CHƯƠNG 1 : TỔNG QUAN VỀ ASEN VÀ TÁCH ẠI CỦA ASEN ĐỐI VỚI CON NGƯỜI
2.3 CÁC BƯỚC NGHIÊN CỨU ĐỂ XÂY DỰNG QUY TRÌNH PHÂN TÍCH BẰNG
PHƯƠNG PHÁP VON-AMPE HÒA TAN
2.3.1 Nghiên cứu chọn dung dịch nền điện li
Dung dịch nền điện li là một yếu tố quan trọng trong phương pháp phân tích Von- Ampe hòa tan, quyết định đến độ dẫn điện của dung dịch phân tích, ảnh hưởng đến sự tồn tại của các ion, các chất cần phân tích và do đó ảnh hưởng đến cường độ dòng peak hòa tan và thếđỉnh peak.
Để lựa chọn dung dịch nền điện li, chúng tôi tiến hành theo các bước sau:
Khảo sát chọn dung dịch điện li: dung dịch điện li phải là dung dich mà ở đó chất cần phân tích cho tín hiệu Ip cao, chân peak thấp và peak cân đối.
Khảo sát nồng độ dung dịch điện li: thay đổi nồng độ dung dịch điện li trong một khoảng rộng và lựa chọn vùng nồng độ mà tại đó chất cần phân tích cho Ip ổn
định, cao và cân đối.
2.3.2 Nghiên cứu chọn các thông số kỹ thuật ghi đo tối ưu
Các thông số kỹ thuật ghi đo ảnh hưởng đến độ lớn của cường độ dòng peak cũng như thếđỉnh peak và độ phân giải của đỉnh peak. Để nghiên cứu ảnh hưởng của các thông sốnày, chúng tôi thay đổi các giá trị thông sốghi đo trong một khoảng thích hợp và ghi
đo peak tương ứng. Tổng hợp các giá trịIp ghi đo được và lựa chọn thông sốghi đo tối
ưu là thông số mà tại đó Ip đạt giá trịcao và peak cân đối.
Các thông số kỹ thuật ghi đo được nghiên cứu lần lượt như sau:
Khảo sát tìm khoảng làm việc thích hợp cho chip nano vàng
Khảo sát tìm thếđiện phân tích góp thích hợp
Khảo sát tìm thời gian điện phân làm giàu thích hợp
2.3.3 Xây dựng đường chuẩn phân tích As
Để xác định hàm lượng chất phân tích trong mẫu, người ta thường xây dựng
phương trình đường chuẩn biểu diễn sự phụ thuộc tuyến tính của I và C có dạng: I = k.C
Chúng tôi tiến hành xây dựng đường chuẩn của các chất cần phân tích ở hai vùng nồng độ As từ 10 -100 ppb và từ 100-1000 ppb. Từ đó xác định khả năng phát hiện và hoạt động của chip nano vàng.
2.3.4 Xác định LOD, LOQ
Chúng tôi tiến hành xây dựng đường chuẩn của các chất cần phân tích ở vùng nồng
độ As từ 2 -10 ppb.
Từ đó tiến hành đánh giá phương pháp dựa trên nghiên cứu độ lặp lại, tính toán giới hạn phát hiện và giới hạn định lượng của phương pháp
Giới hạn phát hiện (limit of detection - LOD) là nồng độ nhỏ nhất của chất phân tích có thể tạo ra được tín hiệu có khả năng phân biệt một cách tin cậy với tín hiệu mẫu trắng (hay tín hiệu nền). Có nhiều quan điểm khác nhau về cách xác định giới hạn phát hiện, phổ biến nhất là cách xác định giới hạn phát hiện theo quy tắc 3σ. Theo quy tắc này,
LOD được quy ước là nồng độ của chất nghiên cứu cho tín hiệu cao gấp 3 lần độ lệch chuẩn của đường nền
LOD = 3σ Trong đó 2 ( ) 1 i C C N : Độ lệch chuẩn Ci : nồng độđo lần thứ i C : giá trị trung bình nồng độ As N : số lần thực nghiệm
Giới hạn định lượng (limit of quantitation – LOQ) là nồng độ nhỏ nhất của chất phân tích mà hệ thống phân tích định lượng được và có ý nghĩa định lượng so với tín hiệu của mẫu trắng (hay tín hiệu nền). Thông thường giới hạn định lượng được tính bằng công thức sau :