Phần 4 Kết quả nghiên cứu
4.11. Đánh giá tính gây bệnh của Tospovirus bằng lây nhiễm nhân tạo
NHIỄM NHÂN TẠO
Các Tospovirus lan truyền ngoài tự nhiên bằng bọ trĩ. Tuy nhiên Tospovirus cũng có thể lây nhiễm được bằng tiếp xúc cơ học với điều kiện sử dụng đệm chiết phù hợp. Chúng tôi sử dụng đệm chiết là đệm phosphate 0.05 – 0.07M, pH 7.0, chứa 0.1% sodium sulfite, 0.2% 2-mercaptoethanol để chiết mẫu. Qui trình lây nhiễm được trình bày trong phần vật liệu và minh họa ở Hình 4.13.
Hình 4.13. Lây nhiễm Tospovirus bằng biện pháp tiếp xúc cơ học
Bảng 4.16. Kết quả lây nhiễm Tospovirus bằng tiếp xúc cơ học từ nguồn cà chua tại Gia Lâm – Hà Nội
Nguồn lây nhiễm Thời gian
lây nhiễm Cây lây nhiễm
Số cây lây
Số cây biểu hiện triệu chứng sau lây
7 ngày 14 ngày 21 ngày Cà chua với triệu
chứng lá biến vàng, đốm hình nhẫn lá tại An Lạc – Gia Lâm – Hà Nội. Lần 1 (16/4/2017) Cà chua (giống Sông Hồng 1) 5 0 0 0 Thuốc lá cảnh 5 0 0 0 Ớt (AV1) 5 0 0 0 Ớt (AV10) 5 0 0 0 Rau muối 5 0 0 0 Ớt (AV15) 5 0 0 0
Cà chua với triệu chứng lá biến vàng, đốm hình nhẫn lá tại An Lạc – Gia Lâm – Hà Nội. Lần 2 (23/4/2017) Cà chua (giống Hồng Loan) 5 0 0 3
(a) (b)
(c ) (d)
Hình 4.14. Triệu chứng lây nhiễm Tospovirus bằng tiếp xúc cơ học trên cây cà chua sau 3 tuần
(a): Cây đối chứng; (b), (c), (d): Cây bị nhiễm sau 3 tuần
Lần thứ nhất chúng tôi lây nhiễm trên một loạt các cây như: cà chua (giống Sông Hồng 1), thuốc lá, ớt, rau muối nhưng không có cây nào biểu hiện triệu chứng. Lần hai, chúng tôi lây nhiễm trên giống cà chua Hồng Loan thì có 3/5 cây biểu hiện triệu chứng: lá biến vàng và có đốm chết hoại. Như vậy, Hồng Loan là giống cà chua mẫn cảm với virus này.
Sử dụng nguồn cà chua tại Đà Lạt – Lâm Đồng đã được kiểm tra RT-PCR lên dương tính lây nhiễm lên cà chua và thuốc lá. Chúng tôi có được kết quả thể hiện ở bảng 4.17 và hình 4.15.
Bảng 4.17. Kết quả lây nhiễm Tospovirus bằng tiếp xúc cơ học từ nguồn cà chua tại Đà Lạt – Lâm Đồng
Nguồn lây nhiễm
Cây lây
nhiễm Số cây lây
Số cây biểu hiện triệu chứng sau lây 14 ngày 28 ngày Cà chua với triệu
chứng Biến vàng lá, đốm hình nhẫn trên quả tại Đà Lạt – Lâm Đồng
Cà chua 5
0 5
Ớt 5 0 0
Hình 4.15. Triệu chứng lây nhiễm Tospovirus bằng tiếp xúc cơ học trên cây cà chua sau 4 tuần
Kết quả cho thấy, sau 4 tuần, cả 5/5 cây cà chua đều biểu hiện triệu chứng rất đặc trưng: biến vàng, đốm chết hoại, đốm hình nhẫn giống với triệu chứng của cây nguồn lây. Như vậy, Tomato necrotic ringspot virus có khả năng lây nhiễm bằng tiếp xúc cơ học, biểu hiện triệu chứng đặc trưng, phù hợp với nghiên cứu của Chiemsombat et al. (2010).