3.2.1. Conus stritatus
Tiến hành phân tích 4 tube chứa các phân đoạnđộc tố gây chết trên chuột của
Conus stritatus trên HPLC/UV-Vis tại bước sóng 254 nm, tốc độ dòng 0.5 ml/phút. Qua khảo sát chương trình chạy gradient tại thời gian 60 phút chúng tôi thu được các sắc kýđồ được biểu diễnởhình 3.4:
3.2. KHẢO SÁTCÁC PHÂN ĐOẠN PEPTIDE ĐỘC TỐBẰNG HPLC
3.2.1. Conus stritatus
Tiến hành phân tích 4 tube chứa các phân đoạnđộc tố gây chết trên chuột của
Conus stritatus trên HPLC/UV-Vis tại bước sóng 254 nm, tốc độ dòng 0.5 ml/phút. Qua khảo sát chương trình chạy gradient tại thời gian 60 phút chúng tôi thu được các sắc kýđồ được biểu diễnởhình 3.4:
3.2. KHẢO SÁTCÁC PHÂN ĐOẠN PEPTIDE ĐỘC TỐBẰNG HPLC
3.2.1. Conus stritatus
Tiến hành phân tích 4 tube chứa các phân đoạnđộc tố gây chết trên chuột của
Conus stritatus trên HPLC/UV-Vis tại bước sóng 254 nm, tốc độ dòng 0.5 ml/phút. Qua khảo sát chương trình chạy gradient tại thời gian 60 phút chúng tôi thu được các sắc kýđồ được biểu diễnởhình 3.4:
Hình 3.4: Phổsắc ký đồcủa Conus stritatusở4 tube : (A): tube 1; (B): tube 2; (C): tube 3; (D): tube 4
Qua các sắc ký đồchúng tôi nhận thấycác peak thu được của 4 tube đều chia làm 2 nhóm. Nhóm đầu thường tập trung ở những phút đầu tiên trong khoảng thời gian lưu từ phút 1-8, trong đó luôn có 1 peak rất lớn và đa số các peak còn lại rất nhỏ. Nhóm peak thứ hai trải dài trong khoảng thời gian từ phút 29-59 và hầu hết đều rất nhỏ.
Tube 1: thu được 4 peak chia làm 2 nhóm: nhóm đầu gồm 2 peak trong khoảng thời gian lưu ở phút thứ 6 với peak 1 rất lớn, độ hấp thụ là 40517. Peak 2 tương đối thấp, độhấp thụlà 7719; Nhóm thứhai gồm 2 peak rất nhỏ tại khoảng thời gianlưutừphút 29-30.
Tube 2: thu được 12 peak chia làm 2 nhóm: từphút thứ1-7 thu được 6 peak trong đó có peak 4rất lớn với độhấp thụlà 53512, các peak 3 và 5tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ; Nhóm thứhaithu đượcởkhoảng thời gian lưu từ phút 38-47 gồm có 6 peak, peak 8, peak 9 và 12 tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ.
Tube 3: thu được 9 peak chia làm 2 nhóm: 4 peak thu trong khoảng thời gian lưutừphút 1- 6 có peak 3 rất lớn với độhấp thụlà 53722. Peak 4 tương đối
Hình 3.4: Phổsắc ký đồcủa Conus stritatusở4 tube : (A): tube 1; (B): tube 2; (C): tube 3; (D): tube 4
Qua các sắc ký đồchúng tôi nhận thấy các peak thu được của 4 tube đều chia làm 2 nhóm. Nhóm đầu thường tập trung ở những phút đầu tiên trong khoảng thời gian lưu từ phút 1-8, trong đó luôn có 1 peak rất lớn và đa số các peak còn lại rất nhỏ. Nhóm peak thứ hai trải dài trong khoảng thời gian từ phút 29-59 và hầu hết đều rất nhỏ.
Tube 1: thu được 4 peak chia làm 2 nhóm: nhóm đầu gồm 2 peak trong khoảng thời gian lưu ở phút thứ 6 với peak 1 rất lớn, độ hấp thụ là 40517. Peak 2 tương đối thấp, độhấp thụlà 7719; Nhóm thứhai gồm 2 peak rất nhỏ tại khoảng thời gianlưutừphút 29-30.
Tube 2: thu được 12 peak chia làm 2 nhóm: từphút thứ1-7 thu được 6 peak trong đó có peak 4rất lớn với độhấp thụlà 53512, các peak 3 và 5tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ; Nhóm thứhaithu đượcở khoảng thời gianlưu từ phút 38-47 gồm có 6 peak, peak 8, peak 9 và 12 tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ.
Tube 3: thu được 9 peak chia làm 2 nhóm: 4 peak thu trong khoảng thời gian lưutừphút 1- 6 có peak 3 rất lớn với độhấp thụlà 53722. Peak 4 tương đối
Hình 3.4: Phổsắc ký đồcủa Conus stritatusở4 tube : (A): tube 1; (B): tube 2; (C): tube 3; (D): tube 4
Qua các sắc ký đồchúng tôi nhận thấy các peak thu được của 4 tube đều chia làm 2 nhóm. Nhóm đầu thường tập trung ở những phút đầu tiên trong khoảng thời gian lưu từ phút 1-8, trong đó luôn có 1 peak rất lớn và đa số các peak còn lại rất nhỏ. Nhóm peak thứ hai trải dài trong khoảng thời gian từ phút 29-59 và hầu hết đều rất nhỏ.
Tube 1: thu được 4 peak chia làm 2 nhóm: nhóm đầu gồm 2 peak trong khoảng thời gian lưu ở phút thứ 6 với peak 1 rất lớn, độ hấp thụ là 40517. Peak 2 tương đối thấp, độhấp thụlà 7719; Nhóm thứhai gồm 2 peak rất nhỏ tại khoảng thời gianlưutừphút 29-30.
Tube 2: thu được 12 peak chia làm 2 nhóm: từphút thứ1-7 thu được 6 peak trong đó có peak 4rất lớn với độhấp thụlà 53512, các peak 3 và 5tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ; Nhóm thứhaithu đượcở khoảng thời gianlưu từ phút 38-47 gồm có 6 peak, peak 8, peak 9 và 12 tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ.
Tube 3: thu được 9 peak chia làm 2 nhóm: 4 peak thu trong khoảng thời gian lưutừphút 1- 6 có peak 3 rất lớn với độhấp thụlà 53722. Peak 4 tương đối
nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ; Nhóm hai gồm 5 peak thu trong khoảng thời gian từphút 38-59 có peak 6 và 7tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ.
Tube 4: thu được 12 peak chia làm 2 nhóm: nhóm 1 gồm 4 peak thu được trong khoảng thời gianlưutừphút 1-5, chỉ có peak 4 rất lớn với độhấp thụlà 50670, các peak còn lại rất nhỏ; Nhóm thứ hai gồm 8 peak thu được trong khoảng thời gian lưutừphút 38-59 có peak 8 và 12 tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ.
3.2.2. Conus textile
Tiến hành phân tích 4 tube chứa các phân đoạnđộc tố gây chết trên chuột của
Conus textile trên HPLC/UV-Vis tại bước sóng 254 nm, tốc độ dòng 0.5 ml/phút. Qua khảo sát chương trình chạy gradient tại thời gian 60 phút chúng tôi thu được các sắc kýđồ được biểu diễnởhình 3.5:
nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ; Nhóm hai gồm 5 peak thu trong khoảng thời gian từphút 38-59 có peak 6 và 7tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ.
Tube 4: thu được 12 peak chia làm 2 nhóm: nhóm 1 gồm 4 peak thu được trong khoảng thời gianlưutừphút 1-5, chỉcó peak 4 rất lớn với độhấp thụlà 50670, các peak còn lại rất nhỏ; Nhóm thứ hai gồm 8 peak thu được trong khoảng thời gian lưutừphút 38-59 có peak 8 và 12 tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ.
3.2.2. Conus textile
Tiến hành phân tích 4 tube chứa các phân đoạnđộc tố gây chết trên chuột của
Conus textile trên HPLC/UV-Vis tại bước sóng 254 nm, tốc độ dòng 0.5 ml/phút. Qua khảo sát chương trình chạy gradient tại thời gian 60 phút chúng tôi thu được các sắc kýđồ được biểu diễnởhình 3.5:
nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ; Nhóm hai gồm 5 peak thu trong khoảng thời gian từphút 38-59 có peak 6 và 7tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ.
Tube 4: thu được 12 peak chia làm 2 nhóm: nhóm 1 gồm 4 peak thu được trong khoảng thời gianlưutừphút 1-5, chỉcó peak 4 rất lớn với độhấp thụlà 50670, các peak còn lại rất nhỏ; Nhóm thứ hai gồm 8 peak thu được trong khoảng thời gian lưutừphút 38-59 có peak 8 và 12 tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ.
3.2.2. Conus textile
Tiến hành phân tích 4 tube chứa các phân đoạnđộc tố gây chết trên chuột của
Conus textile trên HPLC/UV-Vis tại bước sóng 254 nm, tốc độ dòng 0.5 ml/phút. Qua khảo sát chương trình chạy gradient tại thời gian 60 phút chúng tôi thu được các sắc kýđồ được biểu diễnởhình 3.5:
Hình 3.12: Phổsắc ký đồcủa Conus textileở4 tube: (A): tube 1; (B): tube 2; (C): tube 3; (D): tube 4
Qua các phổ sắc ký đồchúng tôi nhận thấy hầu hết các tube đều có 1 peak rất lớn xuất hiện trong khoảng thời gian lưu ở phút 5. Trong số các peak còn lại có nhiều peak tương đối nhỏ và một số peak rất nhỏ. Các tube 1, 2, 4 đều có nhiều peak trong khi đótube 3 chỉcó 2 peak.
Tube 1: thu được 7 peak, 5 peak đầu thu trong khoảng thời gian lưu từ phút 2-7 tương đối nhỏngoại trừpeak 4 rất lớnvà có độ hấp thụlà 59869 tại thời gian lưu ở phút 5. Trong khoảng thời gian lưu ở phút 11 và 19 tiếp tụcthu được 2 peak rất nhỏ.
Tube 2: thu được 14 peak chia làm 2 nhóm: nhóm đầu gồm 6 peak thu trong khoảng thời gian lưu từ những phút đầu đến phút thứ 5. Trong đó peak 6 rất lớn vớiđộ hấp thụlà 52425 tại khoảng thời gian lưu ởphút thứ
Hình 3.12: Phổsắc ký đồcủa Conus textile ở4 tube: (A): tube 1; (B): tube 2; (C): tube 3; (D): tube 4
Qua các phổ sắc ký đồ chúng tôi nhận thấy hầu hết các tubeđều có 1 peak rất lớn xuất hiện trong khoảng thời gian lưu ở phút 5. Trong số các peak còn lại có nhiều peak tương đối nhỏ và một số peak rất nhỏ. Các tube 1, 2, 4 đều có nhiều peak trong khi đótube 3 chỉ có 2 peak.
Tube 1: thu được 7 peak, 5 peak đầu thu trong khoảng thời gian lưu từ phút 2-7 tương đối nhỏngoại trừpeak 4 rất lớnvà có độ hấp thụlà 59869 tại thời gian lưu ở phút 5. Trong khoảng thời gian lưu ở phút 11 và 19 tiếp tụcthu được 2 peak rất nhỏ.
Tube 2: thu được 14 peak chia làm 2 nhóm: nhóm đầu gồm 6 peak thu trong khoảng thời gian lưu từ những phút đầu đến phút thứ 5. Trong đó peak 6 rất lớn vớiđộ hấp thụlà 52425 tại khoảng thời gian lưu ởphút thứ
Hình 3.12: Phổsắc ký đồcủa Conus textile ở4 tube: (A): tube 1; (B): tube 2; (C): tube 3; (D): tube 4
Qua các phổ sắc ký đồ chúng tôi nhận thấy hầu hết các tubeđều có 1 peak rất lớn xuất hiện trong khoảng thời gian lưu ở phút 5. Trong số các peak còn lại có nhiều peak tương đối nhỏ và một số peak rất nhỏ. Các tube 1, 2, 4 đều có nhiều peak trong khi đótube 3 chỉ có 2 peak.
Tube 1: thu được 7 peak, 5 peak đầu thu trong khoảng thời gian lưu từ phút 2-7 tương đối nhỏngoại trừpeak 4 rất lớnvà có độ hấp thụlà 59869 tại thời gian lưu ở phút 5. Trong khoảng thời gian lưu ở phút 11 và 19 tiếp tụcthu được 2 peak rất nhỏ.
Tube 2: thu được 14 peak chia làm 2 nhóm: nhóm đầu gồm 6 peak thu trong khoảng thời gian lưu từ những phút đầu đến phút thứ 5. Trong đó peak 6 rất lớn vớiđộ hấp thụlà 52425 tại khoảng thời gian lưu ởphút thứ
5, các peak 1, 3 và 5 tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ; Nhóm thứ hai gồm 8 peak trong khoảng thời gian lưu từ phút 38-59, peak 9 và 10 tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ.
Tube 3: chỉ thu được 2 peak trong khoảng thời gian lưu tại phút thứ5 và 12, peak 1 rất lớn với độhấp thụlà 54479, peak 2 rất nhỏ.
Tube 4:thu được 12 peak chia làm 2 nhóm: nhóm đầu gồm 5 peak trong khoảng thời gian lưu từ những phút đầu đến phút thứ 6, trong đó peak 4 rất lớnvà có độhấp thụlà 52879ở phút thứ5, peak 1 và 5 tương đối nhỏ và những peak còn lại rất nhỏ; Nhóm thứ2 gồm 7 peak: peak 8 tương đối nhỏcòn những peak còn lại rất nhỏ.
3.2.3. Conus vexillum
Tiến hành phân tích 4 tube chứa các phân đoạnđộc tốgây chết và gây liệt trên chuột của Conus vexilum trên HPLC/UV-Vis tại bước sóng 254 nm, tốc độdòng 0.5 ml/phút. Qua khảo sát chương trình chạy gradient tại thời gian 60 phút chúng tôi thu được các sắc đồ được biểu diễnởhình 3.6:
5, các peak 1, 3 và 5 tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ; Nhóm thứ hai gồm 8 peak trong khoảng thời gian lưu từ phút 38-59, peak 9 và 10 tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ.
Tube 3: chỉ thu được 2 peak trong khoảng thời gian lưu tại phút thứ5 và 12, peak 1 rất lớn với độhấp thụlà 54479, peak 2 rất nhỏ.
Tube 4:thu được 12 peak chia làm 2 nhóm: nhóm đầu gồm 5 peak trong khoảng thời gian lưu từ những phút đầu đến phút thứ 6, trong đó peak 4 rất lớnvà có độ hấp thụlà 52879 ởphút thứ5, peak 1 và 5 tương đối nhỏ và những peak còn lại rất nhỏ; Nhóm thứ2 gồm 7 peak: peak 8 tương đối nhỏcòn những peak còn lại rất nhỏ.
3.2.3. Conus vexillum
Tiến hành phân tích 4 tube chứa các phân đoạnđộc tốgây chết và gây liệt trên chuột của Conus vexilum trên HPLC/UV-Vis tại bước sóng 254 nm, tốc độdòng 0.5 ml/phút. Qua khảo sát chương trình chạy gradient tại thời gian 60 phút chúng tôi thu được các sắc đồ được biểu diễnởhình 3.6:
5, các peak 1, 3 và 5 tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ; Nhóm thứ hai gồm 8 peak trong khoảng thời gian lưu từ phút 38-59, peak 9 và 10 tương đối nhỏ, các peak còn lại rất nhỏ.
Tube 3: chỉ thu được 2 peak trong khoảng thời gian lưu tại phút thứ5 và 12, peak 1 rất lớn với độhấp thụlà 54479, peak 2 rất nhỏ.
Tube 4: thu được 12 peak chia làm 2 nhóm: nhóm đầu gồm 5 peak trong khoảng thời gian lưu từnhững phút đầu đến phút thứ 6, trong đó peak 4 rất lớnvà có độ hấp thụlà 52879 ởphút thứ5, peak 1 và 5 tương đối nhỏ và những peak còn lại rất nhỏ; Nhóm thứ2 gồm 7 peak: peak 8 tương đối nhỏcòn những peak còn lại rất nhỏ.
3.2.3. Conus vexillum
Tiến hành phân tích 4 tube chứa các phân đoạnđộc tốgây chết và gây liệt trên chuột của Conus vexilum trên HPLC/UV-Vis tại bước sóng 254 nm, tốc độdòng 0.5 ml/phút. Qua khảo sát chương trình chạy gradient tại thời gian 60 phút chúng tôi thu được các sắc đồ được biểu diễnởhình 3.6:
Hình 3.13: Phổsắc ký đồ độc tốConus vexillum tại 4 tube: (A): tube 1; (B): tube 2; (C): tube 3; (D): tube 4
Qua các sắc ký đồ chúng tôi nhận thấy các peak của các mẫu độc tố ở 4 tube đều xuất hiện 1 peak rất lớn tại các khoảng thời gianlưu từ phút 5-6, các peak còn lại tương đối nhỏ và có nhiều peak rất nhỏ. Tube 1, 2 đều có 8 peak, tube 4 có 13 peak, riêng chỉcó tube 3 là chỉcó 1 peak duy nhất:
Tube 1: thu được 8 peak trong đó có peak 1 rất lớn với độ hấp thụ là 51222 tại thời gian lưu ởphút thứ6. Một nhóm gồm 5 peak với chiều cao rất nhỏtại khoảng thời gian lưu từ phút 8-11 và 2 peak rất nhỏ ởphút 24 và 41.
Tube 2: thu được 8 peak. Trong khoảng thời gian lưu từ phút thứ 4-10 gồm có 6 peak, trong đó peak thứ 2 rất lớn và có độ hấp thụ là 51364 tại thời gian lưu ở phút thứ 5. Peak 3 và 4 tương đối lớn với độ hấp thụ là
Hình 3.13: Phổsắc ký đồ độc tốConus vexillum tại 4 tube: (A): tube 1; (B): tube 2; (C): tube 3; (D): tube 4
Qua các sắc ký đồ chúng tôi nhận thấy các peak của các mẫu độc tố ở4 tube