CHƯƠNG 1 : TỔNG QUAN
1.2. Tổng quan về các phương pháp phân tích dioxin/furan
1.2.1. Các phương pháp xử lý mẫu sữa
Qua tham khảo một số nghiên cứu về các phương pháp phân tích dioxin, furan trong mẫu sữa có thể thấy một số điểm đáng chú ý sau đây:
Các phương pháp điển hình để tách chiết các hợp chất dioxin/furan ra khỏi nền mẫu sữa gồm: chiết lỏng-lỏng (đối với mẫu sữa tươi); chiết Soxhlet, chiết gia tốc dung môi (ASE), chiết bằng hệ thống chiết chất lỏng cao áp và chiết nhanh (đối với mẫu sữa khô) và một số phương pháp khác. Tùy vào mục đích và điều kiện phịng thí nghiệm mà áp dụng các kỹ thuật chiết phù hợp. Trong đó một phương pháp cổ điển chiết được với hiệu suất khá cao nên được ưa dùng là phương pháp chiết Soxhlet, nhưng phương pháp này có nhược điểm là khá tốn thời gian (khoảng 8h-48h) và sử dụng nhiều dung môi gây ảnh hưởng đến môi trường. Phương pháp chiết nhanh bằng thiết bị E914/E916 là một phương pháp mới nhằm tách các hợp chất hữu cơ ra khỏi các nền mẫu rắn và bán rắn dựa vào áp suất, nhiệt độ cao tăng hiệu quả chiết. So với phương pháp chiết truyền thống (chiết Shoxhlet), phương pháp này có ưu điểm là thời gian chiết ngắn (khoảng 2h-4h tùy vào nền mẫu) và lượng dung môi được hạn chế tối đa, vì vậy chi phí phân tích sẽ giảm đi đáng kể cũng như giảm thiểu lượng dung môi thải ra môi trường. Dung môi sử dụng trong các phương pháp chiết mẫu sữa là các dung môi phân cực như ethanol, methanol nhằm chiết chất béo ra khỏi nền mẫu, ngồi ra các dung mơi toluen, diclometan chiết các chất phân tích ra khỏi mẫu. Sau khi các hợp chất dioxin/furan được tách chiết ra khỏi nền mẫu, các bước làm sạch rất cần thiết để loại bỏ các hợp chất có thể gây cản trở trong q trình phân tích. Kỹ thuật sử dụng cột silica gel thường, silica gel đa lớp, cột than hoặt tính, cột nhôm thường được sử dụng để loại nền cản trở. Dung môi rửa giải thường được sử dụng là n-hexan, toluen hay hỗn hợp với các tỉ lệ khác nhau của n-hexan/DCM. Tùy thuộc vào mục tiêu tách chất mà sử dụng cột tách và dung môi tối ưu.
Bảng 1.7. Một số phương pháp xử lý mẫu sữa
Đối tượng Chiết Làm sạch Thơng số phân tích TLTK
Furan trong sữa mẹ
- Bảo quản mẫu ở -20°C
-10 mL mẫu được chiết lỏng lỏng với 10 ml Ethanol, 0,4 ml dung dịch kali oxalate 25%, 5 ml dietyl ete, 6 ml hexan (3 lần).
-Cô cạn, xác định chất béo
-Làm sạch trên cột đa lớp: 2g Na2SO4kh; 1g silica gel+ AgNO3 (10%); 0,5g silica gel; 0,5g Silica gel + H2SO4đ (44%); 2g Na2SO4kh (cột trên) và 1g Na2SO4kh, 0,5g silica gel, 1g Na2SO4kh (cột dưới). -Rửa giải bằng 50 mL hỗn hợp diclometan/ hexane 25% và 100 ml toluene. - LOD: 0,1 ppb -LOQ: 0,3 ppb
-Hiệu suất thu hồi: 2,3,7,8 TCDF (82-86%); 2,3,4,7,8 PCDF (82-85%) [25] Dioxin, furan trong sữa bò và sữa dê
- Đông khô 250 mL mẫu sữa
-Chiết gia tốc dung môi (ASE) 5g mẫu khô, với dung môi n-hexane/diclometan/ methanol (5/2/1, v/v/v) trong 2 chu kì 5 phút tại P=10 MPa, t°= 100°C.
-Xác định lượng chất béo
- Sử dụng cột silica gel thêm axit sunfuric nhiều lớp (22% và 44%)
- LOD: 0,05-0,5 pg/g - LOQ: 0,13-1,25 pg/g
Đối tượng Chiết Làm sạch Thơng số phân tích TLTK
Dioxin, furan trong sữa mẹ
-Đông khô mẫu
-5g mẫu sữa bột được chiết bằng hệ thống chiết chất lỏng điều áp (PLE) với dung môi n-hexane/diclometan/
ethanol (5/2/1, v/v/v) tại áp suất 1700psi, nhiệt độ 120°C.
-Cô quay, xác định hàm lượng chất béo
-Làm sạch trên cột silica gel đa lớp và cột than hoạt tính.
- LOD (2,3,7,8-TCDD): 0,06 pg/g chất béo
- Hiệu suất thu hồi: 13C- PCDD/F (82 ± 10%), 37Cl- 2,3,7,8-TCDD (85 ± 9%), chất chuẩn: 60−120% [14] Dioxin, furan trong sữa bột
-3g sữa bột được chiết bằng thiết bị chiết nhanh E914 bằng dung môi toluen và hỗn hợp dung môi toluen:ethanol (90:10, v/v) tại áp suất 100 bar và nhiệt độ 100°C.
-Xác định hàm lượng chất béo
-Làm sạch bằng hệ thống MIURA GO-4HT bằng cách ghép nối các cột làm sạch: cột bạc nitrat, cột axit sunfuric, cột than hoạt tính và cột nhơm.
[21] Dioxin, furan trong sữa và các sản phẩm từ sữa
-Đông khô mẫu
-5g sữa bột được chiết Shoxhlet với diclometan trong 16h
- Xác định hàm lượng chất béo
- Làm sạch trên cột than hoạt tính, cột axit-bazơ và cột nhơm.
- LOD: 2,3,7,8-TCDD (0,1 pg/g chất béo), 1,2,3,7,8-