Tiến hành thực hiện mẫu thêm chuẩn tại điểm 10 µg/L vào mẫu
trắng ̣̣(Na2SO4) và tiến hành xử lý và đo mẫu song song với mẫu trắng (Na2SO4).
Sau đó, đưa ra hàm lượng thực tế thu được (đã trừ mẫu trắng) sau quá trình xử lý mẫu và tiến hành sắc ký nhằm xác định độ thu hồi của phương pháp. Bên cạnh đó, cũng tiến hành đồng thời mẫu lặp lại (7 mẫu) và xác định độ lệch chuẩn tương đối (RSD) nhằm đánh giá độ lặp lại của phương pháp. Kết quả thu được như sau:
Bảng 3. 9. Độ thu hồi và độ lệch chuẩn tương đối của các paraben Độ thu hồi (%) Độ thu hồi (%) Lần MeP 13C- MeP EtP n-PrP Iso- PrP BuP 13C- BuP BzP HepP 1 110,2 108,6 73,2 103,5 62,2 82 81,5 70,1 75,7 2 111,3 108,2 70,9 102,9 70,3 82,2 83,3 69,5 73,1 3 93,6 92,4 63,1 89,7 61,2 70,4 71,7 62 63,4 4 90,2 91,6 72,7 102,7 62,2 81,4 82,5 70,7 74,2 5 110,5 106,4 71,4 103,1 70,7 81,4 82,1 70,2 74,2 6 105,6 107,3 63 90,9 61,3 70,8 71,8 62,9 63,7 7 106,2 96,3 68,2 100,7 65,4 80,6 81,1 65,7 68,4 Trung bình (%) 103,9 101,54 68,9 99,1 64,8 78,4 79,14 67,3 70,4 RSD (%) 8,24 7,64 6,27 6,12 6,43 6,83 6,44 5,52 7,39
Từ kết quả ở bảng trên cho thấy độ lặp lại của phương pháp khá tốt được đánh giá qua giá trị RSD (%) nằm trong khoảng từ 5,52% – 8,24% và đáp ứng được yêu cầu của AOAC về độ lặp lại với giá trị RSD (%) < 21% tại nồng độ 10ppb. Ngoài ra, ta có thể thấy độ lặp lại của các chất trong nhóm chất khác nhau và BzP có độ
lặp lại tốt nhất với giá trị RSD là 5,52% tiếp theo là n-PrP với RSD là 6,12%. MeP và HepP có độ lặp lại kém nhất với giá trị RSD lần lượt là 8,24 và 7,39 nhưng vẫn đáp ứng được tiêu chuẩn của AOAC.
Ngoài ra, từ kết quả bảng trên cịn có thể thấy độ thu hồi của các paraben trong các mẫu thê chuẩn so với nền mẫu trắng (Na2SO4) nằm trong khoảng từ 64,8% – 103,9%. Tất cả độ thu hồi của các paraben đều đáp ứng được yêu cầu của AOAC về độ thu hồi (60% - 115% tại nồng độ 10 ppb).
3.3. QUY TRÌNH CHUẨN
Sau khi khảo sát các điều kiện và thu được kết quả có thể chấp nhận được một quy trình chuẩn được đưa ra để phân tích mẫu bụi trong nhà như sau:
Cân và ghi chính xác trong khoảng 200 mg lượng mẫu bụi đã được thu thập cho vào ống falcon. Thêm 20 µL chất đồng hành vào các mẫu bụi và để cân bằng trong 30 phút ở nhiệt độ thường. Tiếp đó, các mẫu được tiến hành quá trình chiết với 5 mL hỗn hợp nước và methanol (5:2, V:V). Lắc trong máy lắc dao động trong 30 phút tốc độ lắc 300 vòng/phút và quay li tâm trong 5 phút với tốc độ quay 3000 vòng/phút. Dịch chiết nổi trên bề mặt được cho vào ống thủy tinh và tiến hành chiết lặp lại hai lần với tổng dịch chiết 13 mL. Các dịch chiết thu được đem cơ đặc dưới dịng Nito nhẹ gia nhiệt trong khoảng 40°C đến 4 mL. Pha loãng dịch chiết thành 10 mL với 0,2% acid fomic (pH=2,5). Sử dụng cột chiết pha rắn Oasis MCX (60
mg/cm3) để tiến hành tinh chế dịch chiết. Hoạt hóa cột chiết với 5 mL methanol và
5 mL nước cất. Cho 10mL dịch chiết lên cột, thêm 5mL MeOH : H2O (20:80, V:V) và 3mL nước cất để làm sạch các tạp chất khơng cần thiết. Rửa giải chất phân tích bằng 10 mL MeOH tinh khiết vào ống nghiệm, tiếp tục cơ bớt dung mơi dưới dịng Nito đến 1mL ở nhiệt độ khoảng 40 °C. Chuyển mẫu phân tích vào vial và đem phân tích bằng hệ thống LC-MS/MS.
3.4. ÁP DỤNG QUY TRÌNH ĐÃ CHUẨN HĨA ĐƯỢC ĐỂ PHÂN TÍCH MỘT SỐ MẪU BỤI TRONG NHÀ MỘT SỐ MẪU BỤI TRONG NHÀ
Trong nghiên cứu này, chúng tôi đã lựa chọn thành phố Hà Nội, Việt Nam là nơi thu thập các mẫu bụi trong các hộ gia đình tại một số nơi có khả năng có nồng độ paraben cao. Có 17 mẫu bụi trong nhà đã được thu thập, mẫu được phân loại thành các nhóm với những hoạt động đặc trưng như: Phòng ngủ (n = 5), nhà bếp (n = 5), phòng khách (n = 7)
Mẫu được thu trực tiếp (bằng cách dung chổi hoặc máy hút bụi) tại điểm thu mẫu và được gói bằng alumin foil rồi đem về xử lý
Quá trình thu mẫu, xử lý và phân tích mẫu đều được thực hiện theo quy trình đã được tối ưu hóa trước đó.
3.4.1. Nồng độ paraben trong các mẫu bụi trong nhà thu tại Hà Nội
Áp dụng quy trình xử lý mẫu và các thông số đã được tối ưu của phương pháp để tiến hành xác định các mẫu bụi thu tại Hà Nội, Việt Nam cho kết quả như sau: