống của khuẩn lạc xuất hiện trên đĩa thạch sau 24 giờ cấy trải.Kết quả thu được được thể hiện trong Hình 3.8.
Hình 3.8: Tác động của ricin lên khả năng sống sót của các chủng vi khuẩn sau khi xử lý với ricintrong 24 giờ
Dựa vào kết quả ta thấy, đối với hai chủng vi khuẩn gram âm là E.coli và Vibrio vulnificus, tỉ lệ tế bào sống sót so với đối chứng chênh lệch rất rõ rệt. Cụ thể,
với E.coli, ricin thu được có tác dụng kìm hãm vi khuẩn sinh trưởng tuy nhiên ko
gây chết hoàn toàn, tỉ lệ vi khuẩn sống sót giảm 60% tại nồng độ 100µg/ml và tăng dần tại nồng độ thấp hơn.Với chủng vi khuẩn gram âm còn lại, Vibrio vulnificus,
ricin có tác động rõ rệt tới khả năng sống sót của loại vi khuẩn này khi vi khuẩn bị tiêu diệt gần như hoàn toàn tại hầu hết các nồng độ. Tại nồng độ 20 µg/ml, tỉ lệ vi khuẩn sống sót đạt mức 1,7% so với đối chứng.
Đối với hai chủng vi khuẩn gram dương Bacillus Cereus và Staphylococcus aureus, Ceftriaxon khơng có tác động đến hai chủng vi khuẩn này.Tại nồng độ
20µg/ml, 2 chủng vi khuẩn này đều có tỉ lệ sống sót giảm60 - 70% so với đối chứng. Sau khi xử lý với ricin tinh sạch, tỉ lệ vi khuẩn Bacillus Cereus sống sót giảmhơn 80% tại nồng độ 100µg/ml, tại nồng độ thấp hơn 20µg/ml tác động diệt khuẩn khuẩn B. cereusgiảm. Khả năng sống của chủng vi khuẩn Staphylococcus aureusgim ẵ ti nng 100àg/ml v gim 1/3 tại nồng độ 20µg/ml sau khi xử lý
với ricin tinh sạch.Dịch chiết thơ có tác dụng tiêu diệt gần như hồn tồn vi khuẩn trong ricin tinh sạch lại có hoạt tính thấp hơn.
Các kết quả tìm được cho thấy, ricin thu được qua bước tinh sạch có khả năng kháng khuẩn từ nồng độ cao hơn 20µg/ml. Các nghiên cứu trước đó của Hashem Rahmati và cộng sự [20] đánh giá trên các chủng vi khuẩn S. aureus và E.coli đã chỉ ra nồng độ gây chết (MIC) của dịch chiết ricin thô (9MeOH:1H2O, v:v) đạt giá trị lần lượt trong khoảng 9µg/mlvà 2,47µg/ml. Các kết quả này thấp hơn nhiều so với kết quả nghiên cứu vừa thu được (với ngưỡng MIC nằm trong khoảng 5µg/ml-200µg/ml). Tuy nhiên, điều này cũng có thể giải thích bằng thành phần của dịch chiết trong nghiên cứu của Hashem bao gồm nhiều nhóm hợp chất có khả năng kháng khuẩn khác như Sapoin, Anthocyanin, Vitamin A,Sterol… Tóm lại, ricin thu được có khả năng diệt khuẩn 4 chủng vi khuẩnE.coli, Staphylococcus aureus,
Bacilus cereus và Vibrio vulnificustại nồng độ từ 5µg/ml trở lên.