CHƯƠNG 3 : KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.3. Ảnh hưởng của polysaccharide đến sự phát triển của vi sinh vật có lợi
Hệ vi sinh vật đường ruột có chức năng bảo vệ, chuyển hóa và miễn dịch đối với cơ thể vật chủ. Mối quan hệ cộng sinh giữa hệ vi sinh vật đường ruột và vật chủ được điều hịa và duy trì sự ổn định nhờ vào sự trao đổi thông tin chéo. Sự trao đổi này là qua trung gian các chất chuyển hóa tổng hợp của hệ vi sinh vật cũng như của cơ thể vật chủ như các phân tử tín hiệu điều hịa thần kinh miễn dịch, đáp ứng viêm nhằm kết nối thông tin tại đường ruột với các cơ quan khác (Ren & Lotfipour, 2020). Lactobacillus plantarum là một vi sinh vật có lợi trong hệ đường ruột. Sử dụng PS chiết xuất từ C. militaris bổ sung vào
0.6142 0.1906 0.0569 12.26% 72.77% 91.87% 0.00% 10.00% 20.00% 30.00% 40.00% 50.00% 60.00% 70.00% 80.00% 90.00% 100.00% 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6 0.7 ĐC (-) PS VTM C Hiệu s uất (%) OD 7 3 4 n m Mẫu Hoạt tính bắt gốc tự do
25
mơi trường ni cấy L. plantarum nhằm theo dõi sự kích thích tăng trưởng của PS đối với
L. plantarum.
Chủng Lactobacillus plantarum được ni cấy trong mơi trường MRS có và khơng bổ sung PS chiết xuất từ nấm C. militaris, chúng được so sánh với FOS và Inulin. Kết quả biểu diễn ở bảng 3.1
Bảng 3.1. Sự tăng trưởng của Lactobacillus plantarum nuôi ở các nghiệm thức
nghiên cứu, ở 37 ° C trong 24h.
Mẫu OD Mật độ tế bào (CFU/ml)
CT1 3.1768±0.0028a 1,06× 1010
CT2 3.1866±0,0112a 1,23× 1010
CT3 3.2648±0.014b 2,16× 1010
CT4 3.2292±0,0013c 2,58× 1010
Ghi chú: các chữ cái a, b, c thể hiện sự sai khác nhau ở mức ý nghĩa p<0.05, giá trị bằng giá trị trung bình ± SD (n=3).
Kết quả tóm tắt trong bảng 3.1 cho thấy rằng tất cả các nuôi cấy đều không ức chế sự tăng trưởng của L. plantarum. Đáng chú ý rằng ở CT4 (ni cấy có bổ sung chiết xuất PS từ nấm) có sự phát triển cao 3,2292±0,0013, cao hơn CT1(3,1768±0.0028). Hiệu suất kích thích tăng trưởng của CT4 là 1,65%, điều này là phù với nghiên cứu của Sawangwan et al, 2018. Trong nghiên cứu của Sawangwan et al, (2018) đã khảo sát hoạt tính kích thích sinh trưởng của vi sinh vật có lợi từ dịch chiết 7 loại nấm, tất cả môi trường bổ sung chiết xuất nấm đều cho giá trị cao hơn so với mẫu không bổ sung chiết xuất nấm. Mặt khác, trong thí nghiệm của chúng tôi mẫu bổ sung chiết xuất PS cịn có sự phát triển cao hơn mẫu prebiotics thương mại FOS (3.1866±0,0112). Điều này có thể được giải thích nhiều hơn bởi nghiên cứu của Nowak et al, (2018) trong đó đã khảo sát khả năng của polysaccharid từ 53 loài nấm, để thúc đẩy sự trao đổi chất của các vi sinh vật có lợi như chủng
Lactobacillus. Trong nghiên cứu đó, polysaccharide trong nấm kích thích sự phát triển
mạnh mẽ hơn của vi sinh vật có lợi so với prebiotics thương mại như FOS và inulin. Sau khi xác độ mật độ quang của Lactobacillus plantarum tiếp theo tiến hành cấy trải đĩa để xác định mật độ tế bào. Kết quả được biểu diễn ở hình 3.4.
26
Hình 3.4. Số lượng khuẩn lạc L. platarum trên mơi trường MRS.
Trong đó, A: L. plantarum nuôi cấy trong CT1, B: L. plantarum nuôi cấy trong CT2, C: L. plantarum nuôi cấy trong CT3, D: L. plantarum nuôi cấy trong CT4
Kết quả bảng 3.1, hình 3.4 cho thấy lượng số khuẩn lạc trung bình của mơi trường có bổ sung chiết xuất PS là 2,58× 1010 (CFU/ml), tương ứng OD = 3.2292±0,0013, lớn hơn môi trường trường không bổ sung PS (số khuẩn lạc trung bình 1,06× 1010 (CFU/ml) và FOS (số khuẩn lạc trung bình 1,23× 1010 (CFU/ml), OD=3.1866±0,0112) điều này phù hợp với kết quả thí nghiệm trên. Ngược lại, mơi trường ni cấy bổ sung Inulin có giá trị OD là 3.2648±0.014 lớn hơn môi trường bổ sung chiết xuất PS, OD = 3.2292±0,0013 nhưng mật độ khuẩn lạc trung bình (2,16×1010 CFU/ml) nhỏ hơn mơi trường bổ sung chiết xuất PS (2,58×1010 CFU/ml), điều này có thể là do số lượng tế bào sống ở pha cân bằng của môi trường bổ sung Inulin thấp hơn môi trường bổ sung chiết xuất PS từ hệ sợi nấm.