Aƒpj"ikƒ"jq衣t tính kháng ti吋w"8逢運ng c栄a cao trích n医m linh chi (ガ+鐸O) thông qua
ph亥p"vt<o"泳c ch院 enzyme g-glucosidase theo công th泳c (1.5):
ガ+鐸O 噺 1&O%伐1&/
1&O% "抜 などど" (1.5)
vtqpi"8„"1&托"và 1&O大"l亥p"n逢嬰v"n "8瓜 h医p thu quang c栄a cao trích và m磯w"8嘘i ch泳ng. Giá tr鵜 IC50 8逢嬰e"zƒe"8鵜nh d詠a trên kh違 p<pi"泳c ch院 50% ho衣v"8瓜ng c栄a enzyme g-glucosidase. Giá tr鵜 này càng nh臼 ch泳ng t臼 cao trích có ho衣t tính càng cao.
Tính mずi cてa luｆp"x<p
N医m linh chi là lo衣k"f逢嬰c li羽w"8逢嬰c nghiên c泳u khá nhi隠u t衣i Vi羽v"Pco"e pi"pj逢" trên th院 gi噂i. Tuy nhiên, vi羽c nghiên c泳w"8k隠u ki羽n trích ly GPLs b茨ng k悦 thu壱t CO2 siêu t噂i h衣n v磯n còn khá ít. Bên c衣pj"8„."xk羽c áp d映ng quy ho衣ch th詠c nghi羽o"8吋v·o"tc"8k隠u
22
ki羽p"vt ej"n{"ejq"j o"n逢嬰ng GPLs cao nh医t v磯p"e”p"n "j逢噂ng nghiên c泳u m噂i. Thêm vào 8„, áp d映ng rj逢挨pi"rjƒr"rj¤p"v ej"jk羽p"8衣i pj逢"m pj"jk吋p"xk"8k羽n t穎 8k羽n t穎 swfiv"8吋 8ƒpj"ikƒ"e医u trúc b隠 m員t n医o"vt逢噂c và sau trích ly b茨ng k悦 thu壱t CO2 siêu t噂i h衣n. Ngoài tc."8ƒpj"ikƒ"eƒe"jq衣t tính sinh h丑e"pj逢"mjƒpi"qz{"jqƒ"x "mjƒpi"mjw育n góp ph亥n kh鰯ng 8鵜nh giá tr鵜f逢嬰c li羽u c栄a n医m linh chi.
A„pi"i„r"eてa luｆp"x<p
V噂i s詠 ikc"v<pi"x隠 b羽nh t壱t và ô nhi宇o"o»k"vt逢運ng, eqp"pi逢運k"8cpi"8嘘i m員c v噂i nhi隠w"piw{"e挨"違pj"j逢荏ng 8院n s泳c kho飲. Vi羽c s穎 d映ng các ho衣t ch医t có ho衣t tính sinh h丑c t瑛 th違q"f逢嬰e."8員c bi羽t là n医m linh chi 8逢嬰c chú tr丑ng. Trích ly polysaccharide t瑛 n医m linh chi b茨ng k悦 thu壱t CO2 siêu t噂i h衣p"n "rj逢挨pi"rjƒr"jk羽u qu違 và v"8瓜c h衣i góp ph亥n làm gi違m ô nhi宇m môi vt逢運ng. Ngu欝n CO2 r医t d欝i dào và phù h嬰r"8吋 làm dung o»k"ejq"swƒ"vt·pj"vt ej"n{0"A欝ng th運i, cao chi院v"e„"j o"n逢嬰ng ho衣t ch医t cao s胤 m荏 ra j逢噂ng 泳ng d映ng m噂i trong y h丑e."f逢嬰c ph育m và m悦 ph育m.
23
TH衛C NGHI烏M Hoá ch医t, d映ng c映, thi院t b鵜x "8鵜c"8k吋m th詠c hi羽n
Hoá chＸt
Các hóa ch医t s穎 d映ng trong lu壱p"x<p"8逢嬰c trình bày 荏 b違ng 2.1. B違ng 2.1: Các hóa ch医t s穎 d映ng
STT Hóa ch医t Ký hi羽u
hóa h丑c Tr衣ng thái A員c tính Ngu欝n g嘘c
1 Axit ascorbic C6H8O6 R逸n 99,7 % Trung Qu嘘c
2 Methanol CH4O L臼ng 99,5 % Trung Qu嘘c
3 Axit sunfuric H2SO4 L臼ng 98 % Trung Qu嘘c
4 D-glucose C6H12O6 R逸n 99 % Trung Qu嘘c
5 DPPH C18H12N5O6 R逸n 99,5 % A泳c
6 Ethanol C2H6O L臼ng 99,5 % Vi羽t Nam
7 Phenol C6H6O R逸n 99,5 % Trung Qu嘘c
Dつng cつ và thiｘt bお
Các thi院t b鵜, d映ng c映 ph映c v映8隠 tài t衣i Phòng Thí nghi羽m Tr丑pi"8k吋o"A衣i h丑c Qu嘘c gia TP. H欝 Chí Minh, Công ngh羽 Hóa h丑c và D亥u khí (Key CEPP Lab+."Vt逢運pi"A衣i h丑c Bách Khoa - A衣i h丑c Qu嘘c gia TP. H欝Ej "Okpj"8逢嬰c th吋 hi羽n trong b違ng 2.2.
B違ng 2.2: Các d映ng c映 và thi院t b鵜 s穎 d映ng
STT Tên thi院t b鵜 Thi院t b鵜 Thông s嘘 k悦 thu壱t
1 H羽 th嘘ng CO2 siêu t噂i h衣n Applied Separations, M悦) 8逢嬰c s穎 d映ng, có nhi羽v"8瓜 ho衣t 8瓜ng có th吋 lên t噂i 240 oC, áp su医t v壱n hành 10,000 psi (~690 dct+."n逢w"n逢嬰pi"d挨o"622" mL/phút.
24
2 B吋 siêu âm
B吋 siêu âm Sonic 410 (40 kHz-
700W) c栄a hãng Hwashin-Hàn
Qu嘘c
3 Máy ly tâm
Máy ly tâm ROTANA 460 (2000 vòng/phút) c栄a hãng
Hetich-A泳c
4 Thi院t b鵜
UV-vis
Máy UV-vis Horiba Dual-FL, Nh壱t B違n
5
Cân phân tích
Cân phân tích 4 s嘘 CPA225D c栄a hãng Satorius-A泳c
Thí nghi羽m
Aおnh danh nＸm linh chi
DNA t鰻ng s嘘 c栄a m磯u n医o"8逢嬰c tách chi院t b茨pi"rj逢挨pi"rjƒr"Sodium Dodecyl Sulfate (SDS). Ph違n 泳pi"RET"8逢嬰c s穎 d映pi"8吋 khu院ej"8衣i DNA t鰻ng s嘘 b茨ng thi院t b鵜 Crrnkgf" Dkqu{uvgouª" 4942" f詠a trên vi羽c s穎 d映ng kh違 p<pi" e栄a enzyme DNA rqn{ogtcug"8吋 t鰻ng h嬰p chu厩i ADN m噂i t瑛 chu厩k"CFP"dcp"8亥w"8逢嬰c cung c医p. Chu trình nhi羽t ph違n 泳ng PCR g欝m 95oC trong 3 phút, 35 chu kì 荏 95oC trong 1 phút, 60oC trong 30 giây, 72oC trong 1 phút và k院t thúc 荏 72oC trong 5 phút. K院t qu違RET"8逢嬰c ki吋m tra b茨pi"eƒej"8k羽n di trên gel agarose 1,5%, hi羽w"8k羽n th院 80V, 250mA, trong 40 phút.
A鵜c"8k吋m g穎i m磯u: Vi羽n Nghiên c泳u Sinh h丑e"x "O»k"vt逢運pi."vt逢運pi"A衣i h丑c Nông N¤o"Vr0JEO."rj逢運ng Linh Trung, Tp.Th栄A泳c, Tp.HCM.
25
KhＶo sát sばＶpj"j⇔ぞng cてa các yｘu tぐ8ｘp"j o"n⇔ぢng polysaccharide
2.2.2.1. Quy trình trích ly polysaccharide
Quy trình trích ly polysaccharide t瑛 n医m linh chi 8逢嬰c th吋 hi羽n 荏 hình 2.1.