Kết luận: Khơng có tinh dầu (-)
- Định tính chất béo: Lấy vài giọt dịch chiết ether nhỏ lên cùng một chỗ trên một miếng
giấy mỏng, hơ hoặc sấy nhẹ cho bay hết dung mơi (và hết mùi thơm nếu dịch chiết có tinh chiết có tinh dầu). Nếu tại nơi nhỏ dịch chiết có vết trong mờ: có chất béo.
Hình 3.4.1.2 Kết quả định tính chất béo (-)
42
- Định tính carotenoid: Lấy khoảng 5 ml dịch ether cho vào chén sứ, bốc hơi nhẹ tới
cắn. Thêm vào cắn vài giọt H2SO4 đậm đặc. Dung dịch có màu xanh dương đậm hay màu xanh lục ngả sang màu xanh dương.
Hình 3.4.1.3 Kết quả định tính Carotenoid
Kết luận: Khơng có Carotenoid (-)
- Định tính triterpenoid: Lấy khoảng 5 ml dịch ether cho vào chén sứ, bốc hơi tới cắn.
Hòa tan cắn với 0,5 ml anhydrid acetic rồi thêm vào dung dịch 0,5 ml chloroform. Chuyển dung dịch vào một ống nghiệm nhỏ, khô. Dùng pipet Pasteur thêm cẩn thận 1-2 ml H2SO4 đđ lên thành ống nghiệm để nghiêng cho acid chảy xuống đấy ống nghiệm. Nơi tiếp xúc giữa 2 lớp dung dịch có màu đỏ nâu hay đỏ đến tím, lớp dung dịch phía trên dần dần chuyển thành màu xanh lục hay tím : Có triterpenoid.
Hình 3.4.1.4 Kết quả định tính triterpenoid
Kết luận: Có triterpenoid (+)
- Định tính alkaloid: Lấy khoảng 10ml dịch ether cho vào chén sứ, bốc hơi tới cắn. Hòa cắn trong 2-4ml dung dịch acid hydrocloric 1%. Chia dung dịch acid vào 4 ống nghiệm nhỏ. Định tính alkaloid bằng thuốc thử Bouchardat, Mayer và Dragendorff.
So sánh kết quả với ống chứng khơng có thuốc thử. Nếu dung dịch đục hơn so với ống chứng hoặc có tủa: có alkaloid.
Màu xanh lục Màu nâu đỏ
43
Hình 3.4.1.5 Kết quả định tính alkaloid (-)
(1) Bouchardat; (2) Mayer; (3) Dragendorff; (4) Ống chứng Kết luận: Khơng có alkaloid (-)
- Định tính coumarin: Lấy khoảng 5ml dịch ether cho vào chén sứ, bốc hơi tới cắn.
Hòa cắn trong 2ml cồn 70%. Chia đều dịch chiết vào 2 ống nghiệm nhỏ. Thêm vào ống thứ nhất 0.5ml KOH 10%, và ống thứ 2 một lượng nước cất tương đương. Đun cách thủy cả 2 ống trong 2 phút, để nguội và soi dưới đèn tử ngoại 365nm. Dung dịch trong ống 1 có huỳnh quang mạnh hơn dung dịch trong ống thứ 2: có Coumarin
Hình 3.4.1.6 Kết quả định tính coumarin (-)
Kết luận: Khơng có coumarin (-)
- Định tính anthraquinon: Các hợp chất anthraquinon (dạng tự do, oxy hóa) có trong
dịch chiết ether được định tính bằng phản ứng Borntrager
Lấy khoảng 5ml dịch ether cho vào 1 ống nghiệm nhỏ. Thêm vào 1ml dung dịch NaOH 10% và lắc kỹ. Nếu lớp kiềm có màu hồng tới đỏ: Có anthraquinon dạng tự do.
(1) (2) (3) (4)
(1) (2)
44
Hình 3.4.1.7 Kết quả định tính Anthraquinon (-)
Kết luận: Khơng có Anthraquinon (-)
Dịch chiết cồn
- Định tính alkaloid: Lấy khoảng 5ml dịch cồn cho vào chén sứ, bốc hơi tới cắn. Hòa
cắn trong 2-4ml dung dịch acid hydrocloric 5%. Chia dung dịch acid vào 4 ống nghiệm nhỏ. Định tính alkaloid bằng thuốc thử Bouchardat, Mayer và Dragendorff. So sánh kết quả với ống chứng khơng có thuốc thử. Nếu dung dịch đục hơn so với ống chứng hoặc có tủa: có alkaloid.
Hình 3.4.1.8 Kết quả định tính Anthraquinon (-)
(1) Bouchardat; (2) Mayer; (3) Dragendorff; (4) Ống chứng Kết luận: Khơng có Ankaloid (-)
- Định tính coumarin Lấy khoảng 5ml dịch cổn cho vào chén sứ, bốc hơi tới cắn. Hòa
cắn trong 2ml cồn 70%. Chia đều dịch chiết vào 2 ống nghiệm nhỏ. Thêm vào ống thứ nhất 0.5ml KOH 10%, và ống thứ 2 một lượng nước cất tương đương. Đun cách thủy cả 2 ống nghiệm trong 2 phút, để nguội và soi dưới đèn tử ngoại 365nm. Sự xuất hiện của ống thứ nhất chứng tỏ có sự có mặt của coumarin. Thêm vào cả 2 ống nghiệm, mỗi ống 2.5ml nước cất. Nếu dung dịch trong ống 1 trong hơn dung dịch trong ống 2: Có coumarin
45
Hình 3.4.1.9 Kết quả định tính Coumarin (-)
Kết luận: Khơng có Coumarin (-)
- Định tính glycosid tim:
a. Định tính vịng lacton 5 cạnh:
Lấy 5ml dịch cổn cho vào chén sứ bốc hơi tới cắn. Hòa lại cắn với 2ml cồn, gạn dịch cổn vào 1 ống nghiệm nhỏ. Cho 2-3 giọt dung dịch m-dinitrobenzen 1% trong cồn 96 (rồi thêm vào 3 giọt KOH 5%) (Phản ứng Raymond-Marthoud). Nếu xuất hiện màu tím: Có các cardenolid.
Hình 3.4.1.10 Kết quả định tính vịng lacton 5 cạnh (-)
b. Định tính đường 2-desoxy:
Lấy 5ml dịch cồn cho vào chén sứ bốc hơi cho tới cắn. Hòa lại cắn với 5ml thuốc thử xanthydrol khuấy cho tan hết cắn, đậy ống nghiệm bằng nút bơng gịn, cách thủy trong 5 phút. Nếu có màu hồng đến đỏ mận: Có đường 2-desoxy.
Hình 3.4.1.11 Kết quả định tính đường 2-desoxy (-)
Kết luận: Khơng có Glycosid (-)
(1) (2)
46 - Định tính flavonoid:
a. Định tính các dẫn chất có cấu trúc -pyron và -dihydropyron
Lấy khoảng 5 ml dịch cồn cho vào chén sứ, bốc hơi còn khoảng 2 ml và gạn dịch cồn vào 1 ống nghiệm nhỏ. Thêm vào dung dịch một ít bột magiesi kim loại và 0,5 ml HCl đđ. Nếu dung dịch có màu từ hồng tới đó : Có flavonoid