CHƢƠNG 2 PHẦN THỰC NGHIỆM
2.3.1. Thu nhận các dịch chiết
Mẫu cây tươi mới thu hái được sấy khơ đem nghiền nhỏ rồi ngâm kiệt với metanol ở nhiệt độ phịng cho đến khi nhạt màu. Dịch chiết được cất loại dung mơi ở áp suất giảm. Cặn dịch chiết metanol được chiết lần lượt với n- hexan, etyl axetat, metanol rồi làm khan bằng Na2SO4, cất loại dung mơi dưới áp suất giảm thu được các cặn chiết tương ứng. Việc thu nhận các dịch chiết từ thân cây Na leo (Kadsura heteroclita) được tĩm tắt trong sơ đồ 2.1.
Số hĩa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn
Sơ đồ 2.1: Sơ đồ ngâm chiết mẫu thân cây Na leo (Kadsura heteroclita)
1. MeOH
2. Cất loại dung mơi dưĩi áp suất giảm 3. Cặn
KhH KhE KhM
Các phân đoạn dịch chiết nĩi trên được làm khan bằng Na2SO4 , lọc rồi cất kiệt dung mơi dưới áp suất giảm, cặn được sấy khơ và cân đến khối lượng khơng đổi. Như vậy từ thân cây Kadsura heteroclita sẽ cĩ 3 loại cặn
chiết được ký hiệu là:
KhH, KhE, KhM,
Ký hiệu:
KhH: Cặn chiết n-Hexan của thân cây Na leo (Kadsura heteroclita) KhE: Cặn chiết EtOAc của thân cây Na leo (Kadsura heteroclita) KhM: Cặn chiết MeOH của thân cây Na leo (Kadsura heteroclita)
Kết quả thu nhận các dịch chiết từ thân cây Na leo ở Tam Đảo – Vĩnh Phúc được nêu trong bảng 2.1
Mẫu khơ (3,5kg) nghiền nhỏ n- hexan ( 50,2g ) Etylaxetat ( 38.9g ) Metanol ( 58,1g) Cặn tổng Metanol (147,9 g)
Số hĩa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên http://www.lrc-tnu.edu.vn (Kadsura heteroclita) Mẫu thu vào tháng 10/2011 Khối lƣợng mẫu khơ (g)
Khối lƣợng cặn chiết thu đƣợc (g)
n-hexan EtOAc MeOH
Thân 3500g 50,2g KhH 38.9g KhE 58,1g KhM 2.3.2. Khảo sát định tính các dịch chiết 2.3.2.1. Phát hiện các hợp chất sterol
Lấy 0,01g cặn của các phân đoạn, thêm 2ml dung dịch NaOH 10% đun cách thuỷ đến khơ. Hồ tan cặn trong 3ml cloroform - lấy dịch cloroform để làm phản ứng định tình các sterol và thuốc thử Lieberman - Bourchardt (gồm hỗn hợp 1ml anhydric acetic + 1ml cloroform để lạnh ở 00C, sau đĩ cho thêm 1 giọt H2SO4 đậm đặc). Lấy 1ml dịch cloroform rồi thêm 1 giọt thuốc thử, dung dịch xuất hiện màu xanh trong 1 thời gian là phản ứng dương tình.
Ống (3): 3 - 5 giọt thuốc thử Mayer, nếu xuất hiện tủa trắng là phản ứng dương tình.