MT Nồng độ KIN (mg/l)
Số chồi ban đầu
Sau 4 tuần nuôi cấy
Số chồi thu đƣợc Hệ số nhân (lần)
B0 0 30 50 1,66
K1 0,5 30 73 2,43
K2 1,0 30 79 2,63
K3 1,5 30 87 2,9
K4 2,0 30 54 1,8
Các số liệu tính tốn đã cho thấy, trên mơi trường K1 có 0,5 mg/l KIN hệ số nhân chồi chỉ đạt được là 2,43 lần, cao hơn không nhiều so với môi trường đối chứng. Khi tăng nồng độ KIN lên 1,0mg/l ở môi trường K2 thì hệ số nhân đạt được là 2,63. Hệ số nhân chồi cao nhất trong số các mơi trường thí nghiệm là 2,9 đạt được trên mơi trường K3 có 1,5 mg/l KIN (hình 3.5). Có thể thấy rằng hệ số nhân chồi trên các mơi trường có bổ sung KIN đều thấp hơn trên các mơi trường có BAP. Đồng thời ở các mơi trường có bổ sung KIN, khi quan sát quá trình tăng sinh chồi, chúng tơi thấy rằng mơ sẹo có hình thành khá ở phần tiếp xúc của cụm chồi với môi
trường ni cấy, có thể gây ảnh hưởng tới việc hấp thụ các chất có trong mơi trường. Vì lý do này mơi trường có bổ sung BAP là phù hợp cho q trình nhân chồi có nguồn gốc từ mơ sẹo, trong đó mơi trường B2 có nồng độ BAP là 1,0mg/l là mơi trường thích hợp nhất.
Hình 3.5 Kết quả nhân chồi trên môi trường K3 sau 4 tuần 3.5. Kéo dài chồi
Kết thúc giai đoạn nhân nhanh chồi, chúng tơi đã có được số lượng chồi lớn, để có thể tạo thành cây hồn chỉnh, chúng tôi phải tiến hành tạo rễ. Tuy nhiên, nếu chồi nhỏ dẫn tới hình thành cây con có kích thước bé, gây bất lợi cho việc chuyển ra môi trường bên ngồi. Vì thế, bước kéo dài chồi đóng vai trò là bước đệm để tạo chất lượng cây con tốt.
Cấy chồi vào mơi trường MS có bổ sung 30g/l đường, 50ml/l nước dừa, 7g/l agar. Sau 3 tuần, khi chiều dài chồi đạt khoảng 3 - 4 cm, chúng tôi tiến hành chuyển vào môi trường ra rễ.
3.6. Tạo rễ cho chồi dƣa hấu in vitro
Từ các chồi dưa hấu nuôi cấy trên môi trường kéo dài chồi, chúng tôi đã lựa chọn các chồi dài và khỏe mạnh để thử nghiệm cho quá trình hình thành rễ in vitro. Tạo rễ cho các chồi dưa hấu là giai đoạn rất quan trọng giúp cho cây con có thể sinh trưởng được trên mơi trường tự nhiên. Để thử nghiệm quá trình tạo rễ cho các chồi dưa hấu có nguồn gốc từ mơ sẹo, chúng tôi đã sử dụng mơi trường khống MS nhưng có hàm lượng giảm đi một nửa, như sau:
Môi trường đối chứng R0: 1/2MS + 0,1 mg/l BAP + 30g/l đường +7g/l agar. Các mơi trường thí nghiệm R1, R2, R3, R4 có thành phần tương tự như mơi trường đối chứng R0 nhưng được bổ sung thêm IBA ở các nồng độ khác nhau: 0,1; 0,25; 0,50 và 1,0 mg/l. Trong nhóm auxin, IBA cùng với NAA là hai phytohormone có hoạt tính mạnh trong kích thích tạo rễ ở nhiều lồi thực vật, vì vậy để thử nghiệm hình thành rễ của các chồi dă hấu, chúng tôi đã sử dụng IBA có dải nồng độ từ 0,1 – 1,0 mg/l.